基于1H-NMR技術(shù)探討艾灸與針刺對(duì)血清代謝物的調(diào)節(jié)作用＊

鐘 歡，佘 暢，咼安林，汪厚蓮，葛君蕓，劉 密，劉邁蘭，吳璐一，常小榮＊＊，吳煥淦＊＊

（1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)針灸推拿學(xué)院 長(zhǎng)沙 410007；2.上海中醫(yī)藥大學(xué)上海市針灸經(jīng)絡(luò)研究所 上海 200030）

基于1H-NMR技術(shù)探討艾灸與針刺對(duì)血清代謝物的調(diào)節(jié)作用＊

鐘 歡1，佘 暢1，咼安林1，汪厚蓮1，葛君蕓1，劉 密1，劉邁蘭1，吳璐一2，常小榮1＊＊，吳煥淦2＊＊

（1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)針灸推拿學(xué)院 長(zhǎng)沙 410007；2.上海中醫(yī)藥大學(xué)上海市針灸經(jīng)絡(luò)研究所 上海 200030）

目的：基于核磁共振氫譜代謝組學(xué)技術(shù)（1H-NMR）探討艾灸與針刺對(duì)健康青年志愿者血清代謝物調(diào)節(jié)作用的差異性，從代謝物層面揭示兩者的作用特點(diǎn)及差異。方法：將60例健康青年男性志愿者隨機(jī)分為艾灸組與針刺組，每組各30例，艾灸組采用溫和灸作用于右側(cè)足三里穴，每天1次，每次15 min，連續(xù)干預(yù)10天；針刺組采用不銹鋼針針刺右側(cè)足三里穴，每天1次，每次15 min，連續(xù)干預(yù)10天。兩組在干預(yù)0、5、10天清晨采集受試者血清，利用1H-NMR技術(shù)對(duì)血清代謝物進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果：干預(yù)0、5天時(shí)艾灸組與針刺組的代謝模式無(wú)顯著性差異；干預(yù)10天時(shí)艾灸組與針刺組的代謝模式可顯著區(qū)分；艾灸與針刺干預(yù)5天后血清中表現(xiàn)出差異的代謝物有Creatine和Glycine（P＜0.05；P＜0.01）；干預(yù)10天后血清中表現(xiàn)出差異的代謝物有LDL/VLDL、Valine、Isoleucine、Leucine、Lactate、Glutamine、Creatine、Glucose（P＜0.01）和Glycine（P＜0.05）；隨著干預(yù)時(shí)間的變化，艾灸與針刺對(duì)血清代謝物的調(diào)節(jié)作用有差異。結(jié)論：艾灸與針刺右側(cè)足三里對(duì)血清代謝物有明顯的調(diào)節(jié)作用，隨著干預(yù)時(shí)間的變化，兩者的調(diào)節(jié)作用發(fā)生變化。

艾灸 針刺 代謝組學(xué) 差異

針灸是“針刺”和“艾灸”的合稱，兩者是中醫(yī)針灸學(xué)科中兩種不同的治療方法[1]。艾灸是借助灸火的熱力對(duì)人體的特定穴位進(jìn)行刺激，以達(dá)到治病、防病目的，該方法具有溫通經(jīng)絡(luò)、行氣活血、祛濕逐寒、消腫散結(jié)、回陽(yáng)救逆及防病保健的作用[2]。針刺是利用金屬制成的針具，通過(guò)一定的手法，刺入人體特定穴位，從而調(diào)節(jié)機(jī)體的方法，具有調(diào)和陰陽(yáng)、扶正祛邪、疏通經(jīng)絡(luò)、行氣活血等作用[3]。“針”、“灸”同屬于中醫(yī)外治療法，雖然兩者有著相同的經(jīng)絡(luò)腧穴理論基礎(chǔ)，卻有著各自的臨床適應(yīng)癥。揭示兩者作用機(jī)制的差異，為臨床特異性選擇治療手段提供科學(xué)依據(jù)，是針灸學(xué)科中亟待解決的科學(xué)問(wèn)題。目前，相關(guān)研究從神經(jīng)、免疫等方面探討了兩者之間的差異，多從細(xì)胞、炎性因子、關(guān)鍵蛋白表達(dá)等方面進(jìn)行[4-6]，且學(xué)者多認(rèn)為艾灸在調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)病癥方面要優(yōu)于針刺，而針刺在神經(jīng)系統(tǒng)病癥或疼痛類疾病方面療效優(yōu)于艾灸。然而，對(duì)兩者差異進(jìn)行系統(tǒng)研究的報(bào)道較少。代謝組學(xué)技術(shù)是系統(tǒng)生物學(xué)的研究方法，具有動(dòng)態(tài)性、完全性、整體性的特點(diǎn)，與針灸作用于人體的特點(diǎn)十分吻合，代謝組學(xué)能靈敏的反映體內(nèi)小分子代謝物的變化，從代謝物層面系統(tǒng)地揭示刺激對(duì)生物體代謝的影響。因此，本研究采用1H-NMR代謝組學(xué)技術(shù)從代謝物角度探討了艾灸與針刺對(duì)人體血清代謝物的差異性調(diào)節(jié)作用，從代謝物層面揭示了兩者的作用特點(diǎn)及差異。

1 方法

1.1 基礎(chǔ)資料

本研究中的60例男性志愿者均來(lái)自湖南中醫(yī)藥大學(xué)，利用隨機(jī)數(shù)字表隨機(jī)分到艾灸組或針刺組，干預(yù)過(guò)程中脫落8例，其中艾灸組2例、針刺組6例。

1.2 針刺、艾灸方法

試驗(yàn)過(guò)程中囑咐志愿者避免劇烈運(yùn)動(dòng)，艾灸組連續(xù)10天于同一時(shí)間段（18:00-19:00）對(duì)志愿者右側(cè)足三里穴（ST36）進(jìn)行艾灸，艾灸由課題組中經(jīng)培訓(xùn)的專業(yè)人員操作，艾灸時(shí)距離皮膚2-3 cm，以志愿者有感覺（熱、酸、麻、脹、痛）且能耐受為度；針刺組連續(xù)10天于同一時(shí)間段（18:00-19:00）對(duì)志愿者右側(cè)足三里穴（ST36）進(jìn)行針刺，針刺由本課題組經(jīng)過(guò)專業(yè)培訓(xùn)的人員進(jìn)行操作，針刺時(shí)快速刺入皮膚30 mm左右，行捻轉(zhuǎn)、提插手法15 s，以志愿者有感覺（酸、麻、脹、痛）且能耐受為度；艾灸組與針刺組操作空間為兩個(gè)相鄰的獨(dú)立房間。

1.3 樣品收集

采血前一天21:00至取樣前禁止飲食，采血前24 h禁食咖啡、巧克力和茶等含有咖啡因的飲料或食物，兩組志愿者均于試驗(yàn)開始的0、5、10天的同一時(shí)間段（07:00-08:00）在校醫(yī)院由專業(yè)護(hù)士采血，試管為無(wú)任何添加劑的干燥管，常溫凝集后置于低溫離心機(jī)中以3 000 r·min-1離心10 min，控制采血至離心時(shí)間為2 h以內(nèi)，離心后移液槍取上層血清，-80℃保存待測(cè)。

1.4 樣品預(yù)處理

將保存于-80℃的血清樣品解凍后離心（10 000 rpm，4℃，10 min）。選取無(wú)溶血的待測(cè)樣品，取300 μL血清，加入200 μL由D2O制備的PBS（0.6 mol·L-1K2HPO4和NaH2PO4），離心后加入5 mm的核磁管。

1.5 核磁共振譜的采集及數(shù)據(jù)處理

血清核磁共振一維氫譜由Bruker AV600 Ⅲ核磁共振譜儀采集。一維CPMG譜采用的脈沖序列為cpmgpr1d [RD-90°-（τ-180°-τ）n-acq]（ Bruker Biospin pulse program library），過(guò)濾掉大分子和其他限制分子運(yùn)動(dòng)的信號(hào)。自旋回波中的τ設(shè)為500 μs，循環(huán)次數(shù)n設(shè)為20，因此總自旋回波時(shí)間為20 ms，為消除來(lái)自蛋白質(zhì)等大分子量物質(zhì)的寬包信號(hào)，在弛豫等待時(shí)間（RD）內(nèi)進(jìn)行預(yù)飽和水峰壓制。譜圖的采樣數(shù)據(jù)點(diǎn)（TD）為64 K，譜寬（SW）為20 ppm，累加次數(shù)（NS）為128次，空采次數(shù)（DS）為16次。

用MestReNova 6.1軟件對(duì)NMR譜進(jìn)行基線和相位校正，譜峰對(duì)齊，定標(biāo)，以0.002 ppm對(duì)0.2-9.5 ppm區(qū)域進(jìn)行分段積分，剔除因壓制水峰而畸變的區(qū)域。將化學(xué)位移δ4.52-6.00處的積分設(shè)為0，對(duì)剩余積分值進(jìn)行歸一化處理。用NMR Suite軟件結(jié)合已發(fā)表的化合物化學(xué)位移數(shù)據(jù)，指認(rèn)代謝物的共振信號(hào)。

NMR譜分段積分后用SIMCA軟件處理，先進(jìn)行非監(jiān)督的PCA分析，確認(rèn)樣品的分類情況，去除極端點(diǎn)，識(shí)別代謝模式變化趨勢(shì)；然后對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行偏最小二乘判別分析（PLS-DA）及其模型驗(yàn)證，證明分類的正確性；再運(yùn)用有監(jiān)督的OPLS-DA方法對(duì)模型進(jìn)行正交矯正處理，最大化地凸顯模型內(nèi)部不同組別的差異，尋找對(duì)區(qū)分代謝模式有顯著貢獻(xiàn)的重要代謝物。在PLS-DA分析中使用7倍交叉驗(yàn)證方法，采用200次循環(huán)的排列實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證所建立的判別模型的魯棒性（Robustness），并通過(guò)分析相關(guān)系數(shù)和結(jié)合變量權(quán)重重要性排序值，對(duì)有統(tǒng)計(jì)意義的變量（Bin）進(jìn)行歸納，找出存在顯著差異的特異性代謝物。

1.6 統(tǒng)計(jì)方法

采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)和單因素方差分析（ANOVA）檢驗(yàn)組間代謝物濃度的差異。用各組樣品代謝物的積分值計(jì)算代謝物的相對(duì)濃度，數(shù)據(jù)用表示。P＜0.05被認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 艾灸與針刺對(duì)血清代謝模式的影響

艾灸與針刺干預(yù)10天后兩組志愿者血清代謝模式有顯著差異，通過(guò)主成分分析方法對(duì)艾灸組與針刺組干預(yù)前兩組血清代謝模式進(jìn)行分析，結(jié)果（見圖1）顯示干預(yù)前兩者血清代謝模式不能區(qū)分，說(shuō)明干預(yù)前兩者血清代謝模式一致。艾灸、針刺干預(yù)5天后血清代謝模式同樣不可區(qū)分，結(jié)果（見圖2）說(shuō)明艾灸與針刺5天時(shí)兩者血清代謝模式一致，艾灸與針刺對(duì)血清代謝模式的影響沒(méi)有顯著差異。而艾灸、針刺10天后兩者血清代謝模式可顯著區(qū)分，結(jié)果（見圖3）說(shuō)明艾灸、針刺干預(yù)10天對(duì)兩者血清代謝模式的影響較大，兩者有顯著差異，進(jìn)一步通過(guò)OPLS-DA對(duì)PLS-DA模型進(jìn)行矯正處理，最大化地突顯兩者代謝模式的差異后得出差異性代謝物譜圖，圖3。

圖1 艾灸與針刺干預(yù)前兩者血清代謝模式圖

2.2 艾灸與針刺后血清代謝物濃度的變化

艾灸與針刺對(duì)血清代謝物濃度的影響有較大的差異，兩者對(duì)志愿者干預(yù)5天后表現(xiàn)出差異的代謝物有Creatine和Glycine（P＜0.05；P＜0.01）。干預(yù)10天后血清中表現(xiàn)出差異的代謝物有低密度脂蛋白/極低密度脂蛋白（LDL/VLDL）、纈氨酸Valine、異亮氨酸Isoleucine、亮氨酸Leucine、乳酸Lactate、谷氨酸Glutamine、肌氨酸Creatine、葡萄糖Glucose（P＜0.01）和甘氨酸Glycine（P＜0.05），不同時(shí)間的艾灸與針刺干預(yù)后血清中代謝物濃度見表1。

2.3 艾灸與針刺后血清代謝物濃度的變化趨勢(shì)

艾灸與針刺過(guò)程中血清差異性代謝物濃度隨干預(yù)時(shí)間長(zhǎng)短的變化較大，艾灸在干預(yù)過(guò)程中5天時(shí)上調(diào)且10天時(shí)下調(diào)的代謝物有Creatine、Glycine、Glucose、Valine、Glutamine、Leucine、Isoleucine；5天時(shí)下調(diào)且10天時(shí)上調(diào)的代謝物有LDL/VLDL、Lactate。針刺過(guò)程中5天時(shí)上調(diào)且10天時(shí)下調(diào)的代謝物有LDL/VLDL；5天時(shí)下調(diào)且10天時(shí)上調(diào)的代謝物有Creatine；5天時(shí)下調(diào)且10天時(shí)也下調(diào)的代謝物有Glycine、Lactate；5天時(shí)上調(diào)且10天時(shí)也上調(diào)的代謝物有Glucose、Valine、Glutamine、Leucine、Isoleucine。總體來(lái)說(shuō)，艾灸與針刺右側(cè)足三里對(duì)代謝物濃度的調(diào)節(jié)作用在5天與10天時(shí)調(diào)節(jié)趨勢(shì)不同，但艾灸10天時(shí)較針刺表現(xiàn)出更強(qiáng)的調(diào)節(jié)作用。另外，值得說(shuō)明的是針刺對(duì)Lactate的調(diào)節(jié)作用在5天與10天時(shí)沒(méi)有出現(xiàn)調(diào)節(jié)趨勢(shì)不同而呈現(xiàn)一致變化趨勢(shì)。

圖2 艾灸與針刺干預(yù)5天后兩者血清代謝模式圖

艾灸與針刺對(duì)代謝物濃度調(diào)節(jié)作用的差異表現(xiàn)在對(duì)LDL/VLDL、Creatine、Glycine三者濃度變化的調(diào)節(jié)作用相反，而對(duì)Glucose、Valine、Glutamine、Leucine、Isoleucine的調(diào)節(jié)作用一致，但10天時(shí)艾灸的調(diào)節(jié)作用更顯著。見圖4。

3 討論

代謝組學(xué)是系統(tǒng)生物學(xué)的一種研究方法，能在代謝物水平全面反映生物體在受外界刺激后的反應(yīng)[7]。代謝組學(xué)的優(yōu)勢(shì)是整體的反映代謝物的特征性變化，可用于復(fù)雜系統(tǒng)的研究[8]。代謝組學(xué)在動(dòng)態(tài)性、完全性、整體性的特點(diǎn)與針灸對(duì)人體的作用特點(diǎn)十分吻合。因此將代謝組學(xué)應(yīng)用于針灸的研究將有益于揭示針灸的作用機(jī)制[9]。有研究運(yùn)用代謝組學(xué)對(duì)針灸治療神經(jīng)退行性病變[10]、急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎[11]、功能性消化不良[12]等的機(jī)制做過(guò)探討，這些研究認(rèn)為針灸治療疾病可通過(guò)對(duì)代謝物的調(diào)節(jié)使機(jī)體的代謝模式向正常模式改善。因此，從代謝物的調(diào)節(jié)作用入手進(jìn)行研究，可為揭示艾灸與針刺的作用機(jī)制差異提供科學(xué)依據(jù)。

圖3 艾灸與針刺干預(yù)10天后兩者血清代謝模式圖及兩者差異性代謝物譜圖

表1 艾灸與針刺干預(yù)前后差異代謝物濃度

表1 艾灸與針刺干預(yù)前后差異代謝物濃度

注：與艾灸組同一時(shí)間點(diǎn)比較▲P＜0.05，與艾灸組同一時(shí)間點(diǎn)比較▲▲P＜0.01。

圖4 艾灸與針刺對(duì)血清代謝物濃度隨干預(yù)時(shí)間的影響，艾灸組與針刺組比較*P＜0.05，艾灸組與針刺組比較**P＜0.01。

本研究采用1H-NMR方法系統(tǒng)研究了艾灸與針刺對(duì)人體血清代謝物的調(diào)節(jié)作用，從結(jié)果中可看出干預(yù)5天時(shí)兩者血清中有差異的代謝物有2個(gè)但不足以引起兩者代謝模式的差異，干預(yù)10天后血清中代謝物濃度有顯著差異的有9個(gè)，且能顯著引起艾灸組與針刺組兩者的血清代謝模式差異。干預(yù)10天的差異性代謝物中，艾灸與針刺對(duì)代謝物的調(diào)節(jié)作用既表現(xiàn)出相同的調(diào)節(jié)作用也表現(xiàn)出相反的調(diào)節(jié)作用，在相同的調(diào)節(jié)作用中艾灸干預(yù)引起的代謝物變化與針刺也表現(xiàn)出差異，即艾灸能更大程度的引起代謝物濃度的變化。

差異性代謝物中LDL/VLDL的變化反映了艾灸與針刺對(duì)血清中脂質(zhì)代謝的調(diào)節(jié)作用[13]，而代謝物濃度在兩組中相反的變化趨勢(shì)表明：艾灸與針刺對(duì)脂質(zhì)代謝的調(diào)節(jié)作用相反。針刺10天時(shí)引起LDL/ VLDL的降低可能預(yù)示著針刺在降低高低密度脂蛋白血癥方面有優(yōu)勢(shì)，臨床研究也曾證實(shí)了針刺在治療高脂血癥時(shí)的療效[14]。艾灸與針刺對(duì) 肌酸的調(diào)節(jié)也呈現(xiàn)出相反的調(diào)節(jié)作用，干預(yù)10天后艾灸組肌酸濃度顯著降低而針刺組濃度顯著升高，以往研究顯示，肌酸主要存在于骨骼肌，既可以內(nèi)生也可外源性獲取，肌酸及其磷酸化形式被認(rèn)為是肌纖維能量代謝的關(guān)鍵中間體，外源性增加肌酸的攝入可有效的增加肌肉力量和耐力[15]，在沒(méi)有外源性供給的情況下血清中肌酸水平的下降可被認(rèn)為是動(dòng)員到骨骼肌纖維進(jìn)行能量代謝，這也可能預(yù)示著艾灸在增強(qiáng)肌肉能量代謝上有較明顯的優(yōu)勢(shì)。

艾灸與針刺對(duì)差異性代謝物中纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸調(diào)節(jié)作用一致。第5天，艾灸組與針刺組中3種代謝物濃度均升高，兩組之間無(wú)顯著差異；10天后，兩組的3種代謝物濃度有顯著差異，艾灸組明顯低于針刺組，纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸三者稱為支鏈氨基酸，屬于必須氨基酸[16-18]。相關(guān)研究表明，脂肪組織有異化循環(huán)支鏈氨基酸和協(xié)同調(diào)節(jié)脂肪組織支鏈氨基酸酶的作用，從而能夠調(diào)節(jié)循環(huán)支鏈氨基酸的水平[19]。另有研究表明，支鏈氨基酸則能促進(jìn)骨骼肌合成，加快肌蛋白的合成代謝[20]。血清中支鏈氨基酸濃度的降低可能與骨骼肌合成相關(guān)，而升高可能與促進(jìn)脂肪組織的代謝相關(guān)。因此，艾灸也可能更快的達(dá)到促進(jìn)肌肉合成，調(diào)節(jié)脂肪組織代謝的作用。艾灸與針刺對(duì)差異性代謝物中谷氨酰胺的調(diào)節(jié)作用相似，均于5天時(shí)顯著升高，而在10天時(shí)降低，且艾灸作用強(qiáng)于針刺作用，谷氨酰胺是體內(nèi)含量最豐富的非必需氨基酸，是合成蛋白質(zhì)、氨基酸、核酸和許多物質(zhì)的前體物質(zhì)[21]，在肝、腎、小腸和骨骼肌代謝中起到重要的調(diào)節(jié)作用，且有研究證實(shí)其能促進(jìn)肌細(xì)胞生長(zhǎng)[22]，并能參與谷胱甘肽和合成從而起到抗氧化作用，重要的是谷氨酰胺可在病理狀態(tài)下有效的起到腸道黏膜的保護(hù)、促進(jìn)黏膜修復(fù)等作用[23]。因此，艾灸、針刺足三里后均能對(duì)腸道功能進(jìn)行調(diào)節(jié)，艾灸作用較針刺更加迅速。

綜上所述，艾灸與針刺對(duì)志愿者血清代謝物有調(diào)節(jié)作用，且兩者表現(xiàn)出一定的差異，艾灸更傾向于對(duì)骨骼肌能量代謝、合成代謝的調(diào)節(jié)，針刺更傾向于對(duì)脂質(zhì)代謝的調(diào)節(jié)，兩者均能對(duì)血清支鏈氨基酸、谷氨酰胺等進(jìn)行調(diào)節(jié)，但艾灸有較針刺更迅速的調(diào)節(jié)作用。

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1H-NMR Metabonomics Reveal Difference of Metabolites between Moxibustion and Acupuncture on Young Volunteers

Zhong Huan1, She Chang1, Guo Anlin1, Wang Houlian1, Ge Junyun1, Liu Mi1, Liu Mailan1, Wu Luyi2, Chang Xiaorong1, Wu Huangan2
(1. College of Acu-Moxibustion, Hunan University of Chinese Medicine, Changsha 410007, China; 2. Shanghai Institute of Acupuncture Moxibustion and Meridian, Shanghai University of Traditional Chinese Medicine, Shanghai 200030, China)

This study was aimed to reveal the differences of metabolites between moxibustion and acupuncture on serum based on1H-NMR. A total of 60 healthy young male volunteers were randomly divided into the moxibustion group and the acupuncture group, with 30 cases in each group. In the moxibustion group, the treatment was mild moxibustion on the right “Zusanli” point for 15 minutes, once a day for 10 days. In the acupuncture group, acupuncture was used on the right “Zusanli” point for 15 minutes, once a day for 10 days. Serum was collected on the morning of 0-day, 5-day, and 10-day. The result showed that there was no significant difference on the metabonomic pattern on the 0-day and 5-day between the moxibustion group and the acupuncture group. After 10-day intervention, there were significant changes on the metabonomic pattern between the moxibustion group and the acupuncture group. After 5-day intervention, 2 metabolites changed significantly (creatine and glycine) (P＜0.05,P＜0.01). After 10-day intervention, 9 metabolites changed significantly (LDL/VLDL, valine, isoleucine, leucine, lactate, glutamine, creatine and glucose (P＜0.01), and glycine (P＜0.05). It was concluded that moxibustion and acupuncture had obvious adjustment to the metabolites, along with the treatment time indicated the regulation function changed.

Moxibustion, acupuncture, metabonomics, difference

10.11842/wst.2016.03.012

R245

A

（責(zé)任編輯：馬雅靜 張志華，責(zé)任譯審：王 晶）

2016-02-14

修回日期：2016-03-04

＊ 科學(xué)技術(shù)部國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃“973計(jì)劃”項(xiàng)目（2015CB554502）：艾灸與針刺作用特點(diǎn)、效應(yīng)響應(yīng)異同的基礎(chǔ)與臨床研究，負(fù)責(zé)人：常小榮；國(guó)家自然科學(xué)基金委面上項(xiàng)目（81574082）：基于COX-2及相關(guān)信號(hào)通路研究針灸對(duì)慢性萎縮性胃炎大鼠的胃黏膜保護(hù)機(jī)制，負(fù)責(zé)人：劉密；高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)專項(xiàng)科研基金新教師類資助課題（20124323120002）：基于TFF/PAR介導(dǎo)的ERK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑研究艾灸促進(jìn)胃黏膜損傷修復(fù)的作用機(jī)制，負(fù)責(zé)人：劉密；湖南省教育廳湖南省優(yōu)秀博士學(xué)位論文獲獎(jiǎng)作者科研資助項(xiàng)目（YB2013B037）：合募配穴艾灸對(duì)胃黏膜損傷修復(fù)過(guò)程中三葉因子的調(diào)節(jié)作用，負(fù)責(zé)人：劉密；湖南省教育廳資助科研項(xiàng)目（14B129）：基于下丘腦弓狀核-外側(cè)隔核Ghrelin通路研究針灸對(duì)糖尿病大鼠胃運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)機(jī)制，負(fù)責(zé)人：劉密；湖南省教育廳湖南省研究生科研創(chuàng)新項(xiàng)目（CX2015B320）：基于代謝組學(xué)方法探討針刺與艾灸對(duì)刺激點(diǎn)的局部作用機(jī)制，負(fù)責(zé)人：鐘歡。

＊＊ 通訊作者：常小榮，二級(jí)教授，博士生導(dǎo)師，主要研究方向：針灸經(jīng)絡(luò)及針灸治病機(jī)制的研究；吳煥淦，本刊編委，二級(jí)教授，博士生導(dǎo)師，主要研究方向：針灸作用的基本原理與應(yīng)用規(guī)律研究。