不同產地桃花中黃酮含量測定及抗氧化活性研究*

魏山山，陳琳琳，李德順

（山東醫藥技師學院，泰安 271000）

不同產地桃花中黃酮含量測定及抗氧化活性研究*

魏山山，陳琳琳，李德順

（山東醫藥技師學院，泰安 271000）

文章從不同產地桃花中提取黃酮并研究各自抗氧化活性。經測定可得肥城、新泰、泰安桃花峪3種不同產地桃花中黃酮含量分別為52.91±0.65 mg/g、43.78±0.59 mg/g、85.38±0.79 mg/g。3種不同產地桃花黃酮對·OH、·O2-自由基都有一定清除能力。在試驗濃度下，肥城桃花黃酮對·OH自由基和超氧陰離子整體清除率均高于泰安桃花峪、新泰桃花多糖，具有較高的抗氧化活性。

桃花 黃酮含量 抗氧化性

桃花是薔薇科李屬落葉喬木桃樹（Prunus persica Batsch）的花[1]。文獻記載桃花具有很好的美容養顏、延緩衰老的功效。《國經本草》中記錄：采新鮮桃花，浸酒，每日喝一些，可使容顏紅潤，艷美如桃花。《普濟方》在介紹桃花酒的制法與功用時說：三月三采新鮮桃花，以上等白酒浸泡，49日后服，久服可除病益顏，此類功效主要是源于花中含有酚類、多糖和黃酮類等生物活性成分。這些物質大多屬于抗氧物質，并且能很好地擴張血管，疏通脈絡，潤澤肌膚[1]，改善血液循環，促進皮膚營養和氧供給，使促進人體衰老的脂褐質素加快排泄，防止黑色素在皮膚內慢性沉積，從而能有效地預防黃褐斑、雀斑、黑斑，達到美白祛斑的功效。

目前，有一些針對桃花黃酮抗氧化活性的研究成果，如劉杰超等人從桃花中提取總黃酮，并進一步用Photochem抗氧化劑和自由基分析儀對各提取物的抗氧化活性進行分析測定，顯示提取物對自由基都具有一定的清除作用[2]。

不同種[3]或不同種源地[4]，甚至不同海拔的資源[5]在抗氧化活性中存在一定的差異。泰安桃花峪、新泰桃花以其桃花的觀賞價值而聞名，而泰安肥城獨特的氣候和水土條件[6]孕育了肥城桃獨特的品質，被譽為“群桃之冠”。該研究以新泰、肥城、泰安3個地方的桃花樣品為研究對象，測定其中黃酮含量并比較其抗氧化性之間的差異，為進一步開發泰安地區桃花藥用和保健功能提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

桃花樣品：肥城、新泰、泰安桃花峪3個地區的桃花樣品。

試劑試藥：95%乙醇（AR）；亞硝酸鈉（AR）；硝酸鋁（AR）；氫氧化鈉（AR）；蘆丁標準品（批號：10080-200707，純度90.5%）。

1.2 儀器設備

CP114電 子 天 平（ 感 量0.1 mg，0.01 mg）；HHW420水浴鍋；UV 2003紫外分光光度計。

1.3 桃花黃酮的提取與含量測定

取桃花花瓣放于通風干燥處自然陰干，粉碎后稱取樣品1 g，放于具塞三角瓶中，以料液比1∶50加入60%乙醇溶液浸泡5 min，然后置于水浴鍋中在60℃下提取，不時振蕩，提取2 h后抽濾，此過程重復3次，合并提取液，減壓濃縮。以60%乙醇溶液定容至50 ml，作為供試品樣液，測定提取液中總黃酮的含量。

精密稱取蘆丁對照品，加95%乙醇，溶解配制質量濃度為0.1 g/L的蘆丁標準溶液，分別精密吸取對照液0.0 ml、1.00 ml、2.00 ml、3.00 ml、4.00 ml、5.00 ml、6.00 ml和0.25 ml樣液置于25 ml比色管中，加水至6 ml，分別加入5%亞硝酸鈉溶液1 ml，混勻，靜置6 min，再加10%硝酸鋁溶液1 ml，混勻，放置6 min，再加4%氫氧化鈉溶液10 ml，用60%乙醇稀釋至刻度，搖勻，靜置12 min；以試劑作空白參比液，于510 nm處測定吸光度，以吸光度和蘆丁含量制作標準曲線。

1.4 桃花黃酮抗氧化活性測定

1.4.1 羥自由基（·OH）的清除能力測定

參照Fenton反應的方法建立·OH自由基產生體系模型，先加入9 mmol/L FeSO41.00 ml，9 mmol/L水楊酸-乙醇1.00 ml，混勻，再分別加入待測溶液各0.5 ml、1 ml、1.5 ml、2 ml，并用去離子水將反應體系補至10 ml。最后加8.8 mmol/L H2O21.00 ml啟動反應，在37℃水浴中加熱30 min，以蒸餾水為參比，在510 nm處測其吸光度，平行測定3次。

清除率（%）=[A對照-（A樣品-A0）/A對照]×100

式中：A對照為不加樣品的吸光度；A樣品為加樣品的吸光度；A0為不加H2O2的吸光度。

1.4.2 超氧自由基（·O2-）的清除能力測定

取0.05 mol/L，pH7.4， 含1 mmol/L Na2EDTA Tris-HCl緩沖液2 950μL加入到石英比色皿中，再加約60mmol/L連苯三酚溶液50μL，顛覆式迅速混合，開始計時，每隔30秒讀數1次A值（325 nm），至300秒（5 min）時為止。取xμL待測溶液加入到大石英比色皿中，再加（2 950-x）μL Tris-HCl緩沖液，再加50μL連苯三酚溶液，迅速混合，開始計時，每隔30秒讀數1次（A值，325 nm），至300秒時為止。

圖1 蘆丁標準曲線

清除率＝（ΔA0-ΔA樣）/ΔA0×100，ΔA0＝A325 nm，300 s - A325 nm，30 s，ΔA樣＝A325 nm，300 s -A325 nm，30 s

2 結果與分析

2.1 3種桃花黃酮的含量

回歸方程為Conc.=1.7948×ABS-0.0022，R=0.9998，式中：Conc.-0.25 ml提取液中黃酮質量，mg；ABS-吸光度；R-相關系數。結果表明：在0.0～0.6 mg范圍內線性關系良好。根據標準曲線（圖1）計算肥城、新泰、泰安桃花峪桃花的黃酮含量分別為52.91±0.65 mg/g、43.78±0.59 mg/g、85.38±0.79 mg/g。

2.2 3種桃花黃酮溶液的抗氧化活性

桃花黃酮溶液對羥自由基（·OH）的清除能力如圖2所示，桃花黃酮溶液對超氧自由基（·O2-）的清除能力如圖3所示。不同樣品的黃酮溶液都具有一定的清除·OH和·O2

-的能力，就總體清除效果而言，肥城桃花黃酮提取液對·OH和·O2-的能力都較強，新泰桃花黃酮提取液對·OH的清除率較強而對·O2-的清除率相對較弱，而泰安桃花對·O2-的清除率較強而對·OH的清除率相對較弱，說明不同樣品的黃酮溶液對·OH和·O2-的清除作用有一定的選擇性。

圖2 桃花黃酮溶液對羥自由基（·OH）的清除效果比較

圖3 桃花黃酮溶液的對超氧自由基（·O2-）的清除效果比較

3 結論

經測定，肥城、新泰、泰安桃花峪3種不同產桃花中黃酮含量分別為52.91±0.65 mg/g、43.78±0.59 mg/g、85.38±0.79 mg/g。3種桃花黃酮溶液對羥自由基和超氧陰離子的都有一定清除能力，肥城桃花黃酮溶液對羥自由基和超氧陰離子的清除綜合能力高于其余2種，抗氧化活性更好。

[1] 中國科學院中國植物志編輯委員會．中國植物志．北京：科學出版社，1983

[2] 劉杰超，張春嶺，呂真真，等．桃花中總酚和總黃酮的提取及抗氧化活性研究．食品安全質量檢測學報，2013，6：1 750～1 756

[3] 武靜文，袁藝，王文文，等．不同種竹筍及筍殼提取物抗氧化活性的研究．激光生物學報，2011，2

[4] 馬超，嚴寒靜，糖醇萍，等．不同種源地何首烏抗氧化作用的比較研究．廣東藥學院學報，2008，6

[5] 梁建萍，牛遠，謝敬斯，等．不同海波華北落葉松針葉三種抗氧化酶活性與光合色素含量．應用生態學報，2007，7

[6] 康桂玲，楊秋榮，曹積飛，等．山東肥城桃優質高產與地質環境的關系．河北農業科學，2008，12（12）

泰安市大學生科技創新行動計劃項目（2014D124）