綦江木瓜中齊墩果酸和熊果酸含量的HPLC分析

鄧才富　譚秋生　羅舜　羅川　章文偉　楊永東　徐廣

【摘 要】 目的：考察綦江木瓜各主產(chǎn)區(qū)域不同藥材樣品中熊果酸與齊墩果酸含量差異。方法：采集綦江木瓜主產(chǎn)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的皺皮木瓜樣品，置沸水中燙至外皮灰白色取出，切制為2～4 mm厚片，50 ℃恒溫干燥后粉碎，采用高效液相色譜法測定熊果酸與齊墩果酸含量。結(jié)果：綦江木瓜11批藥材樣品中，熊果酸和齊墩果酸的含量總和最高的是打通鎮(zhèn)大羅村的樣品，含量為0.651%，最低的是三角鎮(zhèn)木瓜海棠園的長俊木瓜和渝綦木瓜，分別為0.375%和0.378%；熊果酸含量規(guī)律與熊果酸和齊墩果酸的含量總和相一致，齊墩果酸含量則有所差異。結(jié)論：不同產(chǎn)區(qū)所產(chǎn)木瓜藥材在熊果酸和齊墩果酸兩個(gè)指標(biāo)成分的含量上有較大的差異，同一區(qū)域不同品種間也有一定的差異；同一品種在不同的產(chǎn)地或海拔條件下熊果酸與齊墩果酸比值有較大地差異，同一區(qū)域不同品種間也有一定的差異。

【關(guān)鍵詞】 皺皮木瓜；熊果酸；齊墩果酸；栽培類型

【中圖分類號(hào)】R284.1 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A 【文章編號(hào)】1007-8517（2016）05-0015-03

皺皮木瓜為薔薇科植物貼梗海棠Chaenomeles speciosa （Sweet） Nakai干燥近成熟果實(shí)[1-2]。具有平肝和胃，舒筋絡(luò)，活筋骨，降血壓等功效，是治療高血壓、高血脂、風(fēng)濕等疾病的良藥。重慶市為川木瓜的主要產(chǎn)區(qū)[3]，以綦江區(qū)木瓜種植面積最大[4]，是農(nóng)業(yè)部中國果菜專家委員會(huì)授予綦江區(qū)“中國優(yōu)質(zhì)木瓜之鄉(xiāng)”、“中國木瓜科技創(chuàng)新示范區(qū)”。由于全區(qū)木瓜分布廣，各地海拔高度和地質(zhì)背景有所不同，為了能夠整體掌握綦江木瓜的質(zhì)量狀況，項(xiàng)目組通過全區(qū)木瓜種植狀況的調(diào)研后，采集各主產(chǎn)鄉(xiāng)鎮(zhèn)及主要栽培類型的木瓜樣品，開展熊果酸和齊墩果酸的含量的HPLC分析，以期為產(chǎn)區(qū)木瓜的質(zhì)量評(píng)價(jià)和產(chǎn)業(yè)鏈延伸提供科學(xué)依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 試劑和試藥 熊果酸（批號(hào)：110742-201421）、齊墩果酸（批號(hào)：110709-201206）購自中國食品藥品檢定研究院。甲醇為色譜純，水為超純水，其余試劑均為分析純。

皺皮木瓜樣品于2015年8月12～13日，采集于重慶市綦江區(qū)石角鎮(zhèn)、三角鎮(zhèn)、石壕鎮(zhèn)、打通鎮(zhèn)等木瓜主產(chǎn)鄉(xiāng)鎮(zhèn)，鑒定為貼梗海棠Chaenomeles speciosa（Sweet） Nakai的果實(shí)。木瓜樣品情況如表1所示。

1.2 儀器 島津LC-20AT高效液相色譜儀（LC solution色譜管理處理軟件、CTO-20A柱溫箱、SIL-20A自動(dòng)進(jìn)樣器、SPD-M20A二極管陣列檢測器、CBM-20ALite系統(tǒng)控制器）；METTLER AL104型電子天平；KQ-1000DE型數(shù)控超聲波清洗器；Molecular標(biāo)準(zhǔn)智能型純水機(jī)。

2 方法與結(jié)果

2.1 樣品加工 采收鮮木瓜樣品，置沸水中燙至外皮灰白色（5min左右），取出，切制為2～4mm厚片，置50℃恒溫干燥箱中干燥后粉碎成細(xì)粉待用。

2.2 齊墩果酸、熊果酸含量測定

2.2 1 色譜條件 色譜柱：SHISEIDO CAPCELL PAK C18 MGⅡ色譜柱（4.6mm×250mm×5μm）；流動(dòng)相：甲醇-水-冰醋酸-三乙胺（84：16：0.1：0.05）；檢測波長：210 nm；流速：0.6ml/min；柱溫：30 ℃；理論塔板數(shù)按齊墩果酸峰計(jì)應(yīng)不低于5000。

2.2.2 對(duì)照品溶液的制備 取齊墩果酸對(duì)照品、熊果酸對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含齊墩果酸0.102mg、熊果酸0.103mg的混合溶液，即得。

2.2.3 樣品溶液的制備 取樣品細(xì)粉約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，稱定重量，超聲處理（功率400 W，頻率40 kHz）20min，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，再用孔徑0.45μm微孔濾膜濾過，即得。

2.2.4 測定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液與樣品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定。取供試11批木瓜樣品，分別準(zhǔn)確吸取對(duì)照品溶液和樣品溶液各10μl，在上述色譜條件下采集色譜圖，對(duì)照品溶液HPLC圖見圖1，11批木瓜藥材HPLC色譜疊加圖如圖2。

2.3 綦江木瓜樣品中熊果酸與齊墩果酸含量及比較 根據(jù)不同批次樣品的吸收峰峰面積差異，計(jì)算出11批采收期的皺皮木瓜樣品中熊果酸與齊墩果酸含量，見表2。

由表2可知，本研究所采集11批木瓜樣品中，熊果酸和齊墩果酸的含量總和最高的是采自打通鎮(zhèn)大羅村的樣品，含量0.651%，品種為綦江木瓜，從調(diào)查掌握的資料來看到，該村為綦江木瓜分布較高的區(qū)域，海拔1200 m以上，其余分布區(qū)域都在500～800 m范圍，是否海拔高度影響了指標(biāo)成分的含量有待進(jìn)一步探索。熊果酸和齊墩果酸的含量總和最低的是采自三角鎮(zhèn)木瓜海棠園的長俊木瓜和渝綦木瓜，分別為0.375%和0.378%，此二種木瓜果型較大，產(chǎn)量較高。熊果酸含量規(guī)律與熊果酸和齊墩果酸的含量總和相一致；齊墩果酸含量則有所差異，最高的是打通鎮(zhèn)大羅村產(chǎn)的宣木瓜（20世紀(jì)70年代引種），當(dāng)?shù)剞r(nóng)民稱為藥木瓜，以區(qū)別于普遍在近年大面積發(fā)展的正安野木瓜。綦江木瓜不同主產(chǎn)鄉(xiāng)鎮(zhèn)和品種樣品中熊果酸、齊墩果酸含量變化趨勢(shì)如圖3所示。

不同加工方法對(duì)木瓜樣品中熊果酸和齊墩果酸的含量有所影響，在石角鎮(zhèn)強(qiáng)干村采集的樣品中，按藥典要求燙煮加工后，熊果酸和齊墩果酸含量總和低于直接生切曬干的樣品，而熊果酸與齊墩果酸比值則相反；采自打通鎮(zhèn)吹角村的樣品也以燙煮加工后熊果酸和齊墩果酸含量總和最低，生切后50℃恒溫干燥品中熊果酸和齊墩果酸含量總和高于藥農(nóng)生切攤晾樣品，表明快速干燥有利于指標(biāo)成分的穩(wěn)定。

3 討論

根據(jù)對(duì)綦江產(chǎn)區(qū)的調(diào)研后采集各主產(chǎn)鄉(xiāng)鎮(zhèn)及主要栽培類型的木瓜樣品，開展熊果酸和齊墩果酸的含量的HPLC分析，以便對(duì)重慶市綦江區(qū)木瓜藥材的總體情況作一個(gè)深入了解，結(jié)果表明，不同產(chǎn)區(qū)所產(chǎn)木瓜藥材在熊果酸和齊墩果酸兩個(gè)指標(biāo)成分的含量上有較大的差異；同一區(qū)域不同品種間也有一定的差異，在生產(chǎn)中應(yīng)做好適地適種的合理規(guī)劃。

本研究就藥材樣品的熊果酸與齊墩果酸比值做了比較，表明同一品種在不同的產(chǎn)地或海拔條件下熊果酸與齊墩果酸比值有較大地差異；同一區(qū)域不同品種間也有一定的差異；同一品種不同的加工處理方式對(duì)指標(biāo)成分的含量也有較大地影響，為了保證藥材質(zhì)量的穩(wěn)定和可控，產(chǎn)地加工的規(guī)范和統(tǒng)一是應(yīng)該特別受到重視和引導(dǎo)的。

目前，綦江區(qū)木瓜種植面積有近10萬畝，且多數(shù)已達(dá)量產(chǎn)水平，若以熊果酸與齊墩果酸為指標(biāo)成分考察，總體情況不容樂觀，應(yīng)加強(qiáng)其它功能性成分的研究和開發(fā)，使木瓜真正成為農(nóng)民增收致富的持續(xù)穩(wěn)定經(jīng)濟(jì)來源。

參考文獻(xiàn)

[1]南京中醫(yī)藥大學(xué).中藥大辭典（第二版）[M].上冊(cè).上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，2006.

[2]國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典（一部）[M]..北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：57.

[3]四川省中醫(yī)藥研究院南川藥物種植研究所.四川中藥材栽培技術(shù)[M].重慶：重慶出版社，1988：566.

[4]羅思源.綦江木瓜資源圃木瓜品種的形態(tài)學(xué)鑒定和指紋圖譜分析[D].重慶：西南大學(xué)，2015.

（收稿日期：2015.12.24）