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化學發光免疫分析法檢測血清中前列腺特異抗原復合物

2016-05-14 10:32:59周友俊李嬌霞程繪珺楊喬芬何美瓊郭麗萍鄧智勇
分析化學 2016年8期
關鍵詞:前列腺癌

周友俊 李嬌霞 程繪珺 楊喬芬 何美瓊 郭麗萍 鄧智勇

摘 要 采用雜交瘤技術構建抗前列腺特異抗原-α1-抗胰凝乳蛋白酶(Prostate specific antigen -α1-antichymotrypsin complex,PSA-ACT)單克隆抗體(單抗)細胞株,共獲得8株穩定分泌PSA-ACT單抗的細胞株,純化后進行免疫特性鑒定并做單抗配對。選擇其中一對單抗,采用辣根過氧化物酶(HRP)催化魯米諾(lumino)-H2O2 化學發光體系,建立了測定人血清中PSA-ACT濃度的化學發光酶免疫分析方法(CLEIA)。對包被緩沖液、包被抗體濃度、酶標抗體稀釋度、溫育時間、發光反應時間和免疫反應步驟等實驗參數進行了優化。在最佳實驗條件下, PSA-ACT濃度在5~40 ng/mL范圍內線性關系良好(R2=0.9943),檢出限為0.53 ng/mL,批內相對標準偏差(RSD)為4.6%~6.6%,批間RSD為5.7%~8.0%,回收率為95.4%~104.2%,與游離前列腺特異性抗原F-PSA的交叉反應率為0.6%。本方法簡單、穩定、靈敏、快速,為開發檢測PSA-ACT的CLEIA試劑盒奠定了基礎。

關鍵詞 前列腺特異抗原; 前列腺癌; 化學發光酶免疫分析; 辣根過氧化物酶

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