補腎益氣養血法對慢性再生障礙性貧血患者的血象、骨髓象及IL-17的影響

劉現輝， 郭曉娜

（1.河南省中醫院血液科，河南鄭州450002；2.黃河科技學院醫學院，河南鄭州450063）

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補腎益氣養血法對慢性再生障礙性貧血患者的血象、骨髓象及IL-17的影響

劉現輝1， 郭曉娜2

（1.河南省中醫院血液科，河南鄭州450002；2.黃河科技學院醫學院，河南鄭州450063）

摘要:目的 探討補腎益氣養血法對慢性再生障礙性貧血（CAA）患者的血象、骨髓象及白細胞介素-17（IL-17）的影響。方法 抽選我院2010年2月—2014年7月收治的59例CAA患者，采用隨機數字分為對照組（n =29例，予以西藥常規治療）和觀察組（n =30例，在對照組基礎上聯合中藥補腎益氣養血法治療），比較兩組治療前后血象指標；對比骨髓增生程度及百分率、非造血細胞百分率等骨髓象指標；并對比血清白IL-17及IL-17 mRNA水平。結果 觀察組治療總有效率為86.67％，明顯高于對照組的62.07％（P＜0.05）；觀察組治療后血紅蛋白（Hb）、白細胞計數（WBC）、血小板計數（PLT）、中性粒細胞計數、網織紅細胞（ReT）明顯升高（P＜0.05），淋巴細胞百分率（Ly）、轉鐵蛋白飽和度、血清鐵蛋白明顯降低（P＜0.05），且升高或降低幅度顯著大于對照組（P＜0.05）；治療后，觀察組骨髓增生程度及百分率明顯改善（P＜0.05），且改善程度優于對照組（P＜0.05；觀察組非造血細胞百分率（40.87±8.05）％，明顯低于對照組的（50.72±7.94）％（P＜0.05）。IL-17:治療后，兩組IL-17以及IL-17 mRNA水平降低（P＜0.05），且觀察組IL-17以及IL-17 mRNA水平明顯低于對照組（P＜0.05）。結論 補腎益氣養血法治療CAA，可顯著改善患者血象和骨髓象，提高療效，其機制可能與降低IL-17及IL-17 mRNA細胞因子表達有關。

關鍵詞:血象；補腎益氣養血法；IL-17；再生障礙性貧血

dol:10.3969/j.issn.1001-1528.2016.02.055

慢性再生障礙性貧血（CAA）是臨床常見的一種血液系統疾病，以貧血、感染以及出血為臨床表現［1］。CAA的臨床發病率較高，且病情反復、病程長，很難完全根治，嚴重影響病人的日常生活質量。目前，西醫治療CAA多以雄激素、免疫抑制以及細胞刺激等為主，雖然短期療效明顯，但遠期療效不穩定、副作用大，并且治療費用昂貴，大大限制了其臨床應用［2］。國家級名老中醫陳安民教授認為中醫治療CAA從腎論治為主，臨床辨證發現腎陽虛型CAA患者較多，因此，多采用補腎益氣法。“補腎益氣活血”法是陳安民教授近年來的臨床經驗總結方，在治療CAA方面取得了良好的療效?，F就其對CAA患者血象、骨髓象及IL-17方面的影響報道如下。

1 資料和方法

1.1 臨床資料 抽選我院2010年2月—2014年7月收治的59例CAA患者，納入標準①符合《血液病診斷及療效標準》［3］關于CAA的診斷標準，并符合《中藥新藥臨床研究指導原則》試行版中腎分型標準［4］，中醫辨證分型分為腎陰虛型、腎陽虛型和腎陰陽虛型，其腎陰虛型:主癥為心悸，頭暈，周身乏力，面色口唇指甲蒼白，盜汗，出血；次癥為低熱，手足心熱，口渴思飲，大便干結，舌質淡或舌尖紅，苔薄，脈細數。腎陽虛型:主癥為心悸，頭暈，周身乏力，面色口唇指甲蒼白，形寒肢冷，腰膝酸軟；次癥為性功能減退，大便塘，多無出血或出血輕微，舌質淡，脈沉細或虛大。腎陰陽虛型:兼有腎陰虛型及腎陽虛型癥候。②年齡18～65歲；③自愿服用中藥，簽署知情同意書。排除合并嚴重感染，心腦、肝、腎、造血、免疫系統等原發病者，并排除出血者、妊娠或哺乳期婦女。采用隨機數字分為對照組（n =29例）和觀察組（n =30例）。對照組:男17例，女12例，年齡20～64歲，平均（39.5± 8.7）歲，平均病程（20.1±3.6）月；觀察組:男15例，女15例，年齡18～65歲，平均（38.8±8.6）歲，平均病程（19.8±4.1）月。兩組臨床一般資料比較差異無顯著性（P＞0.05），見表1。

1.2 方法 （1）對照組:采用雄激素藥康力龍（規格為2 mg×100片，廣西南寧百會藥業集團有限公司，國藥準字H45020728），2 mg/次，3次/d；環孢素（10 mg×50粒，杭州中美華東制藥有限公司，國藥準字H10960121），4～6 mg/（kg·d），分2次服用，依據患者血液中環孢素水平進行劑量調整，使其保持在200～400 mg/L水平；連續治療3個月一療程，治療2個療程。治療期間予以對癥支持治療，對于有細菌感染者，采用抗生素抗感染；對于血紅蛋白＜50 g/L，貧血者，予以紅細胞輸注；對于血小板＜10×109/L者，輸注血小板。（2）觀察組:在上述基礎上聯合中醫辨證治療。①腎陽虛型:溫腎壯陽、益氣補血，采用我院自制的再障1號方，黃芪30 g，仙茅、巴戟天以及仙靈脾各18 g，當歸20 g，菟絲子、淫羊藿以及鹿角膠各15 g，骨碎補、白術以及白芍12 g，熟地黃20 g，雞血藤30 g。②腎陰虛型:滋陰補腎、涼血補血，采用我院自制的再障2號方進行治療，黃芪30 g，旱蓮草以及熟地黃20 g，黃精、巴戟天12 g，當歸12 g，桑椹子、龜板膠、何首烏以及阿膠各15 g，女貞子18 g，白芍12 g，雞血藤30 g。（3）腎陰陽兩虛型:滋陰壯陽、健脾養血，采用我院自制的再障3號方治療，黃芪、雞血藤各30 g、熟地黃、旱蓮草各20 g，當歸、何首烏、巴戟天以及淫羊藿各15 g，仙靈脾、女貞子各18 g，鹿角膠以及龜板膠各20 g，黃精12 g。每日1劑，分2次溫服，連續治療6個月。

表1　兩組一般臨床資料對比

1.3 觀察指標 ①臨床療效，參照《血液病診斷及療效標準》［5］。治愈:患者貧血、出血癥狀治療后消失，血紅蛋白（Hb）男性、女性分別達到120 g/L、110 g/L，白細胞計數（WBC）達4×109/L，血小板計數（PLT）達100×109/L，并且進行1年的觀察隨訪，未見復發。顯效:患者貧血、出血癥狀治療后均消失，Hb男性、女性分別達到120 g/L、100 g/L，WBC達3.5×109/L左右，PLT也有一定提升，進

行3個月的隨訪觀察，患者病情穩定或者是繼續進步。有效:患者貧血、出血癥狀治療后有明顯好轉，不需輸血，Hb水平較治療前增長30 g/L以上，并可保持3個月。無效:患者經治療后，臨床癥狀以及血象均未達標。②血象指標:采用F-800型血細胞計數儀對患者血象情況進行檢查，分別并取2次結果，進行平均值計算。血象指標包括Hb、WBC、PLT、中性粒細胞計數、網織紅細胞計數（ReT）、淋巴細胞百分率（Ly）、轉鐵蛋白飽和度、血清鐵蛋白（SF）水平。③骨髓象［5］:觀察骨髓增生程度，計算骨髓增生程度百分率和非造血細胞百分率。④IL-17及IL-17 mRNA表達:采用人IL-17 ELISA試劑盒對兩組患者治療前后血清中IL-17含有量進行檢測。應用RT-PCR技術測定T淋巴細胞IL-17 mRNA水平，試劑盒購自上海信然實業，PE9600型PCR擴增儀由美國PE公司生產。

1.4 統計學方法 采用SPSS 17.0軟件統計分析，計量資料以（±s）表示，組間采用t檢驗，計數資料以n％表示，采用x2檢驗，P＜0.05，差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組臨床療效比較 觀察組治療總有效率為86.67％，明顯高于對照組的62.07％，差異有統計學意義（x2= 4.706，P=0.030＜0.05），詳見表2。

表2　兩組臨床療效比較［n（％）］

2.2 兩組治療前后血象指標變化 治療前，兩組的血象指標對比，差異均無統計學意義（P＞0.05）；觀察組治療后Hb、WBC、PLT、中性粒細胞計數、RBC等血象指標明顯

表3　兩組治療前后血象指標1變化（±s）

表3　兩組治療前后血象指標1變化（±s）

注:與治療前比較，*P＜0.05；與對照組比較，#P＜0.05

組別　　時間　Hb/（g·L-1）　WBC/（×109·L-1）　PLT/（×109·L-1）　　中性粒細胞計數/（×109·L-1）觀察組　　治療前49.96±12.14　2.47±0.63　30.39±8.09　0.56±0.48治療后　96.48±11.86*#　3.58±0.68*#　57.43±8.58*#　2.11±1.13*#對照組　　治療前　49.93±12.15　2.46±0.60　30.33±8.01　0.54±0.41治療后　82.33±12.94*　2.98±0.59*　46.02±8.63*　1.58±1.03*

升高（P＜0.05），Ly、轉鐵蛋白飽和度、SF明顯降低（P＜0.05），且升高或降低幅度顯著大于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），詳見表3和表4。

表4　兩組治療前后血象指標2變化（±s）

表4　兩組治療前后血象指標2變化（±s）

注:與治療前比較，*P＜0.05；與對照組比較，#P＜0.05

組別　　時間　ReT/（×109·L-1）　Ly/％　　轉鐵蛋白飽和度/％　SF/（μg·L-1）觀察組對照組治療前治療后治療前治療后12.34±6.93 38.94±20.51*#12.56±8.27 30.12±18.64*64.01±11.92 41.82±10.74*#65.98±13.91 48.72±9.73*58.52±9.74 40.63±8.06*#56.95±11.23 48.12±8.96*311.34±115.38 187.92±82.34*#298.93±109.23 238.13±120.71*

2.3 兩組治療前后骨髓象變化 治療前，兩組的骨髓增生程度及百分率、非造血細胞百分率對比，差異無統計學意義（P＞0.05）；治療后，觀察組骨髓增生程度及百分率明顯改善（P＜0.05），且改善程度優于對照組，差異顯著（P＜0.05）。觀察組治療后的非造血細胞百分率（40.87± 8.05）％，明顯低于對照組的（50.72±7.94）％，差異有統計學意義（P＜0.05），見表5。

表5　兩組治療前后骨髓象變化

2.4 兩組治療前后IL-17以及IL-17 mRNA水平比較 兩組治療前IL-17以及IL-17 mRNA水平比較差異無統計學意義（P＞0.05）；治療后，兩組的IL-17以及IL-17 mRNA水平降低（P＜0.05），且觀察組IL-17以及IL-17 mRNA水平明顯低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），詳見表6。

表6　兩組治療前后I L-1 7以及IL-1 7 mRNA水平比較（±s）

表6　兩組治療前后I L-1 7以及IL-1 7 mRNA水平比較（±s）

注:與治療前比較，*P＜0.05；與對照組比較，#P＜0.05

組別　　時間　IL-17/（ng·L-1）　IL-17 mRNA觀察組對照組治療前治療后治療前治療后192.71±31.19 60.09±21.01*#202.72±31.21 89.69±17.05*2.63±0.23 1.27±0.24*#2.61±0.22 1.61±0.21*

3 討論

慢性再生障礙性貧血（CAA）是某些因素引起的造血功能低下，全血細胞明顯下降的一種難治性血液系統疾病。近年來多數學者認為免疫功能異常是CAA的主要發病機制: T細胞亢進，造血干細胞凋亡過度導致骨髓衰竭。造血微環境以及干祖細胞水平改變是由于異常免疫功能損傷所引起的［6］。中醫治療CAA主要以補腎為本，近年來補腎中藥的研究發現，補腎中藥能夠顯著提高患者骨髓造血功能，調節機體應激及陰陽平衡，治療符合西醫CAA發病機理［7］。

研究［8］證實，CAA發病與CD4+輔助T淋巴細胞紊亂關系密切。輔助性T淋巴細胞17（Th17）是近年來新發現的一種CD4 +T細胞亞群，具有免疫調節效應。研究發現Th17在自身免疫疾病、腫瘤以及移植排斥反應中起著重要作用。IL-17是Th17分泌的一種細胞因子，促進炎癥反應，誘導TNF-α、IL-12、IL-6以及IL-8等炎性因子分泌，還有利于Th17細胞分化、誘導活化產生Tc細胞。有研究［9］發現，CAA患者外周血以及骨髓中Th17表達水平明顯高于正常人，而治療完全緩解者Th17表達水平較治療前降低，提示Th17參與CAA發病過程。另有研究［10］表明，與健康患者相比，CAA病人骨髓以及外周血IL-17 mRNA表達明顯上調，血清IL-17水平升高，且與Th17細胞呈正相關。由此可見，血清IL-17及外周血IL-17 mRNA表達可作為評定CAA治療療效的指標之一。

“補腎益氣養血”法是我院近年來的臨床實踐總結。經日:血之于氣，異名同類。補腎益氣養血方以補腎生血為基本法則，補腎使先天之精得充，骨髓充盈，血液化生有源以治其本；補氣生血，使周身得養，改善患者的癥狀是為治其標；兼用固表實衛之品，使衛表得固，免受外邪侵襲，能使已病之正氣得安。方中多味中藥能對造血干細胞的增殖有促進作用，刺激骨髓造血；部分中藥能調節機體免疫，改善機體的免疫紊亂，減少對造血的抑制；還有能通過對造血微環境的調整，為正常造血提供良好的“土壤”。本研究采用黃芪為補氣要藥，藥理研究發現黃芪能夠調節免疫功能，且具有促巨核細胞成熟的作用；黃精具有益氣養陰、滋腎養脾的作用；白術健脾益氣，現代藥理研究發現其能提高免疫功能低下動物細胞在體外培養的存活率，增加TH細胞，糾正T細胞亞群紊亂，提升IL-2水平，起到免疫調節作用［11］。女貞子、龜板膠、熟地黃以及何首烏合用具有補腎養陰的功效；當歸、雞血藤以及白芍合用養血活血；現代藥理研究發現巴戟天能增加小鼠血中皮質醇水平、抑制其胸腺萎縮，激發骨髓造血功能，改善白細胞功能障礙；仙茅以及仙靈脾均具有雄激素樣作用；女貞子能夠提升白細胞；熟地有腎上腺皮質激素樣作用；雞血藤能夠起到保護造血系統的作用，改善患者骨髓微環境，提升白細胞水平，促進造血干細胞增生以及分化。

本研究結果表明，觀察組治療后，Hb、WBC、PLT、中性粒細胞計數、ReT等血象指標升高幅度顯著大于對照組，Ly、轉鐵蛋白飽和度、血清鐵蛋白降低幅度顯著小于對照組（P＜0.05）；觀察組治療總有效率明顯高于對照組（P＜0.05）。由此可見，補腎益氣養血法治療CAA療效顯著，能明顯改善CAA患者臨床癥狀，促進骨髓造血功能恢復，升高外周血象。其機制可能與抑制Th17細胞分泌，降低血清IL-17等炎性因子表達，避免骨髓自身免疫破壞造血干細胞以及影響微環境，從而發揮治療作用。

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作者簡介:劉現輝（1978—），男，碩士，主治醫師，研究方向為中西醫結合對血液系統疾病的診斷和防治。Te1: 13938231534，E-mai1: hxyk1xh@126.com

收稿日期:2015-05-10

中圖分類號:R287

文獻標志碼:B

文章編號:1001-1528（2016）02-0467-04