飼料中真蛋白的測定及其意義

【摘 要】 蛋白質是生命的物質基礎，飼料中蛋白質測定的準確性在飼料應用中有極其重要的作用。

【關鍵詞】 蛋白質 測定 意義

【DOI編碼】 10.3969/j.issn.1674-4977.2016.01.004

蛋白質是復雜的含氮有機化合物，動物在成長過程中所需要的蛋白質營養成分多少決定其生長的質量，所以真蛋白質含量測定的準確性直接影響飼料的質量和動物的成長。

飼料原料的種類很多，有動物蛋白飲料和植物蛋白飲料，飼料中蛋白質含量是判定飼料營養價值的一項重要指標。飼料中粗蛋白質包括真蛋白質和非蛋白質兩部分含氮物質，后者主要包括游離氨基酸、硝酸鹽、氨等，在飼料生產中添加羽毛粉、血粉、尿素等不易被動物肌體吸收的物質，飼料產品中粗蛋白含量上去了，但卻沒有相應的營養價值，造成養殖效益的低下，所以檢測飼料中真蛋白含量的意義重大。

近年來，在國內外測定飼料中蛋白質含量的方法很多，但是應用廣泛的分析方法中主要采用凱氏定氮法。凱氏定氮法由Kieldahl于1833年首先提出，經長期改進，迄今已發展的非常完善及準確，其中自動定氮儀法采用較廣泛。

1 原理

真蛋白的檢測原理是將20%硫酸銅加入已溶解的飼料原料中，加入過程中要緩慢且過量，這樣才能使飼料中的真蛋白在堿性條件下被氫氧化銅沉淀出來，為了防止水溶性含氮物的干擾，還要用蒸餾水將其洗凈，此時的沉淀物可按飼料中粗蛋白的檢測方法將真蛋白質的含量測定出來。

蛋白質是有機化合物，將飼料原料與硫酸和催化劑一起在高溫爐上加熱，將其中的蛋白質充分分解出來，分解出來的氨與硫酸產生碳酸銨，最后再加入過量的堿溶液，在蒸餾過程中使其中的氨游離，在硼酸吸收液接收后用標準鹽酸溶液滴定，根據酸的消耗量計算其中蛋白質的含量。

2 樣品消化

（1）消化反應方程式

H2SO₄+2NH₃=（NH₄）2SO₄

加入硫酸鉀可提高溶液的沸點，進而加快有機物的分解。

K₂SO₄+H₂SO₄=2KHSO₄

加入硫酸銅起到催化的作用

Cu₂SO₄+2H2SO₄→2CuSO₄+2H₂O+SO₂↑

（2）蒸餾

氨是否完全蒸餾出來，是決定最后滴定的準確性一步，可將蒸餾液用pH試紙來定性是否為堿性。放出氨氣，吸收、滴定。

2NaOH+（NH₄）2SO₄=2NH₃↑+Na₂SO₄+2H₂O

（NH₄）2B₄O₇+5H₂O+2HCl=2NH₄Cl+4H₃BO₃

3 操作方法

（1）準確稱取飼料原料樣品1g～2g（精確到0.1mg），將燒杯中加入50ml無氮蒸餾水，稱取準確的樣品放入燒杯中，放在電爐上一邊加熱一邊攪拌，緩慢加入硫酸銅溶液至沸騰，再緩慢加入氫氧化鈉溶液一起攪拌均勻，將此溶液靜止放置2小時以上，將濾紙放于漏斗上，用蒸餾水洗凈沉淀物及殘渣，使濾紙上的沉淀物無硫酸根離子。連同漏斗一起放入80℃干燥箱中烘干，將濾紙和沉淀物小心放入消化管中加入6.4g催化劑、15ml濃硫酸，在消化器上消化，樣液澄清后繼續消煮2h，同時做空白實驗。

（2）取下消化管，用少量蒸餾水洗凈管口，放置到自動凱氏定氮儀上，連接加堿電鈕，將硼酸吸收液中放入幾滴指示劑搖勻后放置在蒸餾器出口處，使蒸餾口完全浸入吸收液中。自動蒸餾過程中注意蒸餾加堿反應速度，堿液不易過濃，蒸餾速度不易太快，防止消化液逆流到廢液桶里。蒸餾液蒸餾過程中輕搖混勻后，將三角瓶離開蒸餾口中，用蒸餾水少量清洗冷凝管末端，繼續蒸餾至150ml左右，蒸餾結束。

（3）試樣滴定：將蒸餾液搖勻后用鹽酸標準溶液滴定，滴定終點由灰藍色變成藍紫色。

（4）結果計算：

真蛋白（%）=（V₂-V₁）×C×0.0140×6.25×100/M

表1為飼料原料魚粉中真蛋白測定結果，用來鑒別摻假魚粉。

4 結論

魚粉中真蛋白與粗蛋白的比列為80%，國產魚粉中真蛋白與粗蛋白的比列為75%。飼料中蛋白質含量的多少直接影響動物在喂養過程中蛋白質營養成分的攝取，所以在飼料及其原料的蛋白質檢測過程中，對于每一個檢測環節都應嚴謹認真，使檢測的蛋白含量準確無誤，為動物飼料的鑒定和定量起到一定指導分析作用。

作者簡介

辛欣，從事食品檢驗工作11年，現任錦州市產品質量監督檢驗所樣品室主任。

（責任編輯：張曉明）