喻正軍,李增強(.湖南新南方養殖服務有限公司,湖南 長沙 4000;2.湖南中岸生物藥業有限公司,湖南 長沙 4000)
臍帶血檢測技術在產房仔豬腹瀉防控中的應用
喻正軍1,2,李增強1(1.湖南新南方養殖服務有限公司,湖南 長沙 410100;2.湖南中岸生物藥業有限公司,湖南 長沙 410100)
從2010年以來,產房仔豬腹瀉問題一直困擾著廣大養豬人,且在疾病問題中產房仔豬腹瀉這幾年來一直排在第一位,不論在舉辦的大小養豬培訓和會議,大家談論最多的話題都是產房仔豬腹瀉問題,筆者一直在臨床一線,親眼目睹了產房腹瀉給豬場造成的危害,甚至是毀滅性的打擊。我們將面臨如何做到產房仔豬腹瀉的預警、診斷和防控呢?將是擺在養豬人面前巨大的課題,而本文將探討臍帶血檢測技術在產房仔豬腹瀉疾病的診斷、防控中如何應用和發揮作用。
1.1 豬胎盤的生理結構
豬胎盤屬于非蛻膜彌散型上皮絨毛膜胎盤,絨毛膜血管內皮、絨毛膜間充質、絨毛膜上皮(滋養層)、子宮內膜上皮、子宮內膜結締組織和母體血管內皮6層組織共同形成胎盤屏障,其阻止大部分微生物和毒物等從母體進入胎兒,同時也是維系母胎間物質轉運、氣體交換與血液循環的唯一部位。
1.2 豬胎盤的功能
1)胎盤屏障不影響母和子血的物質和氣體交換,氨基酸、氧、二氧化碳、礦物質、水、糖和水溶性維生素(B族和C),某些藥物可以通過胎盤。
2)在胎盤形成后,未分解的蛋白質、脂肪和脂溶性維生素(A、D和E)不能通過胎盤。
3)細菌一般不能通過絨毛進入胎兒血中,但某些病原體(結核)在胎盤中引起病變而破壞了絨毛,則可以進入胎兒血液;大多數病毒可以通過胎盤進入胎體。
臍帶血是指胎兒娩出、臍帶結扎并離斷后殘留在胎盤和臍帶中的血液。根據豬胎盤的生理結構和功能,通過檢測臍帶血中腹瀉相關病原(豬瘟病毒、偽狂犬病毒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒、圓環病毒、流行性腹瀉病毒、傳染性胃腸炎病毒和輪狀病毒等)和毒素等,全面系統分析母豬的免疫、感染和健康狀況及母豬的排毒情況,同時通過臍帶血檢測腹瀉相關病原和毒素,可以進一步評估仔豬腹瀉相關病原的感染狀況,免疫狀況和仔豬肝臟的損傷等,進而確定產房仔豬腹瀉發生的主要因素,豬場目前存在的漏洞等。
產房仔豬腹瀉問題是很復雜的問題,疾病的診斷僅靠實驗室檢測手段還是不夠的,開展產房仔豬腹瀉精準的預警、診斷和防控,還需進一步了解本場的豬臨床中癥狀,硬件設施,現場管理和本地區疫情的流行情況等方面,才可以更加精準地做到產房仔豬腹瀉的預警、診斷和防控。
3.1 具體案例的分析
從2010年,臍帶血檢測技術在產房仔豬腹瀉診斷、防控中應用至今,已成功幫助全國各地300多家規模化豬場做好產房腹瀉的防控,取得非常好的效果。如在2016年3月份,北方某1 000頭母豬場,送檢6份臍帶血,該場當時在發生產房仔豬腹瀉,主要檢測項目:腹瀉相關病毒、內毒素等,檢測腹瀉相關病毒方法為PCR和RT-PCR,內毒素采用鱟試劑方法檢測,具體操作省略,檢測結果如下表1。
從臍帶血檢測到豬藍耳病病毒(PRRSV)、偽狂犬病毒(PRV)、流行性腹瀉病毒(PEDV)、傳染性胃炎病毒(TGEV)和豬瘟病毒(HCV),未檢測到其他病毒,其中偽狂犬病毒、傳染性胃腸炎病毒陽性率高,其次流行性腹瀉病毒和豬藍耳病病毒,豬瘟病毒,存在2種以上病毒混合感染,表明母豬健康水平差,也進一步表明母豬群豬瘟、偽狂犬等基礎疫苗免疫效果不是很理想,不能有效阻斷感染和保護母豬,母豬部分存在豬瘟、偽狂犬等帶毒排毒現象,同時進一步預示著仔豬在母豬體內即胚胎時期可能已感染以上病原,將會出現以下的情況:可能導致免疫耐受,仔豬出生1~5日齡發生腹瀉等。

表1 北方某1 000頭母豬豬場臍帶血腹瀉相關病原和內毒素檢測結果
另外,在臍帶血中檢測到內毒素,其陽性率為83.34%(5/6),進一步表明部分母豬可能存在代謝機能方面的障礙,進而導致內毒素經胎盤屏障進入仔豬體內,損傷仔豬肝臟及其他器官等,協同突破胎盤屏障的病原加劇對仔豬各個器官的損傷,且內毒素可以引起仔豬腸道通透性增加而引發腹瀉,需要高度重視。
總之,根據臍帶血檢測結果和臨床癥狀,結合疾病的流行規律,該場腹瀉發生的因素是豬瘟、偽狂犬和內毒素,流行性腹瀉病毒和傳染性胃腸炎病毒,解決該場腹瀉問題,首先解決好母豬的豬瘟、偽狂犬和內毒素的影響,其次做好腹瀉疫苗的接種,環境干粉消毒等管理,方案實施后7 d后,產房仔豬腹瀉停止。
3.2 腹瀉防控理論的總結
經反復多次臨床實戰,總結形成產房仔豬腹瀉防控的思路重點是:母豬的的防控是根本,根據臍帶血檢測結果進一步說明了這點,母豬中重點解決豬瘟、偽狂犬等基礎免疫的問題,其次腹瀉的防控,建議選擇流行毒株接種,重視內毒素的防控,加強母豬的保肝護腎等;第三仔豬防控是治標,降低和減少仔豬的損失;最后,加上定期臍帶血的檢測評估,及時發現豬場中存在的漏洞和不足,優化免疫和保健等措施。
3.3 臨床檢測中的應用

圖1 2015年9月-2016年3月份臨床腹瀉豬場524份臍帶血檢測統計結果
2015年9月-2016年3月份采集臨床腹瀉豬場的524份臍帶血,檢測方法為PCR和RT-PCR,具體檢測結果如下圖1。
從臨床腹瀉豬場的臍帶血檢測數據來看,主要危害的病原為豬藍耳病病毒、偽狂犬病毒、豬圓環病毒和流行性腹瀉病毒等,統計發現大部分存在2種或2種以上病原混合感染現象,表明大部分母豬的健康水平比較的差,大量母豬表現為眼屎比較多、淚斑等臨床癥狀,主要疫苗防控效果不理想,故導致仔豬腹瀉的發生,進一步說明母豬防控是仔豬腹瀉防控的關鍵,值得引起廣大養豬朋友的重視和關注。
3.4 具體在臨床的應用及其效果
臍帶血檢測技術是對傳統實驗室檢測方法的有效補充,該技術具有采樣簡單、無應激、不影響生產等優點。可以同時評估母豬的免疫水平,健康狀況和仔豬的感染狀況,精準確定疾病發生的因素,為產房仔豬腹瀉的防控提供科學可靠的依據。為克服普通PCR的污染,無法定量等不足,新南方研發和服務團隊開發定量、更精準和簡單的熒光PCR檢測技術,將精準預測病毒含量與疾病的關系,結合臍帶生理結構和天然的優勢,將更加精準地開展疾病預警和防控。總之,臍帶血檢測技術將會在規模化豬場的疾病預警、診斷和防控中發揮巨大的作用。
新南方服務團隊,在國內國外首創臍帶血檢測技術,根據臍帶血檢測技術臨床實戰中不斷總結和研究,率先提出母仔一體化、母仔同防、母仔同治等理論,并應用該理論指導實際疾病防控,并積極將其應用在臨床實戰中。到目前為止,從2010年以來,新南方服務團隊已成功應用臍帶血檢測技術,服務全國500頭以上能繁母豬的規模化豬場有2 000多家,其中的300多家成功解決了產房仔豬腹瀉問題,為社會挽回巨大的經濟的損失。
《豬業科學》第7期有獎閱讀
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一、選擇題
1. 根據初乳中蛋白質、乳糖、乳脂等基本成分的變化,定義母豬在分娩和分娩后( )之內分泌的奶水為初乳。
A 7 d B 14 d C 3 d
2. 蓋他病(Getah,GET)是由披膜病毒科甲病毒屬的蓋他病毒(Getah virus,GETV)引起的主要侵害( )的一種蟲媒傳染病。
A 牛和豬 B 豬和馬 C豬和人
3.高通量測序技術可以實現一次對( )DNA分子進行序列測定;覆蓋面廣,能檢測樣品中全部遺傳信息;準確性高,其準確率可高達99.99%。
A 幾百條到幾千條 B 幾十萬到幾百萬條C 幾千條到幾萬條
二、填空
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2016-07-06)