王新民,晁旭東,韓猛立*,蒲新竹,趙萬軍,張 賓
(1.新疆生產建設兵團第十師一八一團,新疆 阿勒泰836001;2.新疆農墾科學院畜牧獸醫研究所)
羊鏈球菌的分離鑒定及藥敏試驗*
王新民1,晁旭東1,韓猛立2*,蒲新竹1,趙萬軍1,張 賓2
(1.新疆生產建設兵團第十師一八一團,新疆 阿勒泰836001;2.新疆農墾科學院畜牧獸醫研究所)

對開春以來一八一團部分養殖合作社出現的以咳嗽、流鼻涕等為主要癥狀的羔羊進行診斷,經過病原學、致病性、藥敏試驗等確定為鏈球菌感染,采用敏感藥物進行針對性治療后,有效控制了該病的發生和蔓延,效果明顯。
羔羊腹瀉;病原分離;鏈球菌
兵團第十師北屯市結合兵團農業現代化發展的布局與思路,及時調整農牧業發展方向,突出了“穩定強化農業,重點發展牧業,調整改革漁業”的發展思路,大力發展農場農區畜牧業,優化產業結構和資源配置,使大農業向種植業、畜牧業、漁業三業并舉的格局發展。大力實施小畜換大畜工程,從而有效地帶動了團場良種羊飼養的發展。
一八一團擁有山區草場面積4.47萬hm2,主要分布:墾區內0.47萬hm2,阿勒泰山區的齊背嶺、干海子、別克多克夏草場2.17萬hm2,沙吾爾山冬草場
0.40萬hm2,牧場北戈壁0.99萬hm2,夾山子春秋草場0.94萬hm2。優良豐富的草地資源為一八一團大力發展畜牧業提供了得天獨厚的自然資源和重要的物質基礎。2014年一八一團提出畜牧業發展的總體思路和布局,通過積極推進人畜分離,大力發展家庭牧場和培育養殖大戶,形成養殖大戶-養殖小區-養殖基地相連的產業發展格局。通過能人牽頭,大戶帶動,職工以入股、托養、寄養等多種方式參與,以點帶面,示范帶動,加快畜牧業向規模化、集約化方向發展。截至2015年底,一八一團從事畜牧養殖的共有436戶,全團現有各類牲畜存欄7.7萬頭(只)。其中,羊存欄6.50萬只,牛存欄0.45萬頭,生豬存欄0.75萬頭。
近年來羊肉市場呈現波動式發展,由前幾年的持續高位到2015年的低谷,給從事養羊的養殖戶帶來了巨大的經濟損失和心里壓力。但是市場上優質羊肉價格依然處于高位且暢銷,許多養殖戶看到了機遇,隨即對自己的羊群進行雜交改良,通過降低養殖數量,提高養殖品質,來確保養殖效益,間接的減輕了草場壓力,有利于環境保護和草場資源的循環利用。
2016年3~6月,阿勒泰地區持續低溫,且雨水較多,草原沒有恢復,難以放牧,使得原本每年4月份開始的轉場難以進行,羊群大多集中在連隊周圍的開闊地或戈壁灘上,部分養殖戶的羊群出現疫病,且發病率和死亡率均較高,給養殖戶造成了很大的經濟損失。
經團獸醫站與在一八一團開展科技服務的專家聯合診斷,確診為羊鏈球菌病,現將情況報告如下。
一八一團某養殖大戶共計飼羊600余只,其中小尾寒羊100余只,當地阿勒泰羊300余只,肉用細毛羊50余只,阿寒雜交羊150余只混群放牧,白天主要在連隊周圍放牧,夜晚趕回圈舍,2016年4月下旬羊群突然發病,并逐漸增多,到筆者受邀前往診治時,已發病118只,約占全群的20.00%左右,死亡23只,死亡率為19.00%。
隨機選擇10只發病羊測量體溫,溫度介于40.8~41.7℃之間;部分羊只表現出精神不佳、步態不穩、食欲不振、反芻停止,喜臥,不愿運動;偶見后驅癱瘓羊只;觀察可見部分羊眼睛潮紅、出血;有流膿性和清鼻液,口角處可見混有泡沫的唾液;選擇病情較為嚴重的羊只觸摸可見咽喉部腫脹、頜下淋巴結水腫,呼吸緩急;圈內可見不成型糞便,偶見褐色血糞。病程長短不一,一般3~5 d,部分羊只臨死前出現抽搐、磨牙等神經癥狀。
選擇臨近死亡的病死羊5只進行現場剖解,其中有3只出現尸僵不全。可見主要臟器呈現廣泛性出血,淋巴結水腫出血;肺臟有膿性分泌物滲出、出血和肝變區,心胞積液;腹腔積液,膽囊充盈,肝臟腫大,邊緣可見出血點,脾臟鈍圓有出血點;真胃粘膜易剝離,有潰瘍,內容物有成團狀的塑料薄膜。
另隨即采集同群羊抗凝全血20份,帶回實驗室檢測。
4.1 病料采集
無菌采集心包液、肺臟、肝臟、脾臟、淋巴、胸腔積液等病變器官和組織[1-3],帶回實驗室。
4.2 染色鏡檢
將無菌采集的病料抹片后經革蘭氏染色,鏡檢可見視野里呈現藍紫色、圓形或卵圓形、成雙或短鏈狀排列,偶見桿菌出現;肝、脾病料中可見病原菌有莢膜。
采集的20份血液中有14份可見附紅細胞體存在,8份血液檢出焦蟲。
4.3 分離培養
將病料分別在普通瓊脂平板、5%綿羊血瓊脂平板、營養肉湯和腦心浸液培養基37℃培養18~32 h,挑取單個菌落做純培養,同時進行革蘭氏染色,觀察其形態和培養特性[4-5]。
結果顯示,該菌在普通培養基上生長不良或不生長,需要添加血清、血液、葡萄糖等營養物質;在血平板上可見小于1.0 mm、灰白色、β溶血、表面光滑、邊緣整齊的菌落。經革蘭氏染色鏡檢可見視野里呈現革蘭氏陽性球菌,多數成對存在,少數呈短鏈狀排列。液體培養中染色呈現革蘭氏陽性鏈狀排列的球菌。
4.4 生化鑒定
對分離的菌株純培養后保存,后委托新疆農墾科學院畜牧獸醫研究所經全自動微生物鑒定系統(VITEK2 Compact)鑒定為鏈球菌。
藥敏紙片購自杭州濱河微生物試劑有限公司,按照說明書進行操作。結果顯示,鏈球菌對氟苯尼考、頭孢噻肟、左氟沙星、環丙沙星敏感,其余20余種藥物為中敏或耐藥。
(1)對發病羊只及時隔離治療。應用敏感藥物氟苯尼考治療,每日2次,連用5 d;(2)針對血液中檢出附紅細胞體和焦蟲這一病情,建議應用長效針劑土霉素注射預防該病[6];(3)同時在飲水中添加復合多維以增強動物機體抵抗力;(4)建議應用羊鏈球菌氫氧化鋁甲醛滅活苗,2~3倍劑量皮下注射[7],來年注意提前采取預防措施。通過采取以上措施,4 d后再無新病例出現,1周后羊群恢復正常。
本病發生沒有明顯的季節性,且一八一團所在的阿勒泰地區屬于羊鏈球菌病的高發地區,同時2016年開春以來氣溫低、雨水多,青綠飼料缺乏,導致動物抵抗力下降而發病。建議今后要做好羊舍的消毒和管理,添加維生素或牛羊用舔舐磚,做好免疫接種工作,也是控制本病的有效手段。有條件的地區,可以結合本地分離株,篩選出疫苗候選菌株,制作自家滅活疫苗預防本病,會達到良好的控制效果。
[1]陸承平.獸醫微生物學(第四版)[M].北京:中國農業出版社,2007.
[2]陳溥言.獸醫傳染病學(第五版)[M].北京:中國農業出版社,2006.
[3]姚火春.獸醫微生物學實驗指導(第二版)[M].北京:中國農業出版社,2007.
[4]李健強,李六金.獸醫微生物學實驗指導[M].陜西:陜西科學技術出版社,1999.
[5]李素健,趙萬軍,韓猛立,等.小尾寒羊鏈球菌病的診斷與治療[J].新疆農墾科技,2015,38(5):26-27.
[6]趙萬軍,蒲新竹,韓猛立,等.一八一團育肥羊常見多發病調查與防治[J].新疆農墾科技,2015,38(6):36-36.
[7]趙萬軍,胡鵬,蒲新竹,等.綿羊鏈球菌病的診斷與防治[J].甘肅畜牧獸醫,2015,45(6):50,52.
2016—07—28
新疆農墾科學院院引導計劃(72YYD201409)、兵團現代農業科技攻關與成果轉化計劃(2016AC018)。
*通訊作者:韓猛立(1980-),男,助理研究員,從事動物傳染病的診斷與防治研究。E-mail:hanmenglimm@163.com。