(信陽市動物疫病預防控制中心,河南 信陽 464000)
中藥治療豬弓形蟲病效果研究
馬超鋒*
(信陽市動物疫病預防控制中心,河南 信陽 464000)
弓形蟲病(toxoplasmosis)又稱弓形體病,是由剛地弓形蟲(toxoplasma gondii)在人和動物體內寄生而引起的人獸共患原蟲病。豬弓形蟲病會導致母豬流產、弱胎、死胎,患病仔豬高熱、呼吸困難、消瘦及便秘等;而弓形蟲與其他疾病混合感染暴發性流行時會造成育肥豬大量死亡,還會引起不同程度的繁殖障礙性疾病,給養豬業造成巨大經濟損失。
弓形蟲屬于細胞內寄生的血液原蟲,畜禽一旦感染,雖然可通過藥物治療消除癥狀,但是畜禽機體將會一直帶蟲,在應激或亞健康狀況下都會發病。弓形蟲病的根本防治手段是研制行之有效、使用方便的疫苗,現階段還沒有較完善的商品化弓形蟲疫苗可供使用,主要采取常規措施預防弓形蟲病的發生。目前,防治畜禽弓形蟲病主要采用磺胺類藥物,具有使用方便、吸收迅速、見效快等優點。但是也存在問題,一是其對豬體自身危害方面,長期使用磺胺類藥物可能增加毒副作用和耐藥性,量大還易形成結晶造成腎臟的急性損傷;二是公共衛生方面,養殖戶使用磺胺類未按要求執行休藥期,以使藥物殘留畜禽體內危害人類健康。而利用中草藥進行防治研究較多的如黃芪、青蒿類等,通過干擾蟲體核酸代謝、破壞蟲體膜系統和超微結構、誘導蟲體細胞凋亡、影響Ca2+跨膜轉運及免疫調節等而發揮作用,但現階段國內還沒有效果良好的防治畜禽弓形蟲病的中草藥配方。本研究將采用不同中藥配方對豬弓形蟲病發病豬進行治療試驗,以篩選出效果較好中藥防治豬弓形蟲病。
1.1 材料
1.1.1 試驗豬
信陽市某豬場同一棟舍88頭60日齡三元雜交豬,外觀健康,豬弓形蟲病抗體檢測結果陰性。
1.1.2 檢測試劑盒及主要儀器設備
1.1.2.1 檢測試劑 豬弓形蟲IgG抗體檢測試劑盒,購自洛陽萊普生信息有限公司;豬弓形蟲PCR檢測試劑盒,信陽師范學院生命科學學院提供;弓形蟲陽性分離株,信陽市動物疫病預防控制中心分離保存。
1.1.2.2 主要儀器 TDZ-WS臺式低速離心機(長沙湘儀離心機儀器有限公司),10~100μL多道移液器(德國Eppendorf公司),DHP-500避光培養箱(常州市凱航儀器有限公司),Thermo洗板機888型(美國Thermo公司),Thermo全自動定量繪圖酶標儀MFC型(美國Thermo公司),PCR儀(德國Biometra)、凝膠成像系統(以色列 DNR MiniBIS Pro)。
1.2 方法
1.2.1 中藥治療方案
對豬群采用3個中藥配方防治弓形蟲感染:A方,黃花蒿、柴胡;B方,常山、檳榔、柴胡、麻黃、 甘草、桔梗;C方,大黃、丹皮、梔子、連翹、蒲公英、天花粉、金銀花、甘草;各個配方均拌料飼喂5 d。
1.2.2 中藥防治豬弓形蟲病試驗方案
1.2.2.1 試驗豬分組 將試驗豬隨機分成11組,每組8頭。分組情況及試驗方案見表1,試驗期間,豬舍溫度保持在20~28 ℃。
1.2.2.2 試驗豬觀察 對豬群連續觀察30 d,每天上午8點、下午4點各測量記錄體溫1次,取8頭豬體溫平均值為當天各組體溫,上午體溫在40 ℃以上,下午體溫在40.5 ℃以上,視為體溫升高;觀察體溫升高的天數,出現典型弓形蟲臨床癥狀的豬只數量和維持時間,臨床癥狀、死亡頭數、時間;剖檢死亡豬只,采樣并觀察病理變化;比較增重情況(試驗開始前和結束時稱重)。
1.2.2.3 試驗豬弓形蟲病抗體檢測和病原學檢測 試驗開始前(0 d)和開始后7 d、14 d、21 d、28 d、35 d對各組存活豬進行抗體檢測,試驗豬只死亡時,采集病料進行病原學檢測。
1.2.3 中藥治療豬弓形蟲病臨床應用試驗
采用篩選出的療效較好的中藥配方對豬從保育轉育肥時,較易發生豬弓形蟲病的豬場在轉入育肥舍前后連續使用5 d,評價其應用效果。

表1 試驗分組及方案

表2 試驗豬只各項指標
2.1 各組豬只體溫變化情況
第2、6、7、8組均在攻蟲后3~4 d出現體溫升高癥狀,第1、3、4、5組在攻蟲后6 d體溫開始升高,第9、10、11組在11 d出現體溫升高癥狀;陽性對照組發燒維持時間最長,為16 d,第9、10、11組發燒時間最短,具體情況見表2。
2.2 各組豬只弓形蟲病典型癥狀出現及維持時間
各試驗組豬只均出現明顯臨床癥狀(發燒、呼吸困難、便秘等)時間,陽性對照組持續時間最長,為8 d,8頭均出現癥狀;第9、10、11組出現典型癥狀時間最短,為2~3 d,發病率為25%~37.5%;具體情況見表2。
2.3 各組豬只死亡率
陽性對照死亡率最高,為62.5%;其次為空白對照組的37.5%;第3、4、5、9、10、11組無豬只死亡。
2.4 各組豬只弓形蟲病抗體和病原學檢測結果
在試驗第0、7、14、21、28、35 d對各組豬只分別采取血樣,應用ELISA方法檢測抗體;血清中抗體陽性維持天數見表2,第1、第2組由于未采用中藥治療,抗體持續35 d以上,第3、6、7、8組試驗豬血清中抗體均持續21 d以上,第4、5、9、10、11組抗體持續14 d,先用藥再攻蟲組血清中抗體持續天數顯著少于其他組,第10、11組血清中抗體持續天數少于其他組;這說明在豬群發病之前采用B、C方對豬群保健,對弓形蟲有較好的防控效果。對病死豬只采取組織樣品,用PCR方法檢測,結果顯示均為弓形蟲陽性。
2.5 中藥臨床應用效果評價
對在轉群時較易感染豬弓形蟲病豬場應用B、C配方中藥制劑拌料飼喂,豬弓形蟲病的發病率和病死率分別由50%和40%下降到10%和20%以下,可有效防控豬弓形蟲的發生,為養殖戶挽回經濟損失數百萬元。
豬弓形蟲病的臨床癥狀與豬瘟、豬藍耳病、豬鏈球菌病某些癥狀相似,并且混合感染,給診斷帶來困難,影響豬場防治方案的制定,本項目組建立了敏感、快速、特異的弓形蟲病PCR檢測方法,可以準確的診斷該病。本試驗中,研制的3個中藥配方對豬弓形蟲病都有較好的防治效果,能減少化學藥物使用造成的殘留和副作用,在豬群發病之前應用中藥全群保健預防,可以顯著降低豬群的發病率、死亡率和病程;B方和C方在減少豬群癥狀和縮短病程方面又優于A方,C方效果最優。本試驗研制的中藥配方經臨床試驗表明早期預防效果優于發病后治療效果,可顯著減輕發病癥狀,對臨床上危害養豬業的豬弓形蟲病的防治具有重要意義,可以大范圍推廣應用。
2016-06-27)
2014年信陽市科技攻關項目(140054)-信陽地區豬弓形蟲病感染情況調查及綜合防控技術研究與應用
馬超鋒(1981-),男,漢,河南禹州人,高級獸醫師,碩士,主要從事動物疫病防治,E-mail:machaofeng5@163.com。