綦江木瓜中齊墩果酸和熊果酸含量的HPLC分析

鄧才富　譚秋生　羅　舜　羅　川　章文偉　楊永東　徐　廣

重慶市藥物種植研究所，重慶　南川　408435

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綦江木瓜中齊墩果酸和熊果酸含量的HPLC分析

鄧才富譚秋生羅舜羅川章文偉*楊永東徐廣

重慶市藥物種植研究所，重慶南川408435

【摘要】目的：考察綦江木瓜各主產區域不同藥材樣品中熊果酸與齊墩果酸含量差異。方法：采集綦江木瓜主產鄉鎮的皺皮木瓜樣品，置沸水中燙至外皮灰白色取出，切制為2～4 mm厚片，50 ℃恒溫干燥后粉碎，采用高效液相色譜法測定熊果酸與齊墩果酸含量。結果：綦江木瓜11批藥材樣品中，熊果酸和齊墩果酸的含量總和最高的是打通鎮大羅村的樣品，含量為0.651%，最低的是三角鎮木瓜海棠園的長俊木瓜和渝綦木瓜，分別為0.375%和0.378%；熊果酸含量規律與熊果酸和齊墩果酸的含量總和相一致，齊墩果酸含量則有所差異。結論：不同產區所產木瓜藥材在熊果酸和齊墩果酸兩個指標成分的含量上有較大的差異，同一區域不同品種間也有一定的差異；同一品種在不同的產地或海拔條件下熊果酸與齊墩果酸比值有較大地差異，同一區域不同品種間也有一定的差異。

【關鍵詞】皺皮木瓜；熊果酸；齊墩果酸；栽培類型

皺皮木瓜為薔薇科植物貼梗海棠Chaenomeles speciosa (Sweet) Nakai干燥近成熟果實[1-2]。具有平肝和胃，舒筋絡，活筋骨，降血壓等功效，是治療高血壓、高血脂、風濕等疾病的良藥。重慶市為川木瓜的主要產區[3]，以綦江區木瓜種植面積最大[4]，是農業部中國果菜專家委員會授予綦江區“中國優質木瓜之鄉”、“中國木瓜科技創新示范區”。由于全區木瓜分布廣，各地海拔高度和地質背景有所不同，為了能夠整體掌握綦江木瓜的質量狀況，項目組通過全區木瓜種植狀況的調研后，采集各主產鄉鎮及主要栽培類型的木瓜樣品，開展熊果酸和齊墩果酸的含量的HPLC分析，以期為產區木瓜的質量評價和產業鏈延伸提供科學依據。

1儀器與材料

1.1試劑和試藥熊果酸(批號：110742-201421)、齊墩果酸(批號：110709-201206)購自中國食品藥品檢定研究院。甲醇為色譜純，水為超純水，其余試劑均為分析純。

皺皮木瓜樣品于2015年8月12～13日，采集于重慶市綦江區石角鎮、三角鎮、石壕鎮、打通鎮等木瓜主產鄉鎮，鑒定為貼梗海棠Chaenomeles speciosa(Sweet) Nakai的果實。木瓜樣品情況如表1所示。

表1　綦江木瓜樣品采集情況

1.2儀器島津LC-20AT高效液相色譜儀(LC solution色譜管理處理軟件、CTO-20A柱溫箱、SIL-20A自動進樣器、SPD-M20A二極管陣列檢測器、CBM-20ALite系統控制器)；METTLER AL104型電子天平；KQ-1000DE型數控超聲波清洗器；Molecular標準智能型純水機。

2方法與結果

2.1樣品加工采收鮮木瓜樣品，置沸水中燙至外皮灰白色(5min左右)，取出，切制為2～4mm厚片，置50℃恒溫干燥箱中干燥后粉碎成細粉待用。

2.2齊墩果酸、熊果酸含量測定

2.21色譜條件色譜柱：SHISEIDO CAPCELL PAK C18 MGⅡ色譜柱(4.6mm×250mm×5μm)；流動相：甲醇-水-冰醋酸-三乙胺(84:16:0.1:0.05)；檢測波長：210 nm；流速：0.6ml/min；柱溫：30 ℃；理論塔板數按齊墩果酸峰計應不低于5000。

2.2.2對照品溶液的制備取齊墩果酸對照品、熊果酸對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含齊墩果酸0.102mg、熊果酸0.103mg的混合溶液，即得。

2.2.3樣品溶液的制備取樣品細粉約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，稱定重量，超聲處理(功率400 W，頻率40 kHz)20min，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，再用孔徑0.45μm微孔濾膜濾過，即得。

2.2.4測定法分別精密吸取對照品溶液與樣品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定。取供試11批木瓜樣品，分別準確吸取對照品溶液和樣品溶液各10μl，在上述色譜條件下采集色譜圖，對照品溶液HPLC圖見圖1，11批木瓜藥材HPLC色譜疊加圖如圖2。

2.3綦江木瓜樣品中熊果酸與齊墩果酸含量及比較根據不同批次樣品的吸收峰峰面積差異，計算出11批采收期的皺皮木瓜樣品中熊果酸與齊墩果酸含量，見表2。

由表2可知，本研究所采集11批木瓜樣品中，熊果酸和齊墩果酸的含量總和最高的是采自打通鎮大羅村的樣品，含量0.651%，品種為綦江木瓜，從調查掌握的資料來看到，該村為綦江木瓜分布較高的區域，海拔1200 m以上，其余分布區域都在500～800 m范圍，是否海拔高度影響了指標成分的含量有待進一步探索。熊果酸和齊墩果酸的含量總和最低的是采自三角鎮木瓜海棠園的長俊木瓜和渝綦木瓜，分別為0.375%和0.378%，此二種木瓜果型較大，產量較高。熊果酸含量規律與熊果酸和齊墩果酸的含量總和相一致；齊墩果酸含量則有所差異，最高的是打通鎮大羅村產的宣木瓜(20世紀70年代引種)，當地農民稱為藥木瓜，以區別于普遍在近年大面積發展的正安野木瓜。綦江木瓜不同主產鄉鎮和品種樣品中熊果酸、齊墩果酸含量變化趨勢如圖3所示。

表2　綦江木瓜中熊果酸和齊墩果酸含量分析結果

不同加工方法對木瓜樣品中熊果酸和齊墩果酸的含量有所影響，在石角鎮強干村采集的樣品中，按藥典要求燙煮加工后，熊果酸和齊墩果酸含量總和低于直接生切曬干的樣品，而熊果酸與齊墩果酸比值則相反；采自打通鎮吹角村的樣品也以燙煮加工后熊果酸和齊墩果酸含量總和最低，生切后50℃恒溫干燥品中熊果酸和齊墩果酸含量總和高于藥農生切攤晾樣品，表明快速干燥有利于指標成分的穩定。

3討論

根據對綦江產區的調研后采集各主產鄉鎮及主要栽培類型的木瓜樣品，開展熊果酸和齊墩果酸的含量的HPLC分析，以便對重慶市綦江區木瓜藥材的總體情況作一個深入了解，結果表明，不同產區所產木瓜藥材在熊果酸和齊墩果酸兩個指標成分的含量上有較大的差異；同一區域不同品種間也有一定的差異，在生產中應做好適地適種的合理規劃。

本研究就藥材樣品的熊果酸與齊墩果酸比值做了比較，表明同一品種在不同的產地或海拔條件下熊果酸與齊墩果酸比值有較大地差異；同一區域不同品種間也有一定的差異；同一品種不同的加工處理方式對指標成分的含量也有較大地影響，為了保證藥材質量的穩定和可控，產地加工的規范和統一是應該特別受到重視和引導的。

目前，綦江區木瓜種植面積有近10萬畝，且多數已達量產水平，若以熊果酸與齊墩果酸為指標成分考察，總體情況不容樂觀，應加強其它功能性成分的研究和開發，使木瓜真正成為農民增收致富的持續穩定經濟來源。

參考文獻

[1]南京中醫藥大學.中藥大辭典(第二版)[M].上冊.上海：上海科學技術出版社，2006.

[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M]..北京：中國醫藥科技出版社，2010:57.

[3]四川省中醫藥研究院南川藥物種植研究所.四川中藥材栽培技術[M].重慶：重慶出版社，1988:566.

[4]羅思源.綦江木瓜資源圃木瓜品種的形態學鑒定和指紋圖譜分析[D].重慶：西南大學,2015.

(收稿日期：2015.12.24)

【中圖分類號】R284.1

【文獻標志碼】A

【文章編號】1007-8517(2016)05-0015-03

作者簡介：鄧才富(1971-)，男，副研究員，主要從事生態環境與藥材質量研究。E-mai:dcf0509@126.com通信作者：章文偉(1976-)，男，副研究員，主要從事道地藥材質量分析與評價。E-mail:22318023@qq.com

基金項目：重慶市科技攻關項目(CSTC2012gg-yyjs10064)；重慶市基本科研業務費資助項目(2015cstc-jbky-01329)。