魏玉華,張麗萌,周雪,樊自堯,于永忠,吳志軍,孫虎男,于立權,崔玉東(.黑龍江八一農墾大學動物科技學院,大慶6339;.黑龍江八一農墾大學生命科學技術學院)
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抗停乳鏈球菌GapC1-150aa單克隆抗體的制備及生物活性
魏玉華1,張麗萌1,周雪2,樊自堯2,于永忠2,吳志軍2,孫虎男2,于立權2,崔玉東2
(1.黑龍江八一農墾大學動物科技學院,大慶163319;2.黑龍江八一農墾大學生命科學技術學院)
摘要:為了深入研究停乳鏈球菌GapC蛋白的抗原性,用原核表達的GapC免疫優勢片段—GapC1-150aa蛋白免疫BALB/c小鼠,采用雜交瘤技術制備獲得3株抗停乳鏈球菌GapC1-150aa蛋白不同表位的單克隆抗體1F2、1E11和5B7。經鑒定確定,3株單抗均IgG1亞型,其輕鏈均為κ鏈,3株單克隆抗體均能與停乳鏈球菌、無乳鏈球菌和乳房鏈球菌的GapC發生特異性反應而不與其他細菌蛋白發生反應,均具有顯著的調理活性,并且具有一定的被動免疫保護作用。
關鍵詞:停乳鏈球菌;GapC;單克隆抗體
奶牛乳房炎是公認的對奶牛業造成慘重損失的重要疾病之一,不僅發病率比較高,且常常是反復發生,嚴重危害奶牛的健康并影響乳制品的質量[1-3]。隨著抗生素的大量使用以及耐藥菌株的出現,使奶牛乳房炎防治變得尤為困難。引起奶牛乳房炎的主要病原菌為無乳鏈球菌、停乳鏈球菌、乳房鏈球菌、金黃色葡萄球菌和大腸桿菌等,其中3種鏈球菌引起的奶牛乳房炎能夠占到發病率的30%以上。研究表明[4],停乳鏈球菌GapC蛋白作為一種保護性抗原能夠有效地預防停乳鏈球菌、乳房鏈球菌和無乳鏈球菌引起的感染,具有交叉免疫保護作用,且GapC1-150aa是GapC蛋白的免疫優勢片段。……