茯苓粉碎分散處理對小兒肺咳顆粒水分散性的影響

張 紅， 季金茍， 程原原， 徐 溢， 穆小靜， 陳真靜

(重慶大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院制藥工程系，重慶 400030)

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茯苓粉碎分散處理對小兒肺咳顆粒水分散性的影響

張 紅， 季金茍*， 程原原， 徐 溢， 穆小靜， 陳真靜

(重慶大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院制藥工程系，重慶 400030)

摘要[目的] 提高小兒肺咳顆粒用藥順應(yīng)性。[方法] 在小兒肺咳顆粒制備過程中，使用經(jīng)卵磷脂粉碎分散處理的茯苓粉末，采用濁度光度法和Zeta電位等表征茯苓粉末和小兒肺咳顆粒的水分散性。[結(jié)果] 茯苓粉碎過程中加入1.0%的卵磷脂，相對于未經(jīng)處理的茯苓粉末，混懸液吸光度變化率減少12.9%，Zeta電位絕對值增大118%；使用經(jīng)卵磷脂粉碎分散處理的茯苓粉末制備的小兒肺咳顆粒，其混懸液粒徑80 μm左右，20 s內(nèi)吸光度變化率<5.0%，明顯優(yōu)于原處方小兒肺咳顆粒。[結(jié)論] 在小兒肺咳顆粒制備過程中，使用經(jīng)粉碎分散處理的茯苓粉末可較好地提高其用藥順應(yīng)性。

關(guān)鍵詞小兒肺咳顆粒；茯苓；粉碎分散處理；水分散性；卵磷脂

小兒肺咳顆粒具有健脾益肺、止咳平喘作用，臨床主要用于小兒支氣管炎、脾肺不足、痰濕內(nèi)壅所致咳嗽或痰多稠黃等癥[1]，目前，小兒服用該顆粒時普遍反映有一定的砂礫感，口感不佳，順應(yīng)性較差。小兒肺咳顆粒是由22味中藥材組成，其中茯苓等12味藥是經(jīng)粉碎后直接入藥。研究發(fā)現(xiàn)，茯苓經(jīng)粉碎后絕大部分不溶于水，且部分團聚懸浮于液面，在水中分散性能較差，粉體易再聚集[2]，可能是導(dǎo)致小兒肺咳顆粒上述問題的主要原因之一。因此，研究處理茯苓的方法，提高小兒肺咳顆粒用藥順應(yīng)性就顯得很有必要。

關(guān)于提高中藥材粉末在水中分散性的研究較少，多是結(jié)合中藥制劑新技術(shù)[3]，利用固體分散體技術(shù)[4]等來達(dá)到分散的目的，而對中藥顆粒本身在水中的分散穩(wěn)定性研究較少。一般認(rèn)為在固體粉碎過程中加入分散穩(wěn)定助劑是提高其水分散穩(wěn)定性的較好方法[5-6]，且傳統(tǒng)水分散性表征多采用重力沉降法，耗時長、人為誤差較大、重現(xiàn)性不好。該研究通過在茯苓粉碎過程添加固體分散穩(wěn)定助劑來改善其粉末的水分散性，采用濁度光度法、Zeta電位等對顆粒在水中的分散性進(jìn)行表征，再將優(yōu)化后的茯苓粉末用于小兒肺咳顆粒的制備，以期提高小兒肺咳顆粒用藥順應(yīng)性。

1材料與方法

1.1試材茯苓等藥材(由天圣制藥集團股份有限公司提供，批號Z-14102901，經(jīng)重慶大學(xué)王伯初教授鑒定為真品)；六偏磷酸鈉(分析純，成都市科龍化工試劑廠)；聚乙二醇(PEG)4000(分析純，成都市科龍化工試劑廠)；糊精(分析純，成都市科龍化工試劑廠)；卵磷脂(生物試劑，成都市科龍化工試劑廠)。

1.2儀器T6新世紀(jì)紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司)；NanoZS90 Zetasizer激光粒度分析儀(英國Malvern公司)；THZ-C恒溫震蕩箱(江蘇太倉市實驗設(shè)備廠)；FW135中草藥粉碎機(天津市泰斯特儀器有限公司)；YS2-H生物顯微鏡(尼康株式會社)。

1.3試驗方法

1.3.1茯苓混懸液的制備。稱取茯苓60 g，加入一定量分散穩(wěn)定助劑，粉碎2次，過200篩，再稱取1.00 g過篩后的茯苓粉體置于錐形瓶中，加入100 mL去離子水，振搖20 min，即得到茯苓粉體混懸液。

1.3.2小兒肺咳顆粒混懸液的制備。現(xiàn)處方顆粒按照《中國藥典》(2015版)中小兒肺咳顆粒處方[1]制備，其中茯苓經(jīng)分散穩(wěn)定助劑共同粉碎處理后入藥；對照顆粒則直接按照《中國藥典》(2015版)中小兒肺咳顆粒處方[1]制備。分別取現(xiàn)處方顆粒和對照顆粒3.00 g分散于100 mL去離子水中，振搖20 min，得顆粒混懸液。

1.3.3表征方法。

1.3.3.1濁度光度法。茯苓混懸液水分散性的測定參考金斌[7]的濁度光度法，并做了適當(dāng)?shù)母倪M(jìn)。

(1)波長選擇。將混懸液靜置24 h后，離心，取上清液1 mL于10 mL容量瓶中，定容，用紫外可見分光光度計在200～800 nm波長范圍進(jìn)行掃描；分別稱取六偏磷酸鈉、PEG4000、糊精以及卵磷脂0.050 g，各自分散于100 mL去離子水中，振搖20 min，用移液管吸取搖勻后的混懸液1 mL于10 mL容量瓶中，定容，同上進(jìn)行掃描；根據(jù)掃描結(jié)果選擇適宜波長進(jìn)行混懸液吸光度的測定。

1.3.3.2Zeta電位測定。用移液管吸取搖勻的混懸液1.00mL于10mL容量瓶中，定容，用NanoZS90Zetasizer激光粒度分析儀測量其Zeta電位。

1.3.3.3紅外光譜分析。分別取適量純茯苓粉體、分散穩(wěn)定助劑以及經(jīng)分散穩(wěn)定助劑處理的茯苓粉體，用瑪瑙研缽研磨至適宜粒徑后進(jìn)行紅外光譜分析。

1.3.3.4顯微鏡觀察試驗。取茯苓混懸液適量滴于載玻片上，蓋上蓋玻片，置于光學(xué)顯微鏡下觀察，照相。

2結(jié)果與分析

2.1濁度光度法中波長的選擇從茯苓溶出液在波長200～800nm的掃描結(jié)果(圖1)可以看出，茯苓溶出液和分散穩(wěn)定助劑在200～450nm時有吸收峰產(chǎn)生，在450～800nm時幾乎沒有吸收。可見在450～800nm進(jìn)行茯苓混懸液吸光度測定時，茯苓溶出液和添加的分散穩(wěn)定助劑對其均無影響，其吸光度主要源自于顆粒的反射，可避免其化學(xué)成分的干擾。所以，該試驗選取600nm進(jìn)行相應(yīng)的吸光度測定。

2.2茯苓粉末的水分散性研究

2.2.1分散穩(wěn)定助劑種類對茯苓混懸液分散穩(wěn)定性能的影響。茯苓粉碎過程中，不同分散穩(wěn)定助劑的加入量均為茯苓質(zhì)量的1.0%時，分別測定其吸光度變化率β和Zeta電位。從表1可以看出，空白組的β最大，Zeta電位絕對值最小，說明該樣品顆粒之間聚集現(xiàn)象較嚴(yán)重，不易分散；而加入不同分散穩(wěn)定助劑后，混懸液的β均有一定程度的變小，Zeta電位絕對值有不同程度的變大，其中卵磷脂的β最小、Zeta電位絕對值最大。空白組以及經(jīng)六偏磷酸鈉、PEG4000、糊精處理后的混懸液中均有部分粉體浮于液面，難以分散于水中，而經(jīng)卵磷脂處理后的混懸液液面無粉體懸浮，均分散于水中。因此，該研究選用卵磷脂進(jìn)一步研究其對茯苓混懸液的分散性能影響。

圖1　茯苓溶出液及分散穩(wěn)定助劑波長掃描Fig.1　Wavelength scanning of solution from Poria cocos and dispersing and stabilizing agent

2.2.2卵磷脂用量對茯苓混懸液分散穩(wěn)定性能的影響。從不同用量卵磷脂對茯苓混懸液的β和Zeta電位的影響(圖2)可以看出，隨著卵磷脂加入量的增加，混懸液β逐漸變小，Zeta電位的絕對值逐漸變大，當(dāng)加入量為1.0%時，其β最小，此時Zeta電位的絕對值近似于最大，相對于未添加卵磷脂的混懸液β減小了12.9%、Zeta電位絕對值增大了118%，混懸液液面已不見粉體懸浮；隨后，隨著卵磷脂的加入量增大，其β又逐漸增大，Zeta電位的絕對值趨于平穩(wěn)。另外，卵磷脂具有很強的吸濕性，其對茯苓粉末的吸濕性影響明顯，故加入量在達(dá)到分散目的的同時應(yīng)較少，該試驗中卵磷脂加入量應(yīng)選擇茯苓質(zhì)量的1.0%。

表1　不同分散穩(wěn)定助劑對茯苓混懸液分散穩(wěn)定性能的影響

2.2.3紅外光譜分析。由圖3可見，茯苓和茯苓經(jīng)1.0%卵磷脂分散處理這2個紅外圖譜幾乎完全一致，沒有發(fā)現(xiàn)新的峰產(chǎn)生，這可能是因為卵磷脂作用于茯苓時發(fā)生的是物理吸附，而沒有化學(xué)反應(yīng)的發(fā)生。卵磷脂的特征吸收峰分別為CH2，2 924.8 cm-1；O-H，2 853.6 cm-1；C=O，1 739.8 cm-1；P=O，1 232.7 cm-1；P-O-C，1 066.1 cm-1。而在茯苓經(jīng)1.0%卵磷脂分散處理的紅外光譜圖中沒有明顯地看出上述卵磷脂的特征峰，這可能是因為上述幾個峰正好被茯苓的特征峰所掩蓋，也可能是由于卵磷脂所占成分的量少，而不被檢出。

2.3卵磷脂處理后茯苓對小兒肺咳顆粒水分散性的影響

2.3.1小兒肺咳顆粒的水分散性比較。按濁度光度法制得小兒肺咳顆粒溶出液，并在200～800 nm波長范圍進(jìn)行掃描，結(jié)果表明其在600 nm處亦無明顯吸收，故選取波長為600 nm進(jìn)行吸光度測定，計算β。從表2可以看出，現(xiàn)處方顆粒的β明顯小于對照顆粒，且其Zeta電位絕對值也較大，可見通過對茯苓粉碎進(jìn)行分散處理，能明顯改善小兒肺咳顆粒的水分散性穩(wěn)定性。經(jīng)兩獨立樣本之間的t檢驗發(fā)現(xiàn)，對照顆粒與現(xiàn)處方顆粒的β、Zeta電位差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P< 0.01)。

圖2　卵磷脂用量對茯苓混懸液吸光度變化率及Zeta電位的影響Fig.2　The effect of different lecithin amount on absorbance change rate and Zeta potential of Poria cocos suspension

圖3　卵磷脂(a)、茯苓(b)和茯苓經(jīng)1.0%卵磷脂分散處理(c)的紅外光譜圖Fig.3　Infrared spectra of lecithin(a),Poria cocos(b) and 1.0% lecithin dispersion treatment(c)

Table 2Comparison of water dispersion of control particle and prescription granule

樣品Sampleβ∥%Zeta電位Zetapotential∥mV對照顆粒Controlparticle50.5±1.0-18.9±0.8現(xiàn)處方顆粒Prescriptiongranule40.2±0.6-24.2±0.4

2.3.2顯微鏡觀察試驗。從對照顆粒和現(xiàn)處方顆粒的混懸液顯微圖像結(jié)果(圖4)可以看出，加入1.0%卵磷脂處理后的茯苓混懸液，顆粒較小且分散，粒徑為80 μm左右，無明顯大顆粒聚集現(xiàn)象，可直觀看出經(jīng)卵磷脂分散處理后的茯苓用于小兒肺咳顆粒的制備，可明顯改善顆粒的水分散性。

2.3.3沉降時間對小兒肺咳顆粒水分散性的影響。由圖5可見，相同時間內(nèi)，現(xiàn)處方顆粒混懸液β明顯小于對照顆粒，且隨著時間的增加，二者之間的差值愈大。在20 s內(nèi)現(xiàn)處方顆粒混懸液β<5%，表明如果在20 s內(nèi)服用該顆粒混懸液，其用藥順應(yīng)性會得到較大提高。

圖4　對照顆粒(a)和現(xiàn)處方顆粒(b)的混懸液顯微圖像Fig.4　Suspension microscopic images of control particle(a) and prescription granule(b)

圖5　沉降時間對小兒肺咳顆粒混懸液β的影響Fig.5　The β of PLCPs suspension in different time

3結(jié)論和討論

該研究在小兒肺咳顆粒制備過程中，使用經(jīng)卵磷脂粉碎分散處理的茯苓粉末，采用濁度光度法和Zeta電位等表征茯苓粉末和小兒肺咳顆粒的水分散性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在茯苓粉碎過程中加入1.0%卵磷脂，相對于未經(jīng)卵磷脂處理的茯苓粉末，混懸液吸光度變化率β減少12.9%，Zeta電位絕對值增大118%，表明卵磷脂是一種性能優(yōu)良的茯苓分散穩(wěn)定助劑。比較對照顆粒與現(xiàn)處方顆粒可明顯看出，現(xiàn)處方顆粒的水分散性較好，且其混懸液中難溶微粒粒徑較小，均勻；沉降時間為20 s時，現(xiàn)處方顆粒的混懸液β<5.0%，總體穩(wěn)定。故在茯苓粉碎過程中加入1.0%卵磷脂得到茯苓粉末應(yīng)用于小兒肺咳顆粒的制備過程，可較好地改善顆粒在水中的分散狀態(tài)，使其用藥順應(yīng)性得到提高。

卵磷脂作用于茯苓粉體，對其混懸液分散穩(wěn)定性能產(chǎn)生顯著影響，這可能是因為卵磷脂是一類雙親性天然表面活性物質(zhì)，其分子具有磷脂的基本特征，包含有親油性的烷基長鏈部分以及親水性膽堿、乙醇胺或肌醇等基團部分[8]。未經(jīng)卵磷脂處理的混懸液中的茯苓顆粒表面可能吸附有少量油脂性物質(zhì)(如三萜類、甾體類等)，使得顆粒易于浮于液面和團聚；經(jīng)卵磷脂處理后的茯苓混懸液，卵磷脂的親油部分可能吸附于顆粒表面，卵磷脂中的親水部分朝向水面，使體系電荷增加[9]，Zeta電位絕對值增大，顆粒不易團聚，混懸液分散穩(wěn)定性能得到改善。當(dāng)卵磷脂濃度達(dá)1.0%時，茯苓對卵磷脂的吸附達(dá)到飽和，隨著卵磷脂濃度繼續(xù)增大，此時體系的Zeta電位基本平穩(wěn)；隨著卵磷脂濃度繼續(xù)增大，由卵磷脂

自身形成的膠束可能會逐漸增多，從而使混懸液吸光度變化率有所增大。

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Effect ofPoriacocosGrinded Dispersion Treatment on the Water Dispersion Performance of Pediatric Lung Cough Particles

ZHANG Hong,JI Jin-gou*,CHENG Yuan-yuan et al

(Department of Pharmaceutical Engineering,College of Chemistry and Chemical Engineering,Chongqing University,Chongqing 400030)

Abstract[Objective] To make the Pediatric Lung Cough Particles(PLCPs) be more convenient to use.[Method] Used the Poria cocos(PC) powder by grinding mixed with lecithin to prepare the PLCPs.The water dispersion performance of PC powder and PLCPs were characterized by turbidity spectrophotometry and Zeta potential determination.[Result] While grinding PC mixed with 1.0% lecithin,the absorbance change rate of the suspension compared with the raw PC powder was decreased by 12.9%,Zeta potential absolute value was increased by 118%.The suspensions of PLCPs with an average size of 80 μm,and the absorbance change rate was less than 5.0% within 20 seconds,it was better than the original PLCPs obviously.[Conclusion] The PLCPs prepared with the PC by grinding dispersion treatment would be more convenient to use.

Key wordsPediatric Lung Cough Particles; Poria cocos; Grinding dispersion treatment; Water dispersion; Lecithin

基金項目重慶市墊江縣“121”醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)科技支持示范工程項目(cstc2014zktjccxyyBX0025)。

作者簡介張紅(1991- )，女，重慶人，碩士研究生，研究方向：中藥制劑。*通訊作者，教授，博士，碩士生導(dǎo)師，從事藥物制劑研究。

收稿日期2016-02-02

中圖分類號S 567.3+2

文獻(xiàn)標(biāo)識碼A

文章編號0517-6611(2016)08-122-03