茯苓粉碎分散處理對小兒肺咳顆粒水分散性的影響

張 紅， 季金茍， 程原原， 徐 溢， 穆小靜， 陳真靜

(重慶大學化學化工學院制藥工程系，重慶 400030)

?

茯苓粉碎分散處理對小兒肺咳顆粒水分散性的影響

張 紅， 季金茍*， 程原原， 徐 溢， 穆小靜， 陳真靜

(重慶大學化學化工學院制藥工程系，重慶 400030)

摘要[目的] 提高小兒肺咳顆粒用藥順應性。[方法] 在小兒肺咳顆粒制備過程中，使用經卵磷脂粉碎分散處理的茯苓粉末，采用濁度光度法和Zeta電位等表征茯苓粉末和小兒肺咳顆粒的水分散性。[結果] 茯苓粉碎過程中加入1.0%的卵磷脂，相對于未經處理的茯苓粉末，混懸液吸光度變化率減少12.9%，Zeta電位絕對值增大118%；使用經卵磷脂粉碎分散處理的茯苓粉末制備的小兒肺咳顆粒，其混懸液粒徑80 μm左右，20 s內吸光度變化率<5.0%，明顯優于原處方小兒肺咳顆粒。[結論] 在小兒肺咳顆粒制備過程中，使用經粉碎分散處理的茯苓粉末可較好地提高其用藥順應性。

關鍵詞小兒肺咳顆粒；茯苓；粉碎分散處理；水分散性；卵磷脂

小兒肺咳顆粒具有健脾益肺、止咳平喘作用，臨床主要用于小兒支氣管炎、脾肺不足、痰濕內壅所致咳嗽或痰多稠黃等癥[1]，目前，小兒服用該顆粒時普遍反映有一定的砂礫感，口感不佳，順應性較差。小兒肺咳顆粒是由22味中藥材組成，其中茯苓等12味藥是經粉碎后直接入藥。研究發現，茯苓經粉碎后絕大部分不溶于水，且部分團聚懸浮于液面，在水中分散性能較差，粉體易再聚集[2]，可能是導致小兒肺咳顆粒上述問題的主要原因之一。因此，研究處理茯苓的方法，提高小兒肺咳顆粒用藥順應性就顯得很有必要。

關于提高中藥材粉末在水中分散性的研究較少，多是結合中藥制劑新技術[3]，利用固體分散體技術[4]等來達到分散的目的，而對中藥顆粒本身在水中的分散穩定性研究較少。一般認為在固體粉碎過程中加入分散穩定助劑是提高其水分散穩定性的較好方法[5-6]，且傳統水分散性表征多采用重力沉降法，耗時長、人為誤差較大、重現性不好。該研究通過在茯苓粉碎過程添加固體分散穩定助劑來改善其粉末的水分散性，采用濁度光度法、Zeta電位等對顆粒在水中的分散性進行表征，再將優化后的茯苓粉末用于小兒肺咳顆粒的制備，以期提高小兒肺咳顆粒用藥順應性。

1材料與方法

1.1試材茯苓等藥材(由天圣制藥集團股份有限公司提供，批號Z-14102901，經重慶大學王伯初教授鑒定為真品)；六偏磷酸鈉(分析純，成都市科龍化工試劑廠)；聚乙二醇(PEG)4000(分析純，成都市科龍化工試劑廠)；糊精(分析純，成都市科龍化工試劑廠)；卵磷脂(生物試劑，成都市科龍化工試劑廠)。

1.2儀器T6新世紀紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限責任公司)；NanoZS90 Zetasizer激光粒度分析儀(英國Malvern公司)；THZ-C恒溫震蕩箱(江蘇太倉市實驗設備廠)；FW135中草藥粉碎機(天津市泰斯特儀器有限公司)；YS2-H生物顯微鏡(尼康株式會社)。

1.3試驗方法

1.3.1茯苓混懸液的制備。稱取茯苓60 g，加入一定量分散穩定助劑，粉碎2次，過200篩，再稱取1.00 g過篩后的茯苓粉體置于錐形瓶中，加入100 mL去離子水，振搖20 min，即得到茯苓粉體混懸液。

1.3.2小兒肺咳顆?；鞈乙旱闹苽洹，F處方顆粒按照《中國藥典》(2015版)中小兒肺咳顆粒處方[1]制備，其中茯苓經分散穩定助劑共同粉碎處理后入藥；對照顆粒則直接按照《中國藥典》(2015版)中小兒肺咳顆粒處方[1]制備。分別取現處方顆粒和對照顆粒3.00 g分散于100 mL去離子水中，振搖20 min，得顆?；鞈乙?。

1.3.3表征方法。

1.3.3.1濁度光度法。茯苓混懸液水分散性的測定參考金斌[7]的濁度光度法，并做了適當的改進。

(1)波長選擇。將混懸液靜置24 h后，離心，取上清液1 mL于10 mL容量瓶中，定容，用紫外可見分光光度計在200～800 nm波長范圍進行掃描；分別稱取六偏磷酸鈉、PEG4000、糊精以及卵磷脂0.050 g，各自分散于100 mL去離子水中，振搖20 min，用移液管吸取搖勻后的混懸液1 mL于10 mL容量瓶中，定容，同上進行掃描；根據掃描結果選擇適宜波長進行混懸液吸光度的測定。

1.3.3.2Zeta電位測定。用移液管吸取搖勻的混懸液1.00mL于10mL容量瓶中，定容，用NanoZS90Zetasizer激光粒度分析儀測量其Zeta電位。

1.3.3.3紅外光譜分析。分別取適量純茯苓粉體、分散穩定助劑以及經分散穩定助劑處理的茯苓粉體，用瑪瑙研缽研磨至適宜粒徑后進行紅外光譜分析。

1.3.3.4顯微鏡觀察試驗。取茯苓混懸液適量滴于載玻片上，蓋上蓋玻片，置于光學顯微鏡下觀察，照相。

2結果與分析

2.1濁度光度法中波長的選擇從茯苓溶出液在波長200～800nm的掃描結果(圖1)可以看出，茯苓溶出液和分散穩定助劑在200～450nm時有吸收峰產生，在450～800nm時幾乎沒有吸收?？梢娫?50～800nm進行茯苓混懸液吸光度測定時，茯苓溶出液和添加的分散穩定助劑對其均無影響，其吸光度主要源自于顆粒的反射，可避免其化學成分的干擾。所以，該試驗選取600nm進行相應的吸光度測定。

2.2茯苓粉末的水分散性研究

2.2.1分散穩定助劑種類對茯苓混懸液分散穩定性能的影響。茯苓粉碎過程中，不同分散穩定助劑的加入量均為茯苓質量的1.0%時，分別測定其吸光度變化率β和Zeta電位。從表1可以看出，空白組的β最大，Zeta電位絕對值最小，說明該樣品顆粒之間聚集現象較嚴重，不易分散；而加入不同分散穩定助劑后，混懸液的β均有一定程度的變小，Zeta電位絕對值有不同程度的變大，其中卵磷脂的β最小、Zeta電位絕對值最大。空白組以及經六偏磷酸鈉、PEG4000、糊精處理后的混懸液中均有部分粉體浮于液面，難以分散于水中，而經卵磷脂處理后的混懸液液面無粉體懸浮，均分散于水中。因此，該研究選用卵磷脂進一步研究其對茯苓混懸液的分散性能影響。

圖1　茯苓溶出液及分散穩定助劑波長掃描Fig.1　Wavelength scanning of solution from Poria cocos and dispersing and stabilizing agent

2.2.2卵磷脂用量對茯苓混懸液分散穩定性能的影響。從不同用量卵磷脂對茯苓混懸液的β和Zeta電位的影響(圖2)可以看出，隨著卵磷脂加入量的增加，混懸液β逐漸變小，Zeta電位的絕對值逐漸變大，當加入量為1.0%時，其β最小，此時Zeta電位的絕對值近似于最大，相對于未添加卵磷脂的混懸液β減小了12.9%、Zeta電位絕對值增大了118%，混懸液液面已不見粉體懸浮；隨后，隨著卵磷脂的加入量增大，其β又逐漸增大，Zeta電位的絕對值趨于平穩。另外，卵磷脂具有很強的吸濕性，其對茯苓粉末的吸濕性影響明顯，故加入量在達到分散目的的同時應較少，該試驗中卵磷脂加入量應選擇茯苓質量的1.0%。

表1　不同分散穩定助劑對茯苓混懸液分散穩定性能的影響

2.2.3紅外光譜分析。由圖3可見，茯苓和茯苓經1.0%卵磷脂分散處理這2個紅外圖譜幾乎完全一致，沒有發現新的峰產生，這可能是因為卵磷脂作用于茯苓時發生的是物理吸附，而沒有化學反應的發生。卵磷脂的特征吸收峰分別為CH2，2 924.8 cm-1；O-H，2 853.6 cm-1；C=O，1 739.8 cm-1；P=O，1 232.7 cm-1；P-O-C，1 066.1 cm-1。而在茯苓經1.0%卵磷脂分散處理的紅外光譜圖中沒有明顯地看出上述卵磷脂的特征峰，這可能是因為上述幾個峰正好被茯苓的特征峰所掩蓋，也可能是由于卵磷脂所占成分的量少，而不被檢出。

2.3卵磷脂處理后茯苓對小兒肺咳顆粒水分散性的影響

2.3.1小兒肺咳顆粒的水分散性比較。按濁度光度法制得小兒肺咳顆粒溶出液，并在200～800 nm波長范圍進行掃描，結果表明其在600 nm處亦無明顯吸收，故選取波長為600 nm進行吸光度測定，計算β。從表2可以看出，現處方顆粒的β明顯小于對照顆粒，且其Zeta電位絕對值也較大，可見通過對茯苓粉碎進行分散處理，能明顯改善小兒肺咳顆粒的水分散性穩定性。經兩獨立樣本之間的t檢驗發現，對照顆粒與現處方顆粒的β、Zeta電位差異有統計學意義(P< 0.01)。

圖2　卵磷脂用量對茯苓混懸液吸光度變化率及Zeta電位的影響Fig.2　The effect of different lecithin amount on absorbance change rate and Zeta potential of Poria cocos suspension

圖3　卵磷脂(a)、茯苓(b)和茯苓經1.0%卵磷脂分散處理(c)的紅外光譜圖Fig.3　Infrared spectra of lecithin(a),Poria cocos(b) and 1.0% lecithin dispersion treatment(c)

Table 2Comparison of water dispersion of control particle and prescription granule

樣品Sampleβ∥%Zeta電位Zetapotential∥mV對照顆粒Controlparticle50.5±1.0-18.9±0.8現處方顆粒Prescriptiongranule40.2±0.6-24.2±0.4

2.3.2顯微鏡觀察試驗。從對照顆粒和現處方顆粒的混懸液顯微圖像結果(圖4)可以看出，加入1.0%卵磷脂處理后的茯苓混懸液，顆粒較小且分散，粒徑為80 μm左右，無明顯大顆粒聚集現象，可直觀看出經卵磷脂分散處理后的茯苓用于小兒肺咳顆粒的制備，可明顯改善顆粒的水分散性。

2.3.3沉降時間對小兒肺咳顆粒水分散性的影響。由圖5可見，相同時間內，現處方顆粒混懸液β明顯小于對照顆粒，且隨著時間的增加，二者之間的差值愈大。在20 s內現處方顆粒混懸液β<5%，表明如果在20 s內服用該顆粒混懸液，其用藥順應性會得到較大提高。

圖4　對照顆粒(a)和現處方顆粒(b)的混懸液顯微圖像Fig.4　Suspension microscopic images of control particle(a) and prescription granule(b)

圖5　沉降時間對小兒肺咳顆?；鞈乙害碌挠绊慒ig.5　The β of PLCPs suspension in different time

3結論和討論

該研究在小兒肺咳顆粒制備過程中，使用經卵磷脂粉碎分散處理的茯苓粉末，采用濁度光度法和Zeta電位等表征茯苓粉末和小兒肺咳顆粒的水分散性，結果發現，在茯苓粉碎過程中加入1.0%卵磷脂，相對于未經卵磷脂處理的茯苓粉末，混懸液吸光度變化率β減少12.9%，Zeta電位絕對值增大118%，表明卵磷脂是一種性能優良的茯苓分散穩定助劑。比較對照顆粒與現處方顆?？擅黠@看出，現處方顆粒的水分散性較好，且其混懸液中難溶微粒粒徑較小，均勻；沉降時間為20 s時，現處方顆粒的混懸液β<5.0%，總體穩定。故在茯苓粉碎過程中加入1.0%卵磷脂得到茯苓粉末應用于小兒肺咳顆粒的制備過程，可較好地改善顆粒在水中的分散狀態，使其用藥順應性得到提高。

卵磷脂作用于茯苓粉體，對其混懸液分散穩定性能產生顯著影響，這可能是因為卵磷脂是一類雙親性天然表面活性物質，其分子具有磷脂的基本特征，包含有親油性的烷基長鏈部分以及親水性膽堿、乙醇胺或肌醇等基團部分[8]。未經卵磷脂處理的混懸液中的茯苓顆粒表面可能吸附有少量油脂性物質(如三萜類、甾體類等)，使得顆粒易于浮于液面和團聚；經卵磷脂處理后的茯苓混懸液，卵磷脂的親油部分可能吸附于顆粒表面，卵磷脂中的親水部分朝向水面，使體系電荷增加[9]，Zeta電位絕對值增大，顆粒不易團聚，混懸液分散穩定性能得到改善。當卵磷脂濃度達1.0%時，茯苓對卵磷脂的吸附達到飽和，隨著卵磷脂濃度繼續增大，此時體系的Zeta電位基本平穩；隨著卵磷脂濃度繼續增大，由卵磷脂

自身形成的膠束可能會逐漸增多，從而使混懸液吸光度變化率有所增大。

參考文獻

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典:一部[S].北京:中國醫藥科技出版社,2015:536.

[2] 江榮高,王立青,林中翔.粉碎助劑在中藥粉碎中的應用[J].中國醫藥科學,2013,3(1):55-59.

[3] 夏海建,張振海,姚冬冬,等.改善中藥口服生物利用度的劑型設計的研究[J].中國中藥雜志,2013,38(17):2911-2916.

[4] 石慧慧,蔡雪萍,鞠建明,等.枇杷葉三萜酸固體分散體的制備及體外溶出研究[J].中藥材,2014 (8):1467-1470.

[5] WANG Y M,FORSSBERG E.Enhancement of energy efficiency for mechanical production of fine and ultra-fine particles in comminution[J].China particuology,2007,5(3):193-201.

[6] 崔福德.藥劑學[M].北京:人民衛生出版社,2007:259.

[7] 金斌.鈦白粉水分散性測定方法的改進[J].現代涂料與涂裝，2006,9(3):49-50.

[8] 洪廣言,張吉林,高倩.在卵磷脂體系中合成 EuF3納米線[J].物理化學學報,2010,26(3):695-700.

[9] 劉天晴,湯瑤,禹克偉.電容法研究卵磷脂/氨基酸/H2O膠束和囊泡體系[J].物理化學學報,2010,26(2):311-316.

Effect ofPoriacocosGrinded Dispersion Treatment on the Water Dispersion Performance of Pediatric Lung Cough Particles

ZHANG Hong,JI Jin-gou*,CHENG Yuan-yuan et al

(Department of Pharmaceutical Engineering,College of Chemistry and Chemical Engineering,Chongqing University,Chongqing 400030)

Abstract[Objective] To make the Pediatric Lung Cough Particles(PLCPs) be more convenient to use.[Method] Used the Poria cocos(PC) powder by grinding mixed with lecithin to prepare the PLCPs.The water dispersion performance of PC powder and PLCPs were characterized by turbidity spectrophotometry and Zeta potential determination.[Result] While grinding PC mixed with 1.0% lecithin,the absorbance change rate of the suspension compared with the raw PC powder was decreased by 12.9%,Zeta potential absolute value was increased by 118%.The suspensions of PLCPs with an average size of 80 μm,and the absorbance change rate was less than 5.0% within 20 seconds,it was better than the original PLCPs obviously.[Conclusion] The PLCPs prepared with the PC by grinding dispersion treatment would be more convenient to use.

Key wordsPediatric Lung Cough Particles; Poria cocos; Grinding dispersion treatment; Water dispersion; Lecithin

基金項目重慶市墊江縣“121”醫藥產業科技支持示范工程項目(cstc2014zktjccxyyBX0025)。

作者簡介張紅(1991- )，女，重慶人，碩士研究生，研究方向：中藥制劑。*通訊作者，教授，博士，碩士生導師，從事藥物制劑研究。

收稿日期2016-02-02

中圖分類號S 567.3+2

文獻標識碼A

文章編號0517-6611(2016)08-122-03