張騰龍,薄樂,英那,郝文麗,武智勇,王雄,孟軻音,萬家余,陳志寶(.黑龍江八一農墾大學生命科學技術學院,大慶6339;.中國人民解放軍軍事醫學科學院軍事獸醫研究所)
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朊病毒病生物標記microRNA-142-3p可視化快速檢測
張騰龍1,2,薄樂1,2,英那2,郝文麗1,武智勇1,王雄1,孟軻音2,萬家余2,陳志寶1
(1.黑龍江八一農墾大學生命科學技術學院,大慶163319;2.中國人民解放軍軍事醫學科學院軍事獸醫研究所)
摘要:為了更快捷、方便的檢測朊病毒病,根據已有報道確定microRNA-144-3p作為朊病毒病的生物標記,通過miRBase數據庫公布的microRNA-142-3p的核酸序列,設計特異性標記有生物素的俘獲探針和標記有FAM的檢測探針,從而建立了納米金偶聯核酸試紙條的高效,快捷,可視化檢測方法。結果表明:該檢測方法具有良好的特異性和較高的靈敏度(0.005 nmol·L-1)。該檢測試紙條的建立在朊病毒病預防,控制,診斷過程中具有一定實際意義。
關鍵詞:朊病毒;microRNA-142-3p;生物標記;可視化;檢測
朊病毒病(prion disease)是一種致死性,傳染性神經系統退行性疾病。該疾病變種較多,其中瘋牛病已經打破中間屏障成為嚴重危害人類和動物健康人畜共患病之一[1]。目前普遍認為這類疾病的致病因子就是本體細胞中正常的朊蛋白(PrPC)發生結構錯誤折疊形成致病型蛋白(PrPSc),這種蛋白質具有極強的抗逆性,對較高的溫度、強酸強堿、抗生素和干擾素、酶的耐受性很強。因此,它能在神經細胞中大量聚集沉淀、引起神經細胞代謝、調節紊亂、神經元空泡化大量死亡[2]。正是由于它抗逆性極強,同時也因為朊病毒病發病機理至今仍不清楚,朊病毒病尚未有效的預防和治療措施[3]。……