禽類病料采集注意事項

丁 勇

（河北省懷安縣畜牧水產局，河北張家口076150）

禽類病料采集注意事項

丁 勇

（河北省懷安縣畜牧水產局，河北張家口076150）

隨著養殖規模不斷擴大與集約化快速發展，動物防疫水平不斷提升，疫病監測在各級動物防控部門實驗室內被啟動，能夠準確評判禽類的免疫水平與狀況的重要方法是實驗室血清學檢測和檢測（包括組織器官、糞便及各種棉試子）樣品的實驗研究方法。監測就需要大量的血清和檢測樣品，采血是取血清的主要手段。采血是一項提前性的工作，采血質量的好壞直接影響到能不能進行監測和實驗結果的判定，樣品的采樣時間、處理方法、保存條件、運送條件都關系著檢驗結果的準確性、可靠性。

1 禽的采血技術

1.1 采血前的準備工作采血前的準備工作及采血用具的消毒均按常規操作來完成。采血部位按常規規程進行剪毛、清洗與消毒。

采血過程要防止流散與傳染，殘余血液及所用的器具全部進行消毒，如針頭、針管等；也可焚燒深埋。

抗凝劑的選用（指用全血的樣品），常用的抗凝劑有：①枸椽酸鈉，常用3.8%的溶液，適用于血鈣的測定和血測定時的抗凝；②肝素：肝素鈉1ml內含1mg（0.1%）的水溶液，取0.1ml分裝于小試管或小玻璃管（5ml或10ml）在80℃下烤干后備用可使5～10ml血液不凝固，肝素對血中有機成分和無機成分測定均無影響；③雙草酸鹽抗凝劑，可用市售，也可自己制備草酸銨1.2g、草酸鉀0.6g、蒸餾水100ml溶解，適量加入供采血用的試管或小瓶中，一般0.5～1ml，置干燥箱內，80～100℃烘干備用；④乙二胺四乙酸二鈉10mg可抗凝5ml全血，或亦可配成10%的溶液2～3滴可使5ml全血抗凝。

分離血清時，放置血液的試管、小玻璃瓶要傾斜成45℃角靜置，利于血清析出。

人員自我防護，要佩戴眼鏡、口罩、頭盔與穿防護服等。

1.2 血液的采集方法

1.2.1 禽冠采血法用針頭刺破禽冠吸取血液或在禽冠尖端剪開一個小口子，吸取血液時需用手擠壓禽冠一次可吸取50～60μl血，供作血涂片用。多用于需血量較小的采血，注意消毒工作，同時作好止血，可用碘酒涂抹傷口。

1.2.2 禽頸靜脈采血法右側頸靜采血，左手食指和中指夾住禽頭部，并使頭偏的一側、無名指、小指和手掌握住軀干，拇指壓靜脈心臟端以使靜脈充血舒張。右手持注射器、針頭由翼根部向翅膀方向沿靜脈平行刺入羽翼、傾斜45℃沿血管方向一側0.3～0.5cm挑破皮膚前行0.3～0.5cm刺入靜脈，再與血管平行進針0.2～0.5cm抽取血液。完畢后壓迫針眼處止血。用碘酒或酒精棉球壓迫針刺處止血。適用于30日齡內的禽類。

1.2.3 禽翅內側靜脈采血法可采血10～20ml，①器械用具的準備：棉球、小試管或細塑料管、試管架、鑷子、7＃針頭的一次注射器；②保定：手提保定。助手一手抓住兩條禽腿，一手抓禽翅根部，以拇指按壓靜脈；③部位選擇確定：注意術者左手大拇指捏住雞禽內側，其余四指捏住禽翅外側展平禽翅，右手握針，沿血管方向刺入。

1.2.4 禽心臟采血法①禽左側向上橫臥保定、拔去胸上部羽毛，尋找由胸骨走向肩胛的皮下大靜脈，用酒精棉球消毒，后碘酊棉球標記部7#針頭刺入時，避開胸骨向里刺入，邊刺邊抽動活塞，若刺入心臟，便有血液涌入注射器；②禽仰臥保定，禽頭部朝向術者，拔去胸上部少許羽毛，用手指在胸骨上一方、嗉囊下方摸得一凹窩，右手持7#針頭自持有血液涌入注射器，取血后做止血與消毒工作。

2 禽類的病料采集

2.1 采集病料樣品是診斷檢測中至關重要的，采集的樣品具有代表性、時效性、普遍性。病料采集應符合以內容：①典型性：選取癥狀最典型或病變最明顯，具有代表性、普遍性，最好未經藥物治療過的病料；②合理病料采樣的比例性：根據診斷檢測規程的具體要求，要嚴格按照規程要求采集足夠數量的樣品，不同疫病的所需樣品不同，應按疑似疫病的具體要求來采集病料；③適時性，根據檢測要求及檢測對象和檢驗項目的不同，選適當的采樣時機，對檢測結果很重要，因此樣品采集有時間上要求，應嚴格按規定的規程時間范圍取樣；④無菌操作采樣。采集檢驗樣品，要供病理組織學檢驗、病原學、血清學檢驗使用，要無菌操作，對用具、容器需事先做好消毒滅菌工作，按具體規程來操作。特別是尸體剖檢時需先采集樣品，后剖檢，以免人為污染。病理組織學檢查可選用典型病的剖檢后的樣品。樣品數量要滿足診斷檢測的需要，并留有余地，以備必要時復檢使用；⑤保存。一個樣品一個容器，立即密封，作冷藏、冷凍或其他處理，供病毒學檢驗的樣品，數小時內要送到實驗室，超時應冷凍保存，裝樣品的容器應貼上標簽，標簽要防止因凍結而脫落，寫明采集時間、地點、禽名稱、發病時間、死亡等具體相關信息；⑥人員安全與樣品包裝。首先采樣人自身安全按防護規程要求來做，同時防止病原擴散，防止它本身被外部環境的污染，包裝樣品應防止損壞、污染和外泄等。按規定的時間迅速送檢，以免延誤送檢時間而影響檢測質量和結果的真實性與可靠性。

2.2 血液的采集

2.2.1 病毒學檢驗血液樣品應選擇動物發病初體溫升高期時來采樣。全血樣品必須是脫纖維或抗血凝血，可選用肝素。而枸櫞酸鈉對病毒有輕微的毒性作用可殺死病毒，一般不宜采用。按常規操作規程準備真空采血等或其他滅菌容器內每ml血液樣品外加0.1%肝素1ml，加入血液應搖均混合。用脫纖血時，先在容器內加入適量小玻璃球，加入血液后，反復震蕩（亦可用震蕩器震蕩），以便脫云血液纖維，采得的血液經密封后貼上標簽，以冷藏狀態立即送實驗室。必要時，可在血中按每毫升加入青霉素和鏈霉素各500～1000IU，以抑制血源性或采血中污染的細菌。

2.2.2 細菌學檢驗樣品采血應在發病初期或發病高峰期，最好為未經抗生素藥物治療期間采集。血中應同時加抗血凝劑，但要注意不加雙抗（青鏈霉素）或慶大或其它抗生素。血液密封貼標簽送檢，置4℃冰箱備用，但存放時間不宜過久，以免發生溶血。

2.2.3 血清學檢驗樣品用作血清學檢驗的血液不加抗凝劑或脫纖處理。為保障血清質量，一般情況下，空腹采血較好。采得的血貼上標簽，室溫靜置待凝固后送實驗室，并盡快將自然析出的血清或經離心分離出的血清吸出，按需要分裝若干小瓶密封，再貼上標簽冷藏保存備檢或冷藏送檢。

2.2.4 寄生蟲檢驗因不同的血液寄生蟲在血液中出現的時機及部位各不相同，因此，需要根據各種血液寄生蟲的特點，取相應時機及部位的血制成血涂片，送實驗室。

2.3 組織樣品采集按常規要求采取內臟，注意應用PBS液即可。

2.4 糞便樣品的采集病毒學檢驗樣品，用新鮮糞便滅菌的棉拭子從直腸深處或泄殖腔粘膜上蘸取糞便，并立即放入裝有PBS液的試管內密封。細菌寄生蟲檢驗樣品與之相似。

2.5 禽流感樣品采集及相關運輸保存禽流感病毒主要在呼吸道粘膜細胞內增殖，一般最少要求8只頻臨死亡的病禽采集樣品，泄殖腔拭子、器官拭子、肺與氣管混合樣、腸管及內容物的混合樣，肝、脾、腎和腦、肺等組織混合樣各8個。

2.5.1 泄殖腔棉拭子將棉拭子插入肛門并旋轉，使糞便粘在棉拭子上，后放人PBS液的緩沖液中送檢運輸。

2.5.2 氣管棉拭子：活禽采樣時，將置棉拭子插入活禽的氣管內，輕輕擦拭氣管壁并放入緩沖液中。

2.5.3 糞便，采取瀕臨死亡禽的新鮮糞便，用棉拭子沾取糞便，并將采好的樣品放在PBS緩沖液中。

2.5.4 采集15只病禽血液樣本，采血樣為3～ 5ml，自然析出血清或離心均可，同時棉拭子為防止感染可用下列PBS液；pH值調為7.0～7.4的PBS值，加入3000IU/ml青霉素、鏈霉素3mg/ml、慶大霉素1萬～2萬IU/ml、制霉菌素（10000IU/ml），但糞便和泄殖腔拭子抗生素為1.5萬IU/ml，制霉菌素（50000IU/ml），pH值應調至7.4。

2.6 獸醫人員安全防護注意事項獸醫工作人員尤其是病料采集人員，由于頻繁接觸患病動物，所以是人畜共患病的高危人群。鑒于上述原因，工作人員尤其是從事禽病的，在采集病料時應該注意以下幾點：第一，注意飲食衛生，禁止食用死亡的禽類；第二，如果條件允許，可以接種疫苗。接種疫苗的主要目的是降低感染傳染病的幾率；第三，工作人員在采集病料時更應注意個人衛生，工作時戴口罩、穿工作服（防護服）、戴手套，接觸患禽或其糞便等污染物后要勤洗手，并保持工作環境中空氣流通；第四，工作人員應該對禽類糞便作及時處理，注意禽舍的消毒。

2016年蛋雞養殖行業前景分析：四化水平不斷提升

中國是目前國際上最大的雞蛋生產國，蛋雞養殖產業也是國內畜牧業的主導產業之一。2015年是我國蛋雞行業快速調整的一年，持續的行情低迷在一定程度上加速了行業整合的速度。

2016年蛋雞養殖前景分析中國蛋雞業正在走標準化、規模化、產業化、生態化發展之路。產區分化，區域化、本地化繼續深化。商品蛋雞養殖格局也一直在發生變化，傳統主產區養殖總量在不斷減少的同時，規模有所提高；非傳統主產區總量和規模都在大幅提高。規模養殖量在50萬只以上的養殖在全國各個區域均有出現。未來明顯的產銷區界限將不斷弱化，像東三省、河北、山東和河南等傳統主產區的供應能力和半徑也將不斷地減少，傳統主產區、非主產區都將以本地化為主，將形成以京津冀、長三角、珠三角三大主銷區為核心的養殖布局，銷區在整個雞蛋流通和價格上的風向標作用將會更明顯。

產業鏈競爭的局面越來越明顯近年來，以前專業生產種雞的企業開始往下延伸，打造自己的品牌蛋，通過多種方式拓展品牌雞蛋市場，而有些也開始向上延伸，進入種雞行業。北京德青源農業科技公司提出的蛋雞云養殖模式，旨在打造蛋雞行業的公司加農戶模式，同時內部形成從祖代種雞養殖到生產資料提供、雞蛋回收的閉環模式。以前主要是做飼料銷售的北農大集團和北京偉嘉集團也開始介入雞蛋回收，將服務進一步延伸。未來行業商品蛋雞的競爭會是以集團化為核心的整個產業鏈的競爭。

金融資本將對行業發揮作用蛋雞保險能夠為蛋雞行業起到保駕護航的作用；融資租賃能夠提升設備的現代化;雞蛋期貨能幫助蛋雞企業規避一定的市場風險。

抗生素的使用越來越受到限制隨著食品安全檢測越來越嚴格，抗生素的危害為大眾所認知，品牌雞蛋會受到更嚴格的監控，抗生素的使用也會受到更嚴格的限制。

適度規模化發展將成為主流，“四化”水平將不斷提升現在，各大型種雞生產企業和商品代生產企業開始在全國范圍內布局，每個養殖點種雞的飼養量不會超過50萬套，商品代的飼養量也保持在每個獨立場區在50萬只左右，每個場與場之間至少保證10公里以上的安全距離，這樣即可以保證運輸的半徑，同時有利于疫病的防控和其他風險的控制，因此，未來這種分區域適度規模的生產模式將成為主流。未來5～10年我國蛋雞養殖存欄3萬～5萬只雞養雞場將成為未來雞蛋來源的主要提供者。

“人管機器，機器養雞”將越來越普遍，未來智能化必然成為行業的選擇。

S858.312.1

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1673-1085（2016）03-0040-03

2016-02-15