曾 朔
(新疆生產建設兵團第六師五家渠市畜牧獸醫工作站,新疆五家渠 831300)
影響動物疫病實驗室檢測結果準確性的因素
曾 朔
(新疆生產建設兵團第六師五家渠市畜牧獸醫工作站,新疆五家渠 831300)
近幾年來,在我國大部分地區畜牧業都發展迅猛,取得優異成績。由于畜牧業的發展水平直接決定農村經濟的發展,對于畜牧業中存在的主要問題動物疫病也就值得深入探究。由于飼養管理水平落后、飼養密度加大,動物疫病的發生和發展也日趨復雜,嚴重影響到了畜牧業的健康穩定發展。簡潔、迅速以及經濟實惠的動物疫病實驗室診斷方法越來越受廣大養殖場戶的歡迎。
畜牧業;動物疫病;實驗室檢測
對于畜牧業而言,首要的問題就是動物疫病的診斷以及控制。對于動物疫病的診斷,實驗室檢測是診斷動物疫病的重要方法之一,尤其是在混合感染、合并感染日趨復雜的今天顯得尤為重要。對于影響動物疫病實驗室檢測結果準確性的因素的探究,具體如下:
目前,對于常規的實驗室檢測而言,人是非常重要的因素之一,同時也是必不可少的影響因素之一,因此極大的降低人為因素是目前首先應當解決的問題。人為因素影響實驗室檢測主要是指檢測人員的科學文化水平、遇到問題分析、工作的嚴謹程度,試驗操作的熟練程度和解決問題的能力等。例如在常規實驗中的在做血凝試驗(HA)或者是酶聯免疫吸附試驗(ELISA)時,移液器吹打力度的大小會影響樣品的混勻程度和酶標反應板洗的干凈程度;每個試驗步驟的反應時間延長和縮短都會或多或少影響檢測結果數值的大小。除此之外,應當格外注意無菌操作,例如病毒性腹瀉豬的檢測中,對操作環境進行時常30min的紫外線消毒,保證超凈臺處于正常工作的狀態,同時對于操作者的要求是使用酒精棉進行雙手的消毒。隨后將培養基進行消毒,主要是使用酒精棉球進行擦拭,隨后放置于超凈工作臺備用,與此同時點燃酒精燈。同時要保證環境無菌以及培養液的無菌。
硬件設備是影響實驗結果的主要因素之一,在常見實驗中由于儀器的種類、型號、技術參數以及廠家的差異,往往會導致實驗結果的不同。常見的儀器,例如離心機,包括高速離心機、低速離心機、冷凍離心機以及常溫離心機;例如先進儀器包括國產與進口之分等等。因此使用較為精密的儀器會極大的降低實驗室檢測誤差,對于疾病的診斷具有極其重要的秘密。
實驗室常見的檢測的樣品主要包括血清樣品、排泄物樣品、分泌物、臟器組織樣品等等。例如:血清樣品的影響在做血清學試驗時,血清樣品的溶血情況或者溶血程度的大小都會直接影響抗體水平的準確度以及精確度。臟器組織樣品的影響主要體現在細菌、真菌或者是病毒宿主在動物不同的臟器宿主情況,直接導致不同器官的形態組織變化以及生化檢測情況。例如:病毒性腹瀉豬的檢測中,通常情況下十天大的仔豬發病后的死亡率可達九成左右,而半個月大的仔豬的存活率較高,但通常會導致體質虛弱以及脫水,多數會變成形成僵豬,表現為精神狀況正常,飲食方面與正常豬無異,但體積與正常豬比較偏小以及生長速度緩慢。體重較重的豬、以及成年豬通常臨床變現較輕,但泌乳母豬例外,其發病較為重,通常臨床表現為急劇的體溫升高、劇烈的嘔吐并伴隨腹瀉,嚴重時還出現厭食以及泌乳停止的癥狀。經過對病豬解剖發現,該病的病變部位主要在中部的消化道,往往發生于胃和小腸。多數患豬出現胃被凝乳顆粒填滿的現象,同時還伴隨著胃黏膜與腸壁充血嚴重有出血現象。同時,樣品的采集方法也是重要的影響因素,例如:一般情況下根據豬的年齡調整采血的部位,一般體重25kg以內的仔豬,通常使用采集前腔靜脈學。具體步驟主要是首先將豬固定在仰臥位,在豬胸前口凹陷處進行碘酒消毒,使用無菌注射器進行抽吸,邊刺入邊做抽血動作。該種方式極易抽取;一般體重在25kg以上的中大豬通常采集耳靜脈血,具體步驟主要是將豬固定于站立位,通常情況下選擇耳緣靜脈進行抽血,因為該靜脈最為粗大,注意抽血前應當進行消毒以確保實驗結果的可靠性。
對于動物疫病的實驗室檢測而言,檢測方法有細菌、病毒的分離鑒定、血凝抑制試驗、病毒中和試驗、沉淀試驗、酶聯免疫吸附試驗、血凝試驗、補體結合試驗、聚合酶鏈式反應試驗等等。不同方法的選擇直接影響到實驗室結果,例如:在PRV-g E 抗體檢測時,病原對增殖方法更敏感。病毒中和試驗方法是近年來隨著分子生物學發展而形成一種新型的技術,其原理主要是利用抗原抗體結合的原理,病毒和對應的抗體結合后,進而失去對宿主的致病力。免疫膠體金技術是近年來較新興的生物技術,主要采用的原理是抗原抗體結合,該技術將膠體金作為示蹤標志物用來觀察抗原抗體特異性結合。這項技術的主要優點是便于操作,耗時短,要求較低,得到的結果較精確。
對于動物疫病實驗室檢測的影響因素主要包括人為因素、儀器因素、樣品因素以及實驗室檢測方法因素,但影響動物疫病實驗室檢測結果準確性的因素是多方面的,需要去進一步深入研究分析最終達到解決的目的。
[1] 黃春艷,唐聶,于行峰.加強動物疫病監測推進獸醫工作方式轉變[J].南方農業,2015,9(3):141-142.
[2] 曹東,魏澍.動物疫病監測工作是動物疫病預防控制機構的根本任務[J].現代畜牧獸醫,2011,(6):1-3.
曾朔(1989—),女,本科學歷,助理獸醫師,現從事動物疫病監測工作。