家蠶血細(xì)胞特異表達(dá)新基因Bm04862的鑒定及表達(dá)

余霜，蘇晶晶，徐曼，張奎，崔紅娟家蠶基因組生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 西南大學(xué)，重慶　400716

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家蠶血細(xì)胞特異表達(dá)新基因Bm04862的鑒定及表達(dá)

余霜，蘇晶晶，徐曼，張奎，崔紅娟
家蠶基因組生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 西南大學(xué)，重慶400716

余霜, 蘇晶晶, 徐曼, 等. 家蠶血細(xì)胞特異表達(dá)新基因Bm04862的鑒定及表達(dá). 生物工程學(xué)報(bào), 2016, 32(2): 241–249.

Yu S, Su JJ, Xu M, et al. Identification and characterization of a novel hemocyte specific gene Bm04862 in silkworm, Bombyx mori. Chin J Biotech, 2016, 32(2): 241–249.

摘 要:通過(guò)家蠶組織芯片數(shù)據(jù)篩選得到家蠶血細(xì)胞特異表達(dá)基因Bm04862，并首次對(duì)該基因進(jìn)行了克隆與鑒定。應(yīng)用RACE技術(shù)獲得該基因全長(zhǎng)，并對(duì)其進(jìn)行生物信息學(xué)分析。Bm4862基因開(kāi)放閱讀框819 bp，共編碼273 個(gè)氨基酸殘基，預(yù)測(cè)其為跨膜蛋白；通過(guò)qRT-PCR技術(shù)對(duì)其時(shí)空表達(dá)情況進(jìn)行分析；結(jié)果顯示Bm04862基因在家蠶血細(xì)胞中特異高表達(dá)，并在4齡眠期和預(yù)蛹2 d時(shí)達(dá)到表達(dá)高峰；構(gòu)建Bm04862真核表達(dá)載體，轉(zhuǎn)染Sf9細(xì)胞分析其蛋白的亞細(xì)胞定位情況，結(jié)果表明其定位于細(xì)胞核膜和部分細(xì)胞質(zhì)中。此外，用大腸桿菌刺激蠶體24 h后，Bm04862基因表達(dá)水平顯著上調(diào)，表明大腸桿菌可以誘導(dǎo)該基因的表達(dá)，由此推測(cè)該基因可能參與家蠶的免疫應(yīng)答。這為深入研究該基因在家蠶免疫反應(yīng)中的功能提供了參考。

關(guān)鍵詞:家蠶，血細(xì)胞特異基因，Bm04862，表達(dá)特征，亞細(xì)胞定位

Received: March 17, 2015; Accepted: June 8, 2015

Supported by: National Natural Science Foundation of China (No. 31172268), National Basic Research Program of China (973 Program) (No. 2012CB114600).

國(guó)家自然科學(xué)基金 (No. 31172268)，國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃 (973計(jì)劃) (No. 2012CB114600) 資助。

昆蟲血細(xì)胞在修復(fù)組織損傷、清除體內(nèi)凋亡組織與細(xì)胞以及對(duì)抗病原體、微生物等外源物侵襲的免疫反應(yīng)中都發(fā)揮著至關(guān)重要的作用[1-4]。昆蟲與哺乳動(dòng)物的先天免疫系統(tǒng)在結(jié)構(gòu)和功能上十分相似[5-6]，且只具有先天性免疫系統(tǒng)，這為先天性免疫的研究提供了一個(gè)良好的模型。……