miRNA- 30c及其靶基因MTA- 1在子宮內(nèi)膜癌裸鼠皮下移植瘤中的作用

孔祥怡，周懷君

(南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院 婦產(chǎn)科，江蘇 南京　210008)

miRNA- 30c及其靶基因MTA- 1在子宮內(nèi)膜癌裸鼠皮下移植瘤中的作用

孔祥怡，周懷君

(南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院 婦產(chǎn)科，江蘇 南京210008)

[摘要]目的：探討過(guò)表達(dá)miRNA- 30c對(duì)子宮內(nèi)膜癌裸鼠皮下移植瘤生長(zhǎng)的影響。方法：應(yīng)用子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞系建立子宮內(nèi)膜癌裸鼠皮下移植瘤模型，予裸鼠皮下移植瘤內(nèi)多點(diǎn)注射miRNA- 30c前體表達(dá)質(zhì)粒，并以陰性質(zhì)粒及PBS為對(duì)照。測(cè)量移植瘤體積，計(jì)算腫瘤生長(zhǎng)抑制率；熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)移植瘤組織miRNA- 30c表達(dá)水平；蛋白質(zhì)印跡技術(shù)檢測(cè)移植瘤組織MTA- 1蛋白表達(dá)水平；免疫組化技術(shù)檢測(cè)移植瘤組織E- cadherin表達(dá)及微血管密度(MVD)。結(jié)果：成功建立子宮內(nèi)膜癌裸鼠皮下移植瘤模型，miRNA- 30c質(zhì)粒治療明顯抑制腫瘤生長(zhǎng)，抑制率為(46.98±5.13)%(P<0.01)；上調(diào)移植瘤組織中miRNA- 30c的表達(dá)(P<0.05)，下調(diào)MTA- 1蛋白表達(dá)(P<0.05)，下調(diào)移植瘤組織MVD(P<0.05)，上調(diào)移植瘤組織E- cadherin表達(dá)(P<0.05)。結(jié)論：過(guò)表達(dá)miRNA- 30c可以通過(guò)下調(diào)MTA- 1表達(dá)明顯抑制子宮內(nèi)膜癌裸鼠皮下移植瘤的生長(zhǎng)。

[關(guān)鍵詞]miRNA- 30c； 子宮內(nèi)膜癌； 裸鼠； 移植瘤

微小RNA(miRNA)是一類廣泛存在于真核細(xì)胞中的由內(nèi)源性基因編碼的長(zhǎng)度為18～25個(gè)核苷酸的非編碼單鏈RNA，不僅參與胚胎早期發(fā)育、細(xì)胞增殖分化、細(xì)胞凋亡等正常生命活動(dòng)[1]，而且可以通過(guò)調(diào)控細(xì)胞的增殖、代謝、分化以及凋亡等行為影響腫瘤的發(fā)生發(fā)展及侵襲轉(zhuǎn)移[2]。女性生殖道惡性腫瘤之一的子宮內(nèi)膜癌近年來(lái)發(fā)病率在世界范圍內(nèi)呈持續(xù)上升趨勢(shì)，在西方國(guó)家已經(jīng)成為發(fā)病率最高的婦科腫瘤[3]。子宮內(nèi)膜癌與miRNA的相關(guān)研究逐漸增多，目前有研究證實(shí)miR- 30c[4]以腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因1(MTA- 1)為靶基因，上調(diào)miR- 30c(miR- 30c)表達(dá)可以下調(diào)Ishikawa及HEC- 1B細(xì)胞系中靶基因mRNA及蛋白質(zhì)的表達(dá)，抑制細(xì)胞增殖及遷移侵襲能力[4- 5]。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)構(gòu)建子宮內(nèi)膜癌裸鼠皮下移植瘤模型探討過(guò)表達(dá)miR- 30c在動(dòng)物體內(nèi)對(duì)于移植瘤生長(zhǎng)的影響，進(jìn)一步探究miR- 30c在子宮內(nèi)膜癌中的作用。

1材料與方法

1.1材料

子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞株由北京大學(xué)醫(yī)學(xué)院魏麗惠教授惠贈(zèng)。BALB/c nunu雌性裸鼠18只，14～15周齡，購(gòu)于南京大學(xué)動(dòng)物模式中心[許可證號(hào)：SCXK(蘇)2009- 0017]，由鼓樓醫(yī)院動(dòng)物房飼養(yǎng)，SPF級(jí)。DMEM高糖培養(yǎng)基、胎牛血清(GIBCO公司)，miR- 30c前體表達(dá)質(zhì)粒(pRNAT- CMV3.2- Neo- miR- 30c)及陰性質(zhì)粒(pRNAT- CMV3.2- neg)(GeneScript公司)，質(zhì)粒大提試劑盒(Tiangen公司)，LipofectamineTM 2000(Invitrogen公司)，MTA- 1一抗(ab50263)(Abcam公司)，GAPDH一抗(Bioworld Technology公司)，山羊抗小鼠HRP標(biāo)記抗體(Bioworld Technology公司)，兔抗山羊免疫組化抗體(武漢博士德公司)，PrimeScript? RT reagent Kit、SYBR? RT reagent Kit(Takara公司)。

1.2方法

1.2.1Ishikawa細(xì)胞的培養(yǎng)及裸鼠皮下移植瘤模型的建立在37 ℃、體積分?jǐn)?shù)為5%的 CO2、飽和濕度條件下，于含 10 % 胎牛血清的DMEM高糖培養(yǎng)基中培養(yǎng)Ishikawa細(xì)胞，將處于對(duì)數(shù)期生長(zhǎng)的細(xì)胞常規(guī)胰酶消化，1 500 r·min-1離心5 min收集細(xì)胞。PBS重懸計(jì)數(shù)，調(diào)整細(xì)胞濃度為5×107個(gè)·ml-1。每只裸鼠右側(cè)肩胛區(qū)皮下注射細(xì)胞懸液200 μl，注射后觀察皮下出現(xiàn)局部包塊，無(wú)出血、破潰。

1.2.2質(zhì)粒的擴(kuò)增及提取miR- 30c前體表達(dá)質(zhì)粒(pRNAT- CMV3.2- Neo- miR- 30c)以及陰性質(zhì)粒(pRNAT- CMV3.2- Neo)由GeneScript公司構(gòu)建合成，并轉(zhuǎn)化大腸桿菌。將1 ml含有質(zhì)粒的大腸桿菌菌液加入4 ml LB培養(yǎng)基中于搖床上(37 ℃180 r·min-1)搖至渾濁，再在100 ml LB培養(yǎng)基中擴(kuò)大培養(yǎng)，搖菌過(guò)夜至渾濁。應(yīng)用質(zhì)粒大提試劑盒(Tiangen公司)按照說(shuō)明書(shū)提取質(zhì)粒，并用紫外分光光度計(jì)測(cè)質(zhì)粒DNA濃度。

1.2.3荷瘤裸鼠分組治療及處理待腫瘤體積到60 mm3時(shí)隨機(jī)分為miR- 30c治療組、miR- N對(duì)照組及PBS對(duì)照組3組，每組6只。質(zhì)粒與LipofectamineTM 2000按質(zhì)量體積比1∶2混合，以O(shè)pti- MEM稀釋至體積為150 μl，并以150 μl PBS為空白治療，分別瘤內(nèi)多點(diǎn)注射，每3 d 1次，共7次。期間每天觀察裸鼠一般狀況，記錄各組裸鼠的進(jìn)食、活動(dòng)反應(yīng)、皮膚毛發(fā)情況，每3 d稱量體重1次并測(cè)量皮下移植瘤長(zhǎng)、短徑，計(jì)算體積[體積(mm3)=長(zhǎng)徑(mm)×短徑2(mm)×1/2]。末次治療后3 d脫頸處死裸鼠，剝離腫瘤，測(cè)量腫瘤體積、質(zhì)量，計(jì)算腫瘤生長(zhǎng)抑制率[抑瘤率(%)=(1-治療組平均瘤體體積/空白對(duì)照組平均瘤體體積)×100%]。

1.2.4熒光定量PCR(Realtime- PCR)檢測(cè)腫瘤組織miR- 30c表達(dá)水平用Trizol法提取移植瘤組織中的總RNA，紫外分光光度計(jì)測(cè)定 RNA 濃度，取2 μg總RNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。再取2 μg cDNA進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)，擴(kuò)增條件：95 ℃ 30 s，1個(gè)循環(huán)；95 ℃ 5 s，60 ℃ 34 s，40個(gè)循環(huán)。引物序列如下：microRNA- 30c(RT)5′- GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATT CGCACTGGATACGACGCTGA- 3′，microRNA- 30c(FW)5′- GCCGCTGTAAACATCCTACACT- 3′，microRNA- 30c(RW)5′- GTGCAGGGTCCGAGGT- 3′，U6(FW)5′- CT CGCTTCGGCAGCACA- 3′，U6(RW)5′- AACGCTTCACG AATTTGCGT- 3′。相對(duì)表達(dá)量采用公式RQ=2- △△Ct，Ct是熒光達(dá)到熒光閾值的循環(huán)數(shù)，△△Ct=(Ct目的基因-Ct管家基因)實(shí)驗(yàn)組-(Ct目的基因-Ct管家基因)對(duì)照組。

1.2.5蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)移植瘤組織MTA- 1蛋白表達(dá)水平應(yīng)用RIPA蛋白裂解液提取移植瘤組織中的總蛋白，BCA蛋白測(cè)定試劑盒測(cè)定總蛋白濃度，上樣量50 μg。10%聚丙烯酰胺凝膠電泳后將蛋白轉(zhuǎn)移至PVDF膜， 用10%脫脂奶粉封閉2 h。分別加入MTA- 1一抗(1∶500)和GAPDH一抗(1∶10 000)4 ℃過(guò)夜后室溫孵育4 h。TBST漂洗6次(5、5、10、10、15、15 min)后加入二抗(1∶10 000)室溫孵育2 h，TBST漂洗6次(5、5、10、10、15、15 min)。ECL試劑顯色，暗室中進(jìn)行 X 線膠片曝光，拍照光密度掃描條帶，檢測(cè)各組中MTA- 1和 GAPDH 所對(duì)應(yīng)條帶的A值，對(duì)AMTA- 1/AGAPDH的值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

1.2.6免疫組化檢測(cè)移植瘤組織相應(yīng)蛋白的表達(dá)石蠟切片常規(guī)處理至抗原修復(fù),5%BSA封閉20 min，vWF、E- cadherin一抗4 ℃過(guò)夜孵育，PBS沖洗3次后滴加生物素標(biāo)記的二抗，37 ℃孵育30 min后DAB試劑顯色，蘇木素復(fù)染后封片。針對(duì)vWF抗體染色行微血管密度(MVD)計(jì)數(shù)，具體方法即先在40倍鏡下觀察整張切片的血管分布情況，選擇切片中棕黃顆粒最密集的3個(gè)區(qū)域(即“熱點(diǎn)”)，在200倍鏡下計(jì)數(shù)每個(gè)區(qū)域中vWF陽(yáng)性細(xì)胞，求其平均值。針對(duì)E- cadherin抗體染色于400倍光鏡下隨機(jī)取5個(gè)視野對(duì)陽(yáng)性染色進(jìn)行觀察，計(jì)算E- cadherin陽(yáng)性染色細(xì)胞的百分率。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2結(jié)果

2.1過(guò)表達(dá)miR- 30c抑制裸鼠移植瘤生長(zhǎng)

成功建立裸鼠皮下移植瘤模型，種瘤后7～10 d皮下移植瘤逐漸形成，待14 d左右腫瘤體積約60 mm3后開(kāi)始不同的干預(yù)治療。治療過(guò)程中3組裸鼠在負(fù)瘤初期一般狀態(tài)逐漸變差，隨著腫瘤增長(zhǎng)及治療次數(shù)增加治療組裸鼠一般狀態(tài)逐漸穩(wěn)定，而兩對(duì)照組裸鼠一般狀態(tài)繼續(xù)變差，出現(xiàn)消瘦、腹瀉等不良反應(yīng)，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)全部裸鼠存活。治療結(jié)束后3組裸鼠皮下移植瘤體積均較前有所增長(zhǎng)，但在第3次治療后治療組裸鼠皮下移植瘤的增長(zhǎng)速度明顯受到抑制(圖1)，在第7次治療后3 d處死裸鼠獲得離體移植瘤標(biāo)本，測(cè)量其體積及質(zhì)量發(fā)現(xiàn)治療組移植瘤體積及質(zhì)量均明顯小于兩對(duì)照組(圖2、表 1)。通過(guò)以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)miR- 30c質(zhì)粒可以有效抑制裸鼠皮下移植瘤增長(zhǎng)。

2.2移植瘤組織中miR- 30c的表達(dá)

成功建立裸鼠皮下移植瘤模型后分組對(duì)其進(jìn)行瘤內(nèi)注射治療，末次治療后3 d脫頸處死裸鼠，剝離腫瘤，用Trizol法提取移植瘤組織中的總RNA，紫外分光光度計(jì)測(cè)定RNA濃度，取2 μg總RNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA進(jìn)行Realtime- PCR實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示miR- 30c治療組移植瘤組織中miR- 30c表達(dá)明顯高于其他兩組(圖3)，提示miR- 30c質(zhì)粒瘤內(nèi)注射治療能夠上調(diào)移植瘤組織中miR- 30c表達(dá)。

aP<0.05，bP<0.01

圖13組裸鼠皮下移植瘤體積增長(zhǎng)趨勢(shì)

Fig 1The growth of xenograft in three groups

圖2末次治療后3組裸鼠皮下移植瘤離體狀態(tài)

Fig 2The xenograft after treatment in three groups

表1 末次治療后3組裸鼠皮下移植瘤體積、質(zhì)量及抑瘤率

Tab 1The volume， weight of xenograft and inhibitory rate in three groups after the last treatment

組 別移植瘤體積/mm3移植瘤質(zhì)量/g抑瘤率/%miR-30c治療組534.60±26.18a0.67±0.03a46.98±5.13miR-N對(duì)照組872.32±74.601.09±0.0913.41±7.04PBS對(duì)照組1007.48±51.091.13±0.06—

a 與對(duì)照組比，P<0.01

2.3移植瘤組織中MTA- 1蛋白的表達(dá)

成功建立裸鼠皮下移植瘤模型后分組對(duì)其進(jìn)行瘤內(nèi)注射治療，末次治療后3 d脫頸處死裸鼠，剝離腫瘤，應(yīng)用RIPA蛋白裂解液提取移植瘤組織中的總蛋白，BCA蛋白測(cè)定試劑盒測(cè)定總蛋白濃度，上樣量50 μg進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，miR- 30c治療組移植瘤組織中MTA- 1蛋白表達(dá)明顯低于其他兩組。移植瘤組織中miR- 30c表達(dá)后可以明顯下調(diào)移植瘤組織中MTA- 1蛋白表達(dá)。見(jiàn)圖4。

aP<0.05

圖3各組移植瘤組織中miR- 30c表達(dá)水平

Fig 3The miR- 30c expression of xenograft in three groups

aP<0.05

圖4各組裸鼠移植瘤組織MTA- 1蛋白相對(duì)表達(dá)

Fig 4The relative MTA- 1 expression of xenograft in three groups

2.4移植瘤組織中MVD及E- cadherin蛋白的表達(dá)

對(duì)各組裸鼠移植瘤組織進(jìn)行免疫組化實(shí)驗(yàn)，針對(duì)vWF抗體染色行MVD計(jì)數(shù)，結(jié)果顯示miR- 30c治療組腫瘤組織中vWF表達(dá)較其他兩組表達(dá)減弱，MVD減少，提示miR- 30c治療可以下調(diào)移植瘤組織中vWF蛋白表達(dá)，抑制新生血管形成。針對(duì)E- cadherin抗體染色結(jié)果顯示在miR- 30c治療組中E- cadherin蛋白細(xì)胞表達(dá)陽(yáng)性率明顯高于其他兩組(圖5、表2)。綜合以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，miR- 30c過(guò)表達(dá)可以抑制移植瘤血管形成及上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化。

圖5各組移植瘤組織中MVD及E- cadherin蛋白表達(dá)情況

Fig 5The MVD and E- cadherin expression of xenograft in three groups

表2各組移植瘤組織中MVD及E- cadherin蛋白表達(dá)情況

Tab 2The MVD and E- cadherin expression of xenograft in three groups

組 別MVDE-cadherin/%PBS對(duì)照組52.12±3.1281.25±4.60miR-N對(duì)照組50.67±2.5679.26±5.12miR-30c治療組34.26±1.25a94.69±6.04a

a 與對(duì)照組比，P<0.05

3討論

miR- 30c是miRNA- 30家族中的一員，研究發(fā)現(xiàn)miR- 30c在子宮內(nèi)膜癌[6]、乳腺癌[7]、前列腺癌[8]、甲狀腺癌[9]、結(jié)腸癌[10]及肝癌[11]等惡性腫瘤組織中均低表達(dá)于相應(yīng)的正常組織，且在發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的甲狀腺癌腫瘤組織中低表達(dá)于早期甲狀腺癌腫瘤組織[9]，另外低表達(dá)miR- 30c與乳腺癌患者發(fā)生三苯氧胺耐藥及較差的預(yù)后[12- 13]以及腎臟透明細(xì)胞癌患者較短的無(wú)進(jìn)展存活率相關(guān)[14]，提示miR- 30c的低表達(dá)與腫瘤的發(fā)生及進(jìn)展存在密切關(guān)系。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)在卵巢癌中miR- 30c通過(guò)作用于轉(zhuǎn)錄活化因子3(ATF3)調(diào)節(jié)溶血磷脂酸通路調(diào)控腫瘤進(jìn)展[15]，在肝癌中以IER2為靶基因調(diào)控腫瘤細(xì)胞的遷移侵襲能力[16]，在結(jié)腸癌中調(diào)節(jié)去整合素金屬基質(zhì)蛋白酶19(ADAM19)表達(dá)調(diào)控腫瘤的生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移[10]，進(jìn)一步揭示了miR- 30c的抑癌作用。然而另一些研究顯示miR- 30c在間皮瘤細(xì)胞中高表達(dá)[17]，在卵巢癌組織中高表達(dá)于良性卵巢腫瘤組織及交界性腫瘤組織[18]，并且與惡性間皮瘤患者較差的預(yù)后[17]及肺癌患者的化療抵抗相關(guān)[19]，說(shuō)明miR- 30c在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中同樣具有促進(jìn)作用，這可能與腫瘤發(fā)生的組織特異性及發(fā)病原因不同有關(guān)，然而具體機(jī)制仍然需要進(jìn)一步探究。

我們已經(jīng)證實(shí)miR- 30c在子宮內(nèi)膜癌組織中低表達(dá)于正常內(nèi)膜組織，并通過(guò)熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)證實(shí)了是miR- 30c直接作用于MTA- 1抑制其表達(dá)，從而抑制子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞株的增殖及侵襲能力[4- 5]，提示miR- 30c- MTA- 1通路在子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞水平的調(diào)控中起著重要作用。為進(jìn)一步探究miR- 30c- MTA- 1通路的作用本研究建立了裸鼠皮下移植瘤模型，并通過(guò)miR- 30c質(zhì)粒的瘤內(nèi)治療發(fā)現(xiàn)miR- 30c質(zhì)粒可以有效上調(diào)移植瘤組織中miR- 30c的表達(dá)，下調(diào)MTA- 1蛋白，并能夠抑制裸鼠皮下移植瘤組織生長(zhǎng)及新生血管的形成，提示在裸鼠模型中上調(diào)miR- 30c的表達(dá)可以有效抑制腫瘤的進(jìn)展，與我們的細(xì)胞水平研究結(jié)果一致。

MTA- 1在子宮內(nèi)膜癌組織中低表達(dá)[20]，并作為致癌基因參與調(diào)控乳腺癌[21]、結(jié)腸癌[22]等腫瘤的進(jìn)展，有研究顯示MTA- 1通過(guò)下調(diào)E- cadherin的表達(dá)促進(jìn)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化從而增加食管癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力[23]。我們已經(jīng)證實(shí)上調(diào)miR- 30c表達(dá)在下調(diào)MTA- 1表達(dá)同時(shí)可以抑制子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞株的遷移、侵襲能力。本研究對(duì)裸鼠移植瘤組織進(jìn)行了免疫組化實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明miR- 30c下調(diào)MTA- 1表達(dá)的同時(shí)降低了腫瘤組織中MVD的形成，并增加了E- cadherin染色陽(yáng)性率，而新生血管的形成及上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化是腫瘤發(fā)生侵襲、轉(zhuǎn)移的重要條件，并且上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的發(fā)生與子宮內(nèi)膜癌的進(jìn)展密切相關(guān)[24]，這提示MTA- 1在子宮內(nèi)膜癌中可能通過(guò)調(diào)節(jié)微血管的新生及上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化影響腫瘤的轉(zhuǎn)移，參與調(diào)解腫瘤的進(jìn)展。

綜上所述，miR- 30c及其靶基因MTA- 1在子宮內(nèi)膜癌組織生長(zhǎng)及侵襲、轉(zhuǎn)移過(guò)程中起著重要的調(diào)節(jié)作用，為進(jìn)一步研究其具體調(diào)節(jié)機(jī)制及進(jìn)一步探尋以miR- 30c- MTA- 1通路為靶點(diǎn)的新型靶向治療方法奠定了基礎(chǔ)，為臨床治療提供了新的方向。

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The function of miRNA- 30c and MTA- 1 in xenograft of endometrial carcinoma in nude mice

KONG Xiang- yi,ZHOU Huai- jun

(DepartmentofGynecologyandObstetrics,NanjingDrumTowerHospitalAffiliatedto

NanjingUniversityMedicalSchool，Nanjing210008,China)

[Abstract]Objective：To investigate the inhibition effect on tumor growth by up- regulating the expression of miRNA- 30c in nude mice model. Methods：Subcutaneous xenografts of mude mice models with Ishikawa cells were established，the mice were treated with miRNA- 30c expression plasmid intratumorally，controled by negative control plasmid and PBS.Then， the xenograft volume was measured and inhibition ratio of tumor proliferation was calculated. Moreover，the expression of miRNA- 30c was analysed by Realtime- PCR and the expression of MTA- 1 protein was analysed by Western blot， the microvessel density and expression of E- cadherin were detected by immunohistochemistry. Results：The subcutaneous xenografts models of mude mice were established successfully.Treatment with miRNA- 30c expression plasmid inhibited the growth of xenograft and the inhibitory rate was(46.98±5.13)%(P<0.01).The expression of miRNA- 30c was up- regulated(P<0.05) and MTA- 1 protein expression was down- regulated (P<0.05)respectively. Immunohistochemistry showed that the microvessel density decreased(P<0.05)，the expression of E- cadherin increased(P<0.05). Conclusion：Up- regulation of miRNA- 30c can inhibit the growth of xenograft in nude mice model of endometrial carcinoma by down- regulating MTA- 1．

[Key words]miRNA- 30c； endometrial carcinoma； nude mice； xenograft

[收稿日期]2015- 12- 24[修回日期] 2016- 01- 28

[基金項(xiàng)目]中央高校基本科研業(yè)務(wù)苗圃項(xiàng)目(021414340294)

[作者簡(jiǎn)介]孔祥怡(1987-)，女，黑龍江牡丹江人，住院醫(yī)師。E- mail:xiangyikong@126.com

[通信作者]周懷君E- mail:zhouhj2007@126．com

[中圖分類號(hào)]R737.33； R- 33； R- 332

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A

[文章編號(hào)]1671- 6264(2016)03- 0364- 07

doi：10.3969/j.issn.1671- 6264.2016.03.016

[引文格式] 孔祥怡,周懷君.miRNA- 30c及其靶基因MTA- 1在子宮內(nèi)膜癌裸鼠皮下移植瘤中的作用[J].東南大學(xué)學(xué)報(bào):醫(yī)學(xué)版,2016,35(3):364- 370.

·論著·