呋喃它酮代謝物時間分辨熒光免疫分析法的建立與應用

鄧麗華 戴盡波 徐振林 楊金易 王弘 肖治理 雷紅濤 孫遠明 沈玉棟

摘 要 建立了Eu3+標記的間接競爭時間分辨熒光免疫分析法 （Indirect competitive time-resolved fluoroimmunoassay ， ic-TRFIA） 用于魚肉樣品中呋喃它酮代謝物AMOZ的檢測。通過單因素實驗考察了包被抗原濃度、抗體稀釋倍數、競爭反應時間等參數對方法靈敏度的影響。結果表明，ic-TRFIA的最佳反應條件為：包被抗原濃度為0.25 μg/mL，抗體稀釋5×104倍，最佳競爭時間為50 min。在優化的條件下，方法的檢出限（LOD， IC10）為0.01 ng/mL，半抑制濃度（IC50）為0.26 ng/mL，線性范圍（IC20～IC80）為0.025～2.83 ng/mL，對魚樣中AMOZ回收率在78.0%～86.0%之間，各樣品變異系數均小于15%，與HPLC-MS/MS對比檢測結果顯示相關性良好。本方法靈敏度高、特異性好，能夠滿足實際樣品的檢測需求。

關鍵詞 呋喃它酮代謝物AMOZ；時間分辨熒光免疫分析；銪標二抗