自體富血小板血漿治療難愈合傷口的研究進展

廣東省清遠市陽山縣人民醫(yī)院（513100）江輝耀

近年來，國外學者研究發(fā)現(xiàn)，富血小板血漿(Platelet Rich Plasma，PRP)中含有豐富生長因子，含有多種促進組織和細胞再生的生長因子，它可以刺激和加速創(chuàng)傷組織愈合和骨的再生，對于軟硬組織創(chuàng)口愈合及促進肉芽組織再生具有較強能力，可提高骨的形成率，加快損傷的愈合，改善損傷患者的愈合質(zhì)量。可為組織修復提供良好的網(wǎng)絡結(jié)構(gòu)，為修復細胞的爬行提供支架。這種生物制品具有良好的生物相容性和多功能性，目前在許多醫(yī)學領(lǐng)域都得到了廣泛應用，由于其制備簡便、生物活性安全、創(chuàng)傷小。逐漸成為一種理想的自體生長因子來源。

1 PRP的歷史發(fā)展和制作方法

1.1 發(fā)展史 1982年Matras[1]將FG應用于頜面外科取得了良好的臨床療效。其后Matras和她的同事將FG制作成商業(yè)產(chǎn)品Tissel(奧地利Immuno公司)，在歐洲市場應用較廣，但因為應用FG無法避免異體間傳染病傳播，這種商業(yè)產(chǎn)品的臨床應用一直沒有獲得美國FDA批準。由于異體FG存在排異、制作過程復雜，而自體FG費用昂貴等因素，人們開始尋找和研究自體的、具有更高療效的FG替代物。

1.2 制作方法：早期的PfuP是用細胞分離儀制取的，需要抽血400ml～450ml，分離提取出富血小板層后，其余成分再回輸體內(nèi)。這種設備體積較大，抽血量多，對環(huán)境和技術(shù)要求過高，費用也比較昂貴，必須由麻醉師操作，并對患者進行生命體征監(jiān)控，不利于PRP的應用和推廣。

2 PRP的應用領(lǐng)域

放射性潰瘍、壓瘡、下肢慢性潰瘍，缺損深度超過皮膚全層且面積較大的創(chuàng)面以及其他難愈合的創(chuàng)面。這種創(chuàng)面形成原因復雜，存在時間較長，創(chuàng)面內(nèi)部耐藥菌多，換藥治療效果不佳，大部分需要行植皮、皮瓣或肌皮瓣移植手術(shù)來封閉創(chuàng)面。但因創(chuàng)面結(jié)締組織菲薄，肉芽生長不佳，無法提供一個很好的血供和組織生長的微環(huán)境[2]。

3 PRP促進創(chuàng)傷組織愈合

PRP的主要成分是血小板．血小板Ot顆粒內(nèi)含有數(shù)十種高濃度的生長因子。當PRP被凝血酶和氯化鈣等激活劑激活后，生長因子會大量釋放，不同生長因子之間構(gòu)成復雜的調(diào)控網(wǎng)絡，通過生長因子彼此之間的協(xié)同效應。共同來促進創(chuàng)傷組織愈合。目前臨床研究較多的生長因子有以下幾種。

3.1 血小板衍生生長因子 血小板衍生生長因子(platelet derived growthfactor．PDGF)共有3個亞型：PDGF-AA、PDGFBB和PDGFAB，分子量為32ku。PDGF是一種非常重要的促進有絲分裂和生物趨化因子，在創(chuàng)傷局部組織中可以高濃度富集，刺激成纖維細胞、神經(jīng)膠質(zhì)細胞、平滑肌細胞、上皮細胞和骨髓基質(zhì)干細胞等多種細胞的增殖和有絲分裂，趨化成纖維細胞、平滑肌細胞、中性粒細胞、單核細胞，使細胞由靜止期進入增殖期，促進損傷局部毛細血管的生成，增加膠原蛋白合成的能力，促進骨折愈合，刺激傷口生長[3]。

3.2 表皮生長因子 表皮生長因子(epidermal growth factor，EGF)是一種小分子蛋白質(zhì)，由53個氨基酸殘基構(gòu)成，含有3個二硫鍵。分子量為6ku，由一耐熱的單一肽鏈組成。EGF的生物活性十分廣泛，對多種組織來源的上皮細胞、間質(zhì)細胞和成纖維細胞均有明顯的作用，研究發(fā)現(xiàn)，EGF可促進肉芽增殖形成[4]。

3.3 轉(zhuǎn)化生長因子 轉(zhuǎn)化生長因子(transforming growth factor，TGF-13)是一個細胞因子超家族。包括TGF-β1—5、活化素、骨形態(tài)發(fā)生蛋白(bone morphogenetic protein，BMP2-7)等，它是由兩條單鏈通過二硫鍵聯(lián)結(jié)構(gòu)成的二聚體分子。關(guān)于哺乳類動物在外科領(lǐng)域中研究最多的是TGF-β1、TGF-β2及TGF一β3。

3.4 血管內(nèi)皮生長因子 血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)也稱血管通透性因子，它是一種由2個相同亞基以二硫鍵交聯(lián)形成的二聚體糖蛋白。包括5個亞型，是上調(diào)血管生成的一種重要因子。VEGF可以增加血管的通透性，促進血漿纖維蛋白外滲形成血管外纖維蛋白基質(zhì)，為細胞的再生和毛細血管網(wǎng)的建立提供營養(yǎng)。改善內(nèi)皮細胞功能，從而可以促進臨床常見的一些慢性感染性創(chuàng)面的愈合。

4 PRP促進炎癥消退

近年來，Bielecki等和Moojen等[5]分別研究報道PRP在體外具有抑制金黃色葡萄球菌、大腸桿菌等細菌生長的作用。之前也有報道應用PRP治愈股骨慢性骨髓炎的病例。這些文獻都明確表明PRP具有一定的抗菌活性。但是對于PRP在機體內(nèi)具體的抗菌機制目前仍不明確。在體外針對不同細菌和真菌進行了一系列抗菌試驗，發(fā)現(xiàn)這類蛋白具有明顯的抗菌作用。

5 PRP促進軟組織修復

PRP技術(shù)的應用最初就是用來治療各種軟組織傷口的愈合，研究者通過實驗發(fā)現(xiàn)，PRP所含的生長因子在促進損傷組織愈合方面發(fā)揮著重要作用。Greenhalgh在糖尿病患者潰瘍局部發(fā)現(xiàn)生長因子數(shù)量明顯減少，并認為這是由于炎性滲出物包裹毛細血管，使生長因子無法穿透血管壁到達傷口所致[6]。

6 前景和展望

近年來，隨著人們對組織再生機制過程的深入研究，生物學技術(shù)在醫(yī)學領(lǐng)域得到了大量應用，它作為一種新的醫(yī)學模式為外科領(lǐng)域提供了一種新的治療途徑。有研究報道，利用富血小板血漿(PRP)修復軟組織可以促進愈合，減輕疼痛和減少瘢痕。但其具體機理尚未闡明。目前在國外已被廣泛應用于頜面外科、骨科、整形外科和神經(jīng)外科等領(lǐng)域。生長因子用于組織修復已有很多年歷史。最近發(fā)現(xiàn)富血小板纖維蛋白（PRF）能非常容易從自體血中提取，而且能釋放多種生長因子，如果能促進創(chuàng)面的愈合，將有力地促進其臨床應用。但是，各種生長因子在復雜的網(wǎng)絡調(diào)節(jié)系統(tǒng)中相互之間如何調(diào)控至今尚不完全清楚。