電針對正常犬血漿三種相關神經營養園子的影響

李偉　李拓　高蕊　程鵬　李佳　姜代勛　陳武

摘要：目的：初步觀察電針對正常比格犬血漿中神經營養因子濃度的影響，為分析針灸對神經機能障礙性疾病的治療、保健作用機制積累數據。方法：8只}匕格犬，選取足三里、趾問、百會和膀胱俞穴，于清醒狀態下隔日電針刺激，并在電針前和首次電針后第1天、4天、7天和14天采血，分離血漿，Elisa試劑盒檢測神經生長因子（nervegrowthfactor，NGF）、腦源性神經生長因子（brain-derivedneurotrophicfactor，BDNF）和神經營養素-3（neurotrophin-3，NT-3）的濃度。結果：電針后，血漿中三種神經營養因子的濃度呈升高變化。與針前比較，NGF的濃度在電針后第4天極顯著升高（p<0.01）、第7天顯著升高（P<0.05）和第14天極顯著升高（P<0.01）；BDNF的濃度在電針后第4天、第7天和第14天均極顯著升高（P<0.01）；NT-3的濃度在電針后第4天（P<0.01）和第14天（P<0.01）差異極顯著，第1天和第7天差異不顯著。結論：電針可提高犬血漿NGF、BDNF、NT-3的濃度，提示電針對神經系統的治療與保健作用可能與此有關。

關鍵詞：神經生長因子；腦源性神經營養因子；神經營養素3；電針

中樞及末梢神經機能障礙是臨床常見的動物疾病。研究發現，一些神經性疾病的發生與血漿中神經營養因子的水平有關。針灸作為中國傳統醫學的代表之一，對神經系統疾病療效切實。然而，針灸改善神經機能的機理尚未不完全清楚。本研究通過觀察電針前和電針后不同時間段試驗犬血漿中NGF、BDNF和NT-3濃度的變化，為揭示針灸對神經性疾病的治療、保健作用機理積累數據。

1.材料與方法

1.1實驗動物

8只性成熟比格犬（購自北京市海淀區興隆實驗動物養殖廠），雌雄各半。

1.2實驗材料

KWD-808I脈沖電療儀（常州市武進長城醫療器械有限公司）；針灸針（0.2×25mm，蘇州針灸用品有限公司）；一次性用真空靜脈采血管（瀏陽市三九醫用科技發展有限公司）；一次性用真空采血器配套用針（上海康依醫療器械有限公司）；NGF-Elisa試劑盒（E08N0014，BlueGene）；BDNF-Elisa試劑盒（E0880007，BlueGene）；NT-3-Elisa試劑盒（E08N0018，BlueGene）。

1.3實驗方法

針前對照（空白組）：在電針開始前1周，進行一次采血、收集血漿，-80℃凍存。

電針組：選取百會穴、足三里穴、膀胱俞穴和趾間穴。其中，百會穴進行針刺，但不接電針儀，其余三組穴位相同穴位連接同一組導線，采用連續波（頻率2Hz），電針強度以后肢出現輕微抖動為宜，25min/次，隔天1次。在第一次電針結束后24h采血，分離血漿，為第1天，依此類推，在電針后第4天、7天和14天分別采血，分離血漿，-80℃凍存。采用Elisa法檢測血漿樣品中NGF、BDNF和NT-3的濃度。

1.4統計學處理

數據采用SPSS17.0軟件進行統計分析。采用四參數法求得Elisa試劑盒標準曲線，根據標準曲線計算血漿中NGF、BDNF、NT-3的濃度，濃度值用平均數±標準差（x±s）表示，采用獨立樣本t檢驗，檢驗標準：P0.05差異顯著，P0.01差異極顯著。

2.試驗結果

由圖1可知，電針后，血漿中NGF濃度呈升高趨勢。與針前相比，電針后第1天差異不顯著（P>0.05）；第7天差異顯著（P<0.05）；第4天和14天差異極顯著（P<0.01）。

由圖2可知，電針后，血漿中BDNF的濃度開始升高。與針前相比，電針第1天差異不顯著（P>0.05）；電針第4天、第7天和第14天差異極顯著（P<0.01）。

由圖3可知，與針前相比，電針后，血漿中NT-3的濃度逐漸升高。電針第4天、第14天差異極顯著（P<0.01）；電針第1天、第7天血漿NT-3的濃度變化不顯著（P>0.05）。

3.討論

神經機能障礙性疾病是犬的多發病。外周或中樞神經損傷引發的癱瘓，不僅給患動自身帶來痛苦和活動不便，還給其主人和醫療活動帶來沉重的負擔。針灸作為一種治病、防病的手段，在面神經麻痹、坐骨神經麻痹、膀胱麻痹、直腸麻痹、椎間盤脫出等疾病治療的過程中，顯示出了神奇的治療效果。

神經機能的恢復離不開相關神經營養因子的參與。NGF、BDNF、NT-3是神經營養素家族中三大主要成員，對神經元的生長、分化、發育，維持神經系統生存和功能，以及防止神經元死亡，促進受損神經纖維和軸突的再生等方面發揮著十分重要的作用。文獻表明，NGF、BDNF和NT-3在許多中樞神經系統疾病發生、發展和轉歸過程中，起著至關重要的作用。有研究證明，用硅膠管連接坐骨神經橫斷模型大鼠兩神經斷端，管中充有BDNF組對斷端神經元的再生促進作用顯著高于充有磷酸鹽緩沖液的對照組。李漾超等對BDNF與癲癇研究進行總結發現，BDNF具有抗癲癇作用的同時，也參與了癲癇發生的機制。

趾間、足三里、百會和膀胱俞穴是寵物臨床治療神經性疾病常用穴。鄒偉等用“百會”透“曲鬢”頭針療法干預急性腦出血模型大鼠，設定造模后6h、1d、2d、3d、7d五個時間窗，觀察血腫周圍腦組織BDNFmRNA和NGFmRNA的表達情況，發現各時間窗電針組大鼠BDNFmRNA和NGFmRNA表達均顯著高于模型組，且高峰期分別在腦出血后的第2天和第7天。研究還發現，電針足三里和百會穴能提高大鼠海馬回BDNF的水平。也有研究證明，電針曲池和足三里穴能提高腦缺血再灌注模型大鼠大腦皮質腦源性神經營養因子的表達。王燕等對電針促進神經營養因子表達研究進行總結發現，電針能夠提高NGF、BDNF、NT-3等神經營養因子在損傷脊髓組織中的陽性表達。然而電針對犬血漿中NGF、BDNF和NT-3濃度影響的研究未見報道。因此，本研究對犬電針前、后血漿三種神經營養因子濃度變化進行了觀察研究。

結果表明，電針后，血漿中NGF、BDNF、NT-3濃度開始升高。在電針第4天、第7天和第14天，與針前空白組比較，存在顯著性差異，而電針第一天，三種神經營養因子的濃度雖有所升高，但與針前空白組比較差異不顯著；在上述電針的四個時間段，血漿中三種神經營養因子的濃度呈現出了“低-高-低-高”的波動現象，而這種波動與空白組相比，均處在一個較高的水平。說明，電針刺激足三里、膀胱俞、百會和趾間穴能夠在較短的時間內（2次針灸后）提高正常比格犬循環血血漿中NGF、BD-NF、NT-3的濃度。

血漿神經營養因子濃度的提高，利于神經組織營養和損傷后的修復，提示電針對神經系統的治療、保健作用可能與提高血漿中神經營養因子的濃度有關。

本次研究雖然發現電針能夠提高正常比格犬血漿中NGF、BDNF和NT-3的濃度，并提示針灸尤其是電針治療神經系統疾病的機制可能與此有關，但對于疾病狀態下神經營養因子的變化及電針對其的影響還需要進一步研究。

4.結論

電針能在短時間內提高正常犬血漿NGF、BD-NF、NT-3的濃度，且其對神經系統的治療、保健作用可能與此有關。

（編輯：狄慧）