補中益氣丸對潰瘍性結腸炎小鼠的行為研究*

羅　書　李燕舞　廣州中醫藥大學脾胃研究所(廣州 510405)

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補中益氣丸對潰瘍性結腸炎小鼠的行為研究*

羅書李燕舞?廣州中醫藥大學脾胃研究所(廣州 510405)

摘要目的：研究補中益氣丸對急性潰瘍性結腸炎(Ulcerative colitis，UC)小鼠行為影響，評估補中益氣湯對小鼠急性UC的預防作用。方法：將40只C57BL/6小鼠隨機分為空白組、模型組、陽性對照組，中藥組，每組10只。除正常組外，其余各組予葡聚糖硫酸鈉(Dextran sulfate sodium salt，DSS)造模。空白組，模型組每日給予蒸餾水；陽性對照組每日給予柳氮磺砒啶(SASP) ；中藥組給予補中益氣丸，連續給藥7d，期間觀察小鼠行為變化，之后取樣觀察。結果：與空白組對比，模型組小鼠出現便血、精神萎靡、體質量下降等癥狀；與模型組對比，藥物干預組小鼠上述癥狀不同程度改善。與空白組小鼠對比，模型組小鼠體質量明顯下降(P<0.05)，結腸長度明顯縮短(P<0.05)，結腸質量明顯增加(P<0.05)；與模型組對比，藥物干預組小鼠體質量無明顯差異(P>0.05)，結腸長度縮短明顯緩解(P<0.05)，結腸質量無明顯差異(P>0.05)。結論：補中益氣丸對DSS誘導的小鼠急性UC有一定預防作用。

主題詞結腸炎,潰瘍性/中醫藥療法 補中益氣丸/治療應用動物，實驗小鼠

UC是內科較常見的難治性疾病，腸粘膜在炎癥反復發作的慢性過程中不斷破壞和修復，導致腸道正常結構破壞，雖然UC的發病機理至今尚未完全明了，但是越來越多的證據顯示UC的發生是多因素共同作用的結果[1]。DSS誘導小鼠UC模型癥狀與人類UC臨床表現相似。DSS誘導的小鼠急性UC模型小鼠體質量會逐漸下降，并伴隨腹瀉、縮背、食欲精神差、毛色光澤變差、粘液血便，甚至出現死亡的臨床表現[2]。中藥復方補中益氣丸是臨床治療UC的驗方，本實驗通過DSS誘導小鼠急性UC模型，動態觀察小鼠行為變化，從而評估補中益氣丸對小鼠急性UC的預防作用。

1 材料與方法1.1 實驗動物 C57BL/6小鼠，雌性，體質量18～22g，由廣東省實驗動物中心提供(動物合格證編號：44007200014518)。

1.2 主要試劑 DSS(M.W.36000-50000，廣州市紅爍林生物科技有限公司)；SASP(上海三維制藥有限公司，批號：20130915)；補中益氣丸(北京同仁堂科技發展股份有限公司制藥廠，批號：Z11020244)。

1.3 分組與造模將40只C57BL/6小鼠隨機分為空白組、模型組、陽性藥物對照組，中藥組，每組10只。除空白組外，其余各組予3% DSS水溶液代替飲用水1周，隔天更換新鮮DSS水溶液。

1.4 給藥 研磨SASP片，補中益氣丸，制成溶液。于造模同時給藥，連續7d。空白組，模型組每日給予蒸餾水0.01mL·(g·d)-1；陽性藥物對照組每日給予柳氮磺砒啶, 1.33g/(kg·d)-1，按成人等效劑量換算；中藥組每日分別給予補中益氣丸,6g/(kg·d)-1，按成人等效劑量換算。

1.5觀察小鼠情況體質量、飲食量、大便性狀、便血率。

1.6取樣頸椎脫位處死小鼠，剪取結腸，測量長度，清理內容物，用預冷生理鹽水清洗，濾紙除去多余水分后稱重。

1.7 統計學方法 數據用mean±SD表示，采用SPSS17.0軟件，輸入數據并進行獨立樣本t檢驗和單因素方差分析，P<0.05，差異有統計學意義。

2結果2.1 一般體征 模型組小鼠于造模第3天出現血便，稀便，第5天后精神萎靡，無力，毛色黯啞，體質量明顯下降，飲食明顯減少，解剖小鼠，部分見臟器黏連，結腸壁腫脹，未見明顯潰瘍灶。陽性對照組小鼠于造模第3天出現血便，稀便，第4天后精神萎靡，無力，毛色黯啞，體質量下降，解剖小鼠未見臟器黏連，未見明顯潰瘍灶。中藥組小鼠于造模第3天出現血便，稀便，第4天后精神萎靡，無力，毛色黯啞，體質量下降，解剖小鼠未見臟器黏連，未見明顯潰瘍灶。

2.2小鼠體質量結果 統計顯示(表1) 與空白組對比，模型組小鼠體質量明顯下降(P<0.05)；與模型組對比，陽性對照組、中藥組體質量無明顯差異(P>0.05)。

表1　小鼠體質量

注：?P<0.05，與正常組比較；▲P<0.05與模型組比較

2.3小鼠結腸長度結果 統計顯示(表2) 與空白組對比，模型組小鼠結腸長度明顯下降(P<0.05)，提示小鼠結腸出現病理性改變，充血水腫，腸上皮細胞脫落，形成潰瘍，導致腸壁皺縮。與模型組對比，陽性對照組、中藥組小鼠結腸長度縮短程度明顯緩解(P<0.05)。

2.4 小鼠結腸重量結果 統計顯示(表3) 與空白組對比，模型組小鼠結腸質量增加(P<0.05)；與模型組對比，用陽性對照組、中藥組小鼠結腸質量無明顯差異(P>0.05)，但有下降的趨勢。

表2 　小鼠結腸長度

注：?P<0.05，與正常組比較；▲P<0.05與模型組比較

表3　小鼠結腸質量

注：?P<0.05，與正常組比較；▲P<0.05與模型組比較

3討論UC是一種發病機制并不是很明確的結腸和直腸慢性非特異性炎癥性疾病，發病率也在逐年上升[3]。一般情況下,潰瘍性結腸炎在臨床上往往伴隨著慢性粘液便、血便、腹痛,經常會反復性發作，有時會伴有不同程度的全身癥狀，還有可能發生癌變[4]。

中醫認為UC屬于“痢疾”、“泄瀉”等范疇，張錫純言：“有痢久而清陽下陷者，其人或間作寒熱，或覺胸中短氣，當于治痢藥中，加生黃耆、柴胡以升清陽。” UC多因外感邪毒，內傷飲食而損傷脾胃，病位在腸，脾虛為根[5]。補中益氣丸是健脾益氣的經典方，由黃芪、白術、陳皮、升麻、柴胡、人參、甘草、當歸、生姜、大棗組成，臨床將之用于UC取得較好療效。

桑力軒等[6]認為以DSS誘導小鼠UC逐漸出現腹瀉、粘液血便、體質量減輕、倦怠懶動、毛色干枯等表現，是安全系數較高的造模方法。本研究用藥組能在不同程度上減輕小鼠急性UC的癥狀。在體質量與結腸重量方面，中藥干預組雖與模型組未有明顯差異，但卻有改善的趨勢。結腸長度方面，中藥干預組與模型組有明顯差異，表明，補中益氣丸行預防干預可抑制腸上皮細胞的脫落，減少潰瘍的發生，減輕腸壁皺縮的程度。

參考文獻

[1]高三明. 臭氧聯合培菲康治療潰瘍性結腸炎臨床療效及對細胞因子IL-6、TGF-1水平的影響[J]. 陜西醫學雜志,2013,42(7):895-897.

[2]農輝,黃雪. 葡聚糖硫酸鈉誘導結腸炎模型的研究進展[J]. 世界華人消化雜志,2014,22:3245-3250.

[3]陸淵,費建平. 潰瘍性結腸炎中醫治療研究[J]. 長春中醫藥大學學報,2012,06:1036-1038.

[4]李龍驤. 潰瘍性結腸炎中醫治療研究進展[J]. 深圳中西醫結合雜志,2014,06:195-196.

[5]姚柳伊,舒勁. 黃芪在潰瘍性結腸炎治療中的運用[J]. 中醫研究,2013,10:51-53.

[6]桑力軒,高楠,常冰,等. DSS、TNBS、OXZ誘導結腸炎動物模型的對比[J]. 胃腸病學和肝病學雜志,2013,12:1221-1224.

(收稿2015-10-14;修回2015-11-09)

【中圖分類號】R574.62

【文獻標識碼】A

doi:10.3969/j.issn.1000-7369.2016.02.048

通訊作者?

* 國家自然科學基金資助項目(81202627)