淺論水質(zhì)分析中微生物檢測的質(zhì)量控制

【摘要】水質(zhì)分析中，微生物的檢測是其重要內(nèi)容，水質(zhì)分析中的微生物檢測水樣采集后送至檢測室，檢驗中所用的一切用品必須是完全滅菌的，在滅菌前應(yīng)徹底洗滌干凈。本文簡述了水質(zhì)檢測質(zhì)量控制的必要性，對水質(zhì)分析中實(shí)驗室的質(zhì)量控制以及水質(zhì)分析中微生物檢測的質(zhì)量控制進(jìn)行了論述分析。

【關(guān)鍵詞】水質(zhì)檢測；質(zhì)量控制；水質(zhì)分析；微生物檢測；實(shí)驗室

1、水質(zhì)檢測質(zhì)量控制的必要性

水質(zhì)檢測在防治水污染、制定水環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)方面發(fā)揮重要作用。水質(zhì)檢測質(zhì)量保證是一種保證檢測數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠的手段，是整個監(jiān)測過程的重要環(huán)節(jié)， 建立健全質(zhì)量體系是實(shí)驗室內(nèi)部進(jìn)行質(zhì)量管理的保障，并且質(zhì)量控制和質(zhì)量保證貫穿于水質(zhì)檢測工作的全部過程。而水質(zhì)分析中水中微生物的檢測是其重要內(nèi)容，因此對水質(zhì)微生物檢測質(zhì)量控制的研究具有重要意義。

2、水質(zhì)分析中實(shí)驗室的質(zhì)量控制

2.1 實(shí)驗設(shè)備的質(zhì)量控制。第一、天平的使用應(yīng)嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，定期進(jìn)行檢定。第二、使用PH計，至少要配制兩種標(biāo)準(zhǔn)緩沖液（PH4.0，PH7.0或PH10）來校準(zhǔn)PH計。第三、分析用水最好采用去離子水或蒸餾水，反對使用滲透水。第四、電熱滅菌箱應(yīng)定期（三個月）采用孢子試條或孢子懸浮液來測試其性能，確保操作準(zhǔn)確顯在160℃～180℃之間，己滅菌的器皿應(yīng)有標(biāo)志區(qū)分。第五、高壓滅菌應(yīng)采用115℃維持20min，高壓滅菌器在滅菌前將壓力蒸汽滅菌化學(xué)指示卡放入高壓滅菌器內(nèi)檢驗其滅菌效果，每次使用要記錄好溫度、氣壓和滅菌時間。第六、膜濾裝置在使用前應(yīng)將部件組合起來，并檢查有無滲漏，必要時覆以硅酮，以增強(qiáng)過濾排放的效果。使用應(yīng)徹底清洗。第七、紫外燈應(yīng)每月定期擦試，每三個月一次使用紫外光度計測量紫外燈，以保持能使用紫外燈放出的紫外光在其最初放出的70%以上。第八、培養(yǎng)箱應(yīng)每天兩次檢查其使用溫度，培養(yǎng)箱應(yīng)置于室溫為16℃-27℃范圍的房間最佳。第九、所使用的玻璃器具要求完整無損，清洗后要進(jìn)行檢查，如果洗后表面有過多水珠附著，必須重洗。

2.2 實(shí)驗室環(huán)境控制。第一、實(shí)驗室要求有良好的通風(fēng)而且能夠避免灰塵、溫度變化，最終好能要用集中式空調(diào)，這樣一來即能減少雜菌污染，又能保證培養(yǎng)箱的穩(wěn)定操作和減輕培養(yǎng)基、分析天平的受潮問題。第二、設(shè)計實(shí)驗室，在工作時，使往來通行和訪客的影響能減少到最小程序為原則，并要具專門的區(qū)域供配制培養(yǎng)基和無菌操作用。第三、用光滑的最后一道漆覆蓋墻壁，使之易于清洗和消毒，地面要求使指定的材料，做到放滲水、光滑、易于清潔；工作臺高寬適當(dāng)、臺面要做到防止透水、抗腐蝕、光滑無逢。第四、保持高度標(biāo)準(zhǔn)的清潔空氣。可采用RODAC平皿、細(xì)菌密度平皿或拭抹法來監(jiān)測空氣和臺桌面。

2.3 制成的培養(yǎng)基的質(zhì)量控制。每次配制好的培養(yǎng)基應(yīng)記錄有配制人，配制日期，培養(yǎng)基名稱和配制批次、數(shù)量、滅菌溫度和所使用時間、PH值以及培養(yǎng)基中是否配有不穩(wěn)定成分等。并進(jìn)行無菌檢驗及陽性的陰性對照培養(yǎng)檢查。

3、水質(zhì)分析中微生物檢測的質(zhì)量控制

3.1 水質(zhì)檢測微生物樣品采集的質(zhì)量控制。（1）水質(zhì)檢測微生物實(shí)驗室先備齊采集微生物樣品的無菌采樣玻璃瓶。許多水體隨時間和空間會發(fā)生很大變化，必須制定出合理的采樣規(guī)劃。為保證采集的水樣必須有代表性，采樣時固定取水點(diǎn)，同一時間；采水量應(yīng)為瓶容量的80%，以便在檢驗時充分混勻；采樣時應(yīng)直接采集，不得用水樣刷洗已滅菌的采樣瓶，并避免手指和其他物品對瓶口的玷污；采樣時不可攪動水底的沉積物；采集管網(wǎng)水的樣品前應(yīng)對水龍頭進(jìn)行消毒，方法為用火焰在龍頭表面燒灼片刻（3～5秒），而后放水5～10分鐘。農(nóng)村生活用水部分水樣為蓄水池，需要備一個干凈的水桶，放入水池中數(shù)分鐘，盡量不取表面水，提水后將水灌入無菌瓶中，手注意不要接觸到無菌瓶口和瓶塞。（2）水樣的保存達(dá)到減緩微生物繁殖的作用。采用低溫冷藏箱來保存水樣，水樣全部采集后立即送回實(shí)驗室；在運(yùn)輸中，玻璃容器要防止破裂，須有固定措施，防止樣品容器傾倒和樣品溢出。

3.2 水質(zhì)微生物樣品檢測中的質(zhì)量控制。（1）檢測菌落總數(shù)的質(zhì)量控制。微生物檢驗操作每一步驟都關(guān)系結(jié)果的可靠性，均需嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作技術(shù)，防止人為污染、環(huán)境污染和樣品交叉污染。在接種前應(yīng)將水樣充分搖勻，是水中的細(xì)菌均勻分布于水中，水樣稀釋時應(yīng)小心沿管壁加入，不要觸及管內(nèi)稀釋液，以防吸管尖外側(cè)部分粘附的檢液混入其中，將水樣注入皿內(nèi)時，從皿側(cè)加入，不要揭去皿蓋，最后將吸管直立使水流空，并在皿底干燥處再擦一下吸管尖將余液排出，而不要吹出。為防止產(chǎn)生片狀菌落，水樣加入平皿后，在20分鐘內(nèi)向皿內(nèi)傾入營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，并立即混合均勻，皿內(nèi)瓊脂凝固后，不要放置長久后才翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)，而應(yīng)于瓊脂凝固后，在數(shù)分鐘內(nèi)將平皿翻轉(zhuǎn)進(jìn)行培養(yǎng)，這樣可避免菌落蔓延生長。（2）檢測大腸菌群的質(zhì)量控制。依據(jù)生活飲用水國家衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)（GB/T5750.12-2006）中推薦的固定底物技術(shù)酶底物法來檢測，將一個科立得試劑倒入裝有100ml水樣無菌取樣瓶中，蓋上蓋子，搖勻。將水樣全部倒入51孔或97孔定量盤中，使用專用的程控定量封口機(jī)封口，放在36±1℃培養(yǎng)24小時進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果對照51孔定量盤法不同陽性結(jié)果的MPN值及95%可信范圍。可以同時定量檢測出大腸菌群和大腸埃希氏菌。這個方法不僅減少了工作量，也避免了使用多管法的逐級稀釋帶來的操作誤差；而且使用濾膜法時肉眼讀數(shù)的人為誤差，因此其假陽性率和假陰性率都比傳統(tǒng)方法低。由于24小時內(nèi)就得到結(jié)果，可以很好的用于突發(fā)事件應(yīng)急。

4、結(jié)束語

水質(zhì)分析中微生物在實(shí)驗室檢測過程中存在諸多影響質(zhì)量的因素。因此在水質(zhì)分析中的微生物檢測過程中實(shí)施質(zhì)量控制必須貫徹檢測的全過程，這樣才能確保檢測結(jié)果的時空代表性及實(shí)驗室分析測試的精密性和準(zhǔn)確性，從而有效保證檢測全過程的質(zhì)量控制。

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