盧朝亮(山東省淄博市高青縣食品藥品監督管理局,山東 淄博 256300)
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白靈菇液體菌種的制備應用試驗
盧朝亮
(山東省淄博市高青縣食品藥品監督管理局,山東 淄博 256300)
關鍵詞白靈菇;液體菌種;麥粒菌種;菌絲長勢
白靈菇(Pleurotus nebrodensis)又名白靈側耳,子實體潔白,肉質細膩,口感脆滑,菌肉肥厚,有很高的營養價值及藥用價值,其產品在國內外食用菌高端市場供不應求。由于白靈菇的人工栽培歷史較短,且發菌、制種周期較長,生物轉化率低,滿足不了市場的需求,而采用液體菌種發酵技術制種,有明顯的優越性。
液體菌種具有生產時間短,接種方便,接種后菌絲萌發快,生長迅速的特點。為充分發揮液體菌種的優勢,需要找出白靈菇液體菌種的最佳培養時間(菌齡),避免因培養時間過短,菌絲生物量過少,或培養時間過長,菌絲體老化、自溶等。筆者對此進行試驗,結果如下。
1.1試驗材料
白靈菇菌種由山東梁山正大食用菌研究所提供,斜面母種在冰箱中4 ℃下保藏。
母種培養基配方為葡萄糖2.0%,土豆15.0%,麥麩5.0%,瓊脂2.0%。將土豆切片和麥麩共煮20 min,四層紗布過濾,棄去濾渣,葡萄糖、瓊脂溶入濾液,加水至預定體積,pH值自然,0.1 MPa,121 ℃滅菌20 min。
液體培養基配方為豆餅粉1.0%,玉米粉2.0%,葡萄糖2.0%,酵母膏0.2%,KH2PO40.1%, MgSO40.1%,pH自然,0.1 MPa,121 ℃滅菌20 min。
麥粒培養基配方為麥粒99%,石灰粉1%,另加石膏粉1%,KH2PO40.1%,MgSO40.1%。用清水淘洗小麥粒2次,去除雜質,用1%的溫石灰水浸泡12 h以上,煮沸后文火保持30 min,以麥粒煮透無白心不破皮為度,將煮好的麥粒瀝水撈出,晾至麥粒表皮無水漬為止。按照配方將各種原輔料拌勻,將配好的料裝入500 mL輸液瓶,裝至瓶肩處,清潔瓶口、瓶身,塞好棉塞,棉塞松緊適度。0.15 MPa、121 ℃保持2 h。
1.2試驗方法
(1)母種的制 備。將白靈菇菌種活化后接至試管母種培養基,置于恒溫箱中24 ℃培養至菌絲滿管,置冰箱中4 ℃保藏備用。
(2)白靈菇菌絲體一級搖瓶菌種接種及培養。250 mL三角瓶(搖瓶)裝液量為100 mL,每個搖瓶接種活化過夜的白靈菇母種2塊,每塊為1 cm2,搖床轉速為150 r/min,培養溫度25 ℃,采用不同培養時間的液體菌種接種麥粒培養基(表1),通過菌絲長速得出最佳培養時間。
(3)二級搖瓶菌種接種培養。500 mL三角瓶裝液量200 mL,每個搖瓶接種一級搖瓶菌種10 mL,搖床轉速為150 r/min,培養溫度24 ℃,采用不同培養時間的液體菌種接種麥粒培養基(表1),通過菌絲長速得出最佳培養時間。
(4)不同培養基菌種接種培養。母種接麥粒培養基,每瓶接1 cm2大小的母種塊2塊,接10瓶;液體菌種接麥粒培養基,每瓶接10 mL,接20瓶;麥粒種接麥粒培養基,每瓶接10粒左右,接10瓶。接種后,在25 ℃、相對黑暗的條件下培養,觀察菌絲萌發、菌絲覆蓋料面、瓶底出現菌絲、滿瓶等的時間,比較不同類型的菌種在麥粒培養基上的生長表現。
2.1一級液體菌種的適宜菌齡
將不同培養時間的白靈菇一級液體菌種接入麥粒培養基的試驗結果表明(表1),一級液體菌種最佳菌齡為96 h,菌絲生長快、活力強,滿瓶時間為8天,優勢明顯。2.2二級液體菌種的適宜菌齡

表1 白靈菇不同菌齡的一級和二級液體菌種接種后的菌絲長速
將培養時間不同的白靈菇二級液體菌種接入麥粒培養基中,結果如表1所示,二級液體菌種的最佳菌齡為72 h,接種后發菌速度最快,滿瓶所需的時間最短。2.3不同類型菌種接種后的菌絲長勢
麥粒培養基含有適宜白靈菇菌絲生長所需的營養物質,接種后萌發的菌絲粗壯,吃料快,適應能力強,菌絲發滿后用作生產栽培種非常適宜,且主要原料麥粒來源廣,價格低。
白靈菇液體菌種接種到麥粒培養基上分散度好,菌絲萌發點多,具有立體發菌優勢,發菌時間遠快于麥粒菌種及母種(表2);而麥粒種菌絲粗白濃密,長勢好,主要原因可能是麥粒菌種是固體菌種,麥粒內營養豐富,以麥粒菌種接種麥粒培養基,菌絲不需要適應新培養基。

表2 不同類型菌種接種于麥粒培養基上的長勢
試驗對比發現,不同種齡的液體菌種發菌速度存在很大的差異,其中以培養96 h的一級液體菌種和培養72 h的二級液體菌種接種于麥粒培養基后發菌速度快,相較于母種、麥粒種接種麥粒培養基,液體菌種可大大縮短發菌時間,在白靈菇的生產栽培種具有應用優勢。
參考文獻
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作者簡介:盧朝亮,男,工程師,碩士,畢業于河北大學食藥用真菌研究所,長期從事食用菌菌種推廣與研發工作
中圖分類號:S646
文獻標識碼:B
文章編號:2095-0934(2016)02-098-02