轉錄因子SOX2、OCT4在卵巢上皮性癌組織中的表達及臨床意義

梁家彬，孟躍進（鄭州大學第二附屬醫院婦產科，河南 鄭州 450014）

轉錄因子SOX2、OCT4在卵巢上皮性癌組織中的表達及臨床意義

梁家彬，孟躍進*
（鄭州大學第二附屬醫院婦產科，河南 鄭州 450014）

目的 探討轉錄因子SOX2和OCT4在卵巢上皮性癌組織中的表達及臨床意義。方法 采用免疫組化SP法檢測卵巢上皮性癌組織45例（惡性組）、良性卵巢上皮性腫瘤組織20例（良性組）、正常卵巢上皮組織15例（正常組）中SOX2、OCT4蛋白的表達，分析兩蛋白的表達與卵巢上皮性癌臨床病理參數的關系及二者表達的相關性。結果 SOX2、OCT4蛋白在惡性組中的陽性表達率分別為77.8%和66.7%，顯著高于良性組的45%和30%和正常組的0%和0%，差異有統計學意義（P＜0.05） 。SOX2、OCT4蛋白的表達與臨床分期、分化程度及淋巴結轉移有關，而與病理類型無關。SOX2、OCT4蛋白在卵巢上皮性癌組織中的表達呈正相關，差異有統計學意義（rp=0.468，P＜0.05）。結論 SOX2和OCT4在卵巢上皮性癌組織中高表達，兩者可能協同參與卵巢上皮性癌的發生發展。

SOX2；OCT4；卵巢上皮性癌

卵巢上皮性癌（Epithelial ovarian cancer，EOC）是婦科常見的惡性腫瘤之一，雖然臨床上能夠采用手術、放化療等綜合治療方法進行治療，但其死亡率仍居婦科腫瘤首位，其發病率也呈逐年上升趨勢，因此，尋找新的診療方法勢在必行。腫瘤干細胞是一類具有自我更新、多向分化、高致瘤性等特點的特殊類型的細胞，與腫瘤侵襲、轉移、復發密切相關，近年來在乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌等惡性腫瘤中已成功分離出了腫瘤干細胞[1]。性別決定區Y框蛋白2（SOX2）是SOX家族的成員之一，研究表明該基因在維持干細胞的多能性方面起著重要作用[2]。八聚體結合轉錄因子4（OCT4）在胚胎細胞中表達，是細胞分化全能性的標記，表達OCT4的細胞可能是引起腫瘤發生的起始細胞[3]。本研究通過檢測SOX2、OCT4在卵巢上皮性癌中的表達變化，分析二者的相關性，探討二者在EOC發生發展中的作用，為臨床治療尋找新的靶點。

1 材料與方法

1.1 一般材料

選取2011年8月～2015年7月我院患者的手術標本80例，患者年齡21～79歲，平均年齡53.5歲，所有患者術前均未行放化療或激素治療，經病理證實正常卵巢上皮組織15例，良性卵巢腫瘤20例，卵巢上皮性癌45例，其中漿液性囊腺癌27例，黏液性囊腺癌11例，子宮內膜樣癌7例。按國際婦產科聯盟（FIGO）分期：Ⅰ～Ⅱ期11例，Ⅲ～Ⅳ期34例；低分化25例，高、中分化20例；淋巴結轉移29例，無淋巴結轉移16例。

1.2 方法

1.2.1 試劑

兔抗人SOX2多克隆抗體、兔抗人OCT4多克隆抗體均購自北京博奧森生物技術有限公司。二抗及顯色劑購自北京中杉金橋生物有限公司。操作步驟按說明書進行，用已知的陽性切片作陽性對照，用PBS代替一抗作陰性對照。

1.2.2 結果判定

SOX2和OCT4蛋白均表達于細胞核，以細胞核呈棕黃色或 棕褐色顆粒為陽性。在400倍光鏡下隨機選擇5個高倍視野進行觀察，按染色強度計分：無色為0分，淺黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分；再按陽性細胞率計分，陽性細胞百分數＜10%為1分，10%～50%為2分，＞50%為3分；以上兩種方法結果的乘積，積分＜3分為陰性（-），≥3分為陽性（+）。結果判定在雙盲下進行，每張切片分別由3名病理科醫生計數。

1.3 統計學方法

采用SPSS 17.0統計學軟件對數據進行處理，計數資料采用x2檢驗，相關性分析采用Spearman法，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 SOX 2和OCT4蛋白在三組不同組織中的表達

SOX2和OCT4蛋白陽性染色均位于細胞核，SOX2蛋白在正常組、良性組、惡性組中的陽性表達率分別為0% （0/15）、45.0%（9/20）、77.8%（35/45），差異有統計學意義（x2=28.575，P＜0.05）；組間兩兩比較，差異均有統計學意義（P＜0.05)。OCT4蛋白在以上三組中的陽性表達率分別為0%（0/15）、30.0%（6/20）、66.7%（30/45），差異有統計學意義（x2=22.626，P＜0.05）；組間兩兩比較，差異均有統計學意義（P＜0.05）。見圖1、表1。

圖1 SOX2和OCT4在不同卵巢上皮組織中的表達（SP×400）注：A：SOX2；B:OCT4；1：正常組； 2：良性組；3：惡性組

表1 SOX4和OCT4在不同卵巢上皮組織中的表達 [n（%）]

2.2 SOX2和OCT4蛋白的表達 與EOC臨床病理參數的關系

SOX2和OCT4蛋白的表達均與臨床分期、分化程度和淋巴結轉移有關（P＜0.05）；與病理類型無關（P＞0.05）。見表2。

表2 SOX2 和OCT4蛋白的表達與EOC臨床病理參數的關系 [n（%）]

2.3 SOX2、OCT4蛋白表達的相關性分析

45例EOC患者中SOX2和CyclinD1蛋白表達均陽性者28例，均陰性者8例，SOX2表達陽性、OCT4表達陰性者7例，SOX2表達陰性、OCT4表達陽性者2例，兩者呈正相關，差異有統計學意義（x2=10.045，P=0.002，rp=0.468）。

表3 在EOC組織中SOX2和OCT4蛋白表達的相關性

3 討 論

SOX2是SOX（SRY-related HMG-box）家族成員之一，是胚胎干細胞表面標志物之一，在調控胚胎及組織發育，干細胞分化、增殖和決定細胞命運等方面起著重要作用[2]。近年研究發現SOX2在乳腺癌、前列腺癌、肺癌等多種實體瘤中異常表達，并與腫瘤的侵襲、轉移密切相關[4]。Fang 等[5]的研究結果顯示，結腸癌組織中SOX2的表達明顯高于癌旁正常組織，且在結腸癌細胞系SW620中敲除SOX2基因不僅能夠抑制腫瘤細胞的生長，也能夠抑制小鼠異體移植模型中腫瘤的生長。Sanada Y等[6]發現，在胰腺癌的發展過程中Sox2的表達逐漸增強，尤其在分化差和浸潤轉移的癌組織中表達更加明顯。本研究結果顯示，SOX2蛋白在惡性組中的表達明顯高于良性組及正常組，進一步研究發現，SOX2蛋白的表達與FIGO分期、組織分化程度及淋巴結轉移有關，該結果與上述腫瘤中的研究結果相似，提示SOX2不僅參與了卵巢上皮性癌的發生，也與卵巢上皮性癌的侵襲轉移密切相關。

干細胞標志物的另一重要指標OCT4基因是POU轉錄因子家族中的一員，不僅能夠調控正常細胞的分化，也在維持胚胎干細胞的多潛能性和自我更新方面發揮極其重要的作用。目前，不僅在生殖細胞瘤中檢測到OCT4的表達，也在一些上皮性腫瘤如胃癌、口腔癌、乳腺癌等許多腫瘤中檢測到OCT4高表達，并與腫瘤的轉移、復發、預后密切相關。本研究結果顯示，OCT4蛋白在惡性組中明顯高表達，與正常組及良性組比較差異有統計學意義，說明OCT4參與了卵巢上皮性癌的發生，進一步研究顯示，OCT4蛋白的表達與FIGO分期、組織分化程度及淋巴結轉移有關，提示OCT4還參與了卵巢上皮性癌的侵襲轉移過程。

兩種轉錄因子并不是孤立發揮作用，兩者之間存在復雜的前饋調節、反饋調節和自身調節。據報道，SOX2可以同OCT4結合為異二聚體，調節Nanog、Utfl、Fbx15等轉錄因子的轉錄。本研究通過對兩者的相關性進行研究發現，卵巢上皮性癌組織中兩者的表達呈正相關，說明兩者可能是通過協同作用促進腫瘤的發生及發展。

綜上所述，SOX2和OCT4在卵巢上皮性癌中表達明顯

上調，兩者與卵巢上皮性癌的發生發展密切相關，可能是卵巢上皮性癌惡性程度高，呈侵襲性生長的原因之一，聯合監測兩者在卵巢上皮性癌中的表達，可以為臨床判斷卵巢上皮性癌惡性程度提供有效參考，為卵巢癌的發病機制及靶向治療提供了新思路。

[1]Duarte S,Momier D,BaquéP,et al.Preventive cancer stem cell-based vaccination reduces liver metastasis development in a rat colon carcinoma syngeneic model[J].Stem Cells,2013,(3):423-432.

[2]Popowski M,Templeton TD,Lee BK,et al.Bright/Arid3A Acts as a Barrier to Somatic Cell Reprogramming through Direct Regulation of Oct4,Sox2,and Nanog[J].Stem Cell Reports,2014,2(1):26-35.

[3]Van Den Berg DL,Snoek T,Mullin NP,et al.An Oct4-centered protein interaction network inembryonic stem cells[J].Cell stem cell,2010,6(4):369-381.

[4]張光杰.轉錄因子SOX2在常見腫瘤研究中的新進展[J].重慶醫學,2012,41(21):2221-2223.

[5]Fang X,Yu W,Li L,et al.ChIP-seq and functional analysis of the SOX2 gene in colorectal cancers[J].OMICS,2010,14(4):369-384.

[6]Sanada Y,Yoshida K,Ohara M,et al.Histopathologic evaluation of stepwise progression of pancreatic carcinoma with immunohistochemical analysis of gastric epithelial transcription factor SOX2: comparison of expression patterns between invasive components and cancerous or non-neoplastic intraductal components[J].Pancreas,2006,32(2):164-170.

R735.2

B

ISSN.2095-8803.2016.03.028.03

孟躍進，男，主任醫師，E-mail：13838001776@163.com

梁家彬（1978-），男，黑龍江哈爾濱人，本科，主治醫師，研究方向：婦產科臨床與科研工作

吳玲麗

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