摘 要 為了快速得到大量優(yōu)質(zhì)脫毒的高檔草莓種苗,選擇幼芽和葉為外殖體,運用植物組織培養(yǎng)技術(shù)對草莓“章姬”和“紅頰”兩個品種進行植株快速繁殖研究,實驗結(jié)果表明:在MS+IBA 2.0~4.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L中芽和葉均能產(chǎn)生大量愈傷組織,IBA越高,產(chǎn)生愈傷組織越快;叢生芽產(chǎn)生在MS+IBA 1.0 mg/L+6-BA 2.0~3.0 mg/L中,6-BA越高,增殖系數(shù)越大,可達6以上;根系形成在1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+AC 2 g/L中較好。由此法培養(yǎng)得到的種苗經(jīng)大棚煉苗后用于生產(chǎn),果大且產(chǎn)量高,甜而香,品質(zhì)更優(yōu)。
關(guān)鍵詞:草莓;章姬;紅頰;組織培養(yǎng);快速繁殖
中圖分類號:S668.4 文獻標志碼:B DOI:10.19415/j.cnki.1673-890x.2016.08.016
草莓(Fragaria ananassa Duch)是多年生草本植物,水果為漿果類[1]。屬于溫帶性植物,生長發(fā)育需要低溫,15~25 ℃發(fā)育正常。對草莓有機化種植,使其果含有大量的糖類、蛋白質(zhì)、氨基酸等多種營養(yǎng)物質(zhì),從色、香和味來,說均為佳品,被稱為“水果中的皇后”。由于其酸甜適中且鮮美,大棚種植提前到每年11月上市,成為新春佳節(jié)少有新鮮的果品,深受人們喜愛[2,3],采用到基地采摘形式,產(chǎn)量高,經(jīng)濟效益較為顯著[4]。草莓優(yōu)良品種繁育通常采用無性快繁方式來保證其品質(zhì)的穩(wěn)定性,獲得優(yōu)質(zhì)和高產(chǎn)[4,5]。近年來,草莓優(yōu)質(zhì)種苗市場需求量大,采用常規(guī)繁育種苗,易感染病菌,幾代后品質(zhì)下降,開花著果率低,造成減產(chǎn),無經(jīng)濟效益可言[6-8]。所以,運用組織快繁技術(shù)得到大量的脫毒苗,解決常規(guī)繁育種苗的易感病、結(jié)果率低的缺點,提高了草莓的產(chǎn)量和品質(zhì),經(jīng)濟效益十分突出[9]。
1 材料與方法
1.1 材料
從生長旺盛的章姬和紅頰草莓植株中,選取幼嫩的莖尖和葉,用水沖洗30~60 min后備用。材料來自于黔南民族師范學院草莓基地。
1.2 消毒方法
將備用材料送到無菌接種室操作臺上,用0.1%的氯化汞消毒5~7 min,再用無菌水沖洗5~6次。后將外殖體切好,接種到設計好的愈傷組織誘導培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。
1.3 培養(yǎng)條件
1.3.1 愈傷組織誘導培養(yǎng)基
①MS+IBA 2.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L;②MS+IBA 3.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L;③MS+IBA 4.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L。
1.3.2 叢生芽或繼代增殖培養(yǎng)基
④MS+IBA 1.0 mg/L+6-BA 2.0 mg/L;⑤MS+IBA 1.0 mg/L+6-BA 2.5 mg/L;⑥MS+IBA 1.0 mg/L+6-BA 3.0 mg/L。
1.3.3 生根培養(yǎng)基
⑦1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+AC 2 g/L;⑧1/2MS+6-BA 0.5 mg/L;⑨1/2MS+AC 2 g/L。
培養(yǎng)室的溫度為(20±2)℃,光照強度為2 000 LX,時長12 h/d。培養(yǎng)基的pH均為5.8。
2 結(jié)果與分析
2.1 愈傷組織的誘導
將消毒好的材料分別切割接種到①②③培養(yǎng)基中誘導愈傷組織的產(chǎn)生,并標記(品種、接種時間、接種瓶數(shù)),之后每3 d觀察記錄生長狀況,在20 d。在培養(yǎng)基上均愈傷組織的產(chǎn)生,且在①②③中依次產(chǎn)生的愈傷組織逐漸增多,說明隨著IBA濃度越高,產(chǎn)生的愈傷組織就越多。
2.2 叢生芽的分化培養(yǎng)與繼代增殖
將第一階段培養(yǎng)的愈傷組織分別轉(zhuǎn)接到培養(yǎng)基④⑤⑥中進行叢生芽分化培養(yǎng),并記錄(品種、轉(zhuǎn)接時間、轉(zhuǎn)接瓶數(shù)),每3 d觀察1次。過30d后,在培養(yǎng)基④⑤⑥中出現(xiàn)叢生芽,將叢生芽轉(zhuǎn)移繼代培養(yǎng),30 d后記錄其產(chǎn)生的叢生芽數(shù),發(fā)現(xiàn)增殖率分別為5.3、7.5、9.2,每種培養(yǎng)基上也有少量根的產(chǎn)生,說明在有一定IBA條件下,6-BA濃度高,增殖率越大。
2.3 生根培根
將較健狀的叢生芽分離,接種到生根培養(yǎng)基⑦⑧⑨上進行生根培養(yǎng),15 d后培養(yǎng)基⑦⑧⑨叢生芽出現(xiàn)了白色幼嫩的根,3周后,多條根出現(xiàn)。到45 d根系均為3條壯根以上,記錄生根情況。發(fā)現(xiàn)在培養(yǎng)基⑦上的根為較粗而長,培養(yǎng)基⑧⑩上的根較短而細,說明在低營養(yǎng)、低6-BA和有活性碳的情況下,有利于生根,綜合這些因素的效果更好。繼續(xù)培養(yǎng)1~2周后,可移出培養(yǎng)室煉苗和移栽。
2.4 煉苗與移栽
將生根好的草莓組培瓶苗先移至大棚內(nèi),10 d開
啟瓶蓋,將其擱在大棚內(nèi)5 d后,將苗取出,放在盆內(nèi)把培養(yǎng)基洗掉后,栽種到腐質(zhì)土的苗床上,噴水保溫保濕,14 d后均看見幼葉長出,成活率達90%以上。在同樣的種苗生產(chǎn)條件下,章姬和紅頰兩個品種均能得到優(yōu)質(zhì)種苗,但紅頰的種苗較弱,但生活能力較強。
3 結(jié)論
通過試驗研究,結(jié)果草莓章姬和紅頰兩個品種的愈傷組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基為MS+IBA 2.0~4.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L,叢生芽的分化與繼代增殖培養(yǎng)基為MS+6-BA 2.0~3.0 mg/L+IBA 1.0 mg/L,生根培養(yǎng)基為1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+AC 2 g/L,經(jīng)在鋼架大棚內(nèi)煉苗后移植至腐殖土苗床上,成活率達90%以上,兩個品種在種苗生產(chǎn)上表現(xiàn)具有顯著差異。此研究結(jié)果為提高生產(chǎn)高檔優(yōu)質(zhì)草莓品種的品質(zhì)和產(chǎn)量提供基礎,經(jīng)濟效益顯著。
參考文獻
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(責任編輯:劉昀)