肺腺癌神經(jīng)內(nèi)分泌分化及其臨床病理學(xué)的相關(guān)性

黎濱茹　姜又紅

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肺腺癌神經(jīng)內(nèi)分泌分化及其臨床病理學(xué)的相關(guān)性

黎濱茹姜又紅

【摘要】目的 探討肺腺癌的神經(jīng)內(nèi)分泌分化（NED）的情況及與肺腺癌轉(zhuǎn)移及分化程度的關(guān)系。方法 收集遼寧省腫瘤醫(yī)院2012年3月～2015年2月手術(shù)切除，并經(jīng)病理切片證實為肺腺癌的病例96例，采用非生物素二步法免疫組化，檢測不同生物學(xué)行為肺腺癌組織中神經(jīng)內(nèi)分泌分化特異性標(biāo)記物，神經(jīng)細胞粘附分子（CD 56）、嗜鉻蛋白A（CgA）和突觸素（Syn）的表達情況。結(jié)果 96例肺腺癌中伴神經(jīng)內(nèi)分泌分化者21例（占21.88%），CD 56、Syn和CgA陽性表達率分別為23.96%、20.83%和19.79%。CD 56、Syn陽性表達及神經(jīng)內(nèi)分泌分化與腫瘤分化程度和腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)（P＜0.05），CgA陽性表達及神經(jīng)內(nèi)分泌分化僅與腫瘤分化程度相關(guān)（P＜0.05）。結(jié)論 肺腺癌伴有神經(jīng)內(nèi)分泌分化可以作為腫瘤轉(zhuǎn)移及分化程度的判斷指標(biāo)之一。

【關(guān)鍵詞】肺腺癌；神經(jīng)內(nèi)分泌分化；神經(jīng)細胞粘附因子；嗜鉻蛋白A；突觸素

作者單位：110001沈陽，中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院腫瘤生物治療研究室

原發(fā)性支氣管肺癌的發(fā)病率和病死率呈逐年上升趨勢，其中肺腺癌是其中常見的病理類型［1］。腫瘤組織內(nèi)的神經(jīng)內(nèi)分泌分化（Neuroendocrine Differentiation，NED）指腫瘤組織中部分腫瘤細胞出現(xiàn)NED現(xiàn)象，研究發(fā)現(xiàn)［2］，NED現(xiàn)象廣泛存在于各種非內(nèi)分泌組織來源的惡性腫瘤中，其中以腺癌多見。NED的腫瘤細胞可以通過多種分泌途徑，分泌各種活性物質(zhì)，刺激周圍腫瘤細胞的生長，增強癌細胞的增殖和抗凋亡的能力，造成比一般惡性腫瘤更不良的預(yù)后。但惡性腫瘤細胞朝向神經(jīng)內(nèi)分泌方向的分化，是腫瘤細胞在侵襲演進過程中的一種轉(zhuǎn)分化，還是腫瘤組織本身所具有的一種非特異性的變化，目前尚未確定。為此我們選擇CD 56（神經(jīng)細胞粘附分子，Neural Cell Adhesion Molecule，NCAM）、嗜鉻蛋白A（chromogranin A，CgA）和突觸素（synaptophysin，Syn）三種NED特異性標(biāo)記物，通過觀察它們在不同生物學(xué)行為肺腺癌組織中的表達情況，探討肺腺癌的NED與肺腺癌腫瘤淋巴轉(zhuǎn)移、癌細胞分化程度的相關(guān)性，為臨床治療與預(yù)后評估提供參考。

1　材料與方法

1.1臨床資料

收集遼寧省腫瘤醫(yī)院2012年3月～2015年2月手術(shù)切除，并經(jīng)病理切片證實為肺腺癌的病例及石蠟標(biāo)本96例，男性60例，女性36例，年齡38～70歲，中位年齡52歲。腫瘤大小、浸潤部位及臨床分期，按國際抗癌聯(lián)盟第7版肺癌TNM分期，其中T1：51例，T2：29例，T3：8例，T4：8例；Ⅰ期46例，Ⅱ期31例，Ⅲ期19例。患者行肺葉切除術(shù)者67例，全肺切除術(shù)者9例，聯(lián)合肺葉切除術(shù)者8例，妥協(xié)性亞肺切除術(shù)12例。排除其他肺部組組疾病、免疫性疾病史、近期使用抗生素、吸煙、長期使用糖皮質(zhì)激素等免疫抑制劑史的患者。

1.2試劑與檢測方法

在遼寧省腫瘤醫(yī)院病理科找出96例腫瘤患者的蠟塊標(biāo)本，將標(biāo)本制成4μm厚連續(xù)石蠟切片，每張切片均標(biāo)記上患者的編號。神經(jīng)細胞粘附分子（CD 56）、嗜鉻素A（CgA）和突觸素（Syn）單克隆抗體購于SANTA CRUZ公司，非生物素二步法免疫組化檢測試劑盒購于福建邁新生物技術(shù)有限公司，并按照說明書操作進行免疫組化檢測。

1.3結(jié)果判斷

免疫組化陽性細胞判斷結(jié)果參照標(biāo)準(zhǔn)［3］：陽性細胞的表達主要為背景清晰，胞漿內(nèi)可見明確的棕黃色或棕褐色顆粒，每片切片隨機計數(shù)10個高倍（×400）視野，陽性染色的目標(biāo)細胞≤5%為陰性（-），＞5%視為陽性（+），其中陽性細胞染色計數(shù)5%～10%視為（+），10%～20%為（++），20%～50%為（+++），有下列情況之一者可確定為神經(jīng)內(nèi)分泌分化：CD 56、CgA或者syn陽性表達計數(shù)為+++，或CD 56、Cga和Syn三者中至少有兩種標(biāo)志物陽性表達均為+～++。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法

所得數(shù)據(jù)使用SPSS15.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行處理分析，計數(shù)資料用n，%表示，采用χ2檢驗或秩和檢驗，檢驗水準(zhǔn)α=0.05。

2　結(jié)果

2.1NED標(biāo)記物在肺腺癌中的表達

三種神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)記物均在肺腺癌的細胞膜或細胞質(zhì)著色，見圖1，呈粗細不等的棕色顆粒，其中CD 56呈彌漫性細胞膜和（或）細胞質(zhì)著色，見圖2，Syn細胞膜、細胞質(zhì)均有著色，見圖3，CgA在細胞質(zhì)呈灶性分布或為彌漫性著色，見圖4。96例肺腺癌患者中伴神經(jīng)內(nèi)分泌分化者21例（21.88%），不伴有神經(jīng)內(nèi)分泌分化者75例，CD 56陽性表達例數(shù)23例（23.96%），Syn陽性表達例數(shù)20例（20.83%），CgA陽性表達例數(shù)為19例（19.79%）。

2.2淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況與NED分化及其標(biāo)志物的表達

圖1　肺腺癌腫瘤細胞（10×40）

圖2　肺腺癌腫瘤細胞CD　56　表達（10×40）

圖3　肺腺癌腫瘤細胞CgA表達（10×40）

圖4　肺腺癌腫瘤細胞Syn表達（10×40）

淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況與CD 56、Syn與CgA陽性表達及神經(jīng)內(nèi)分泌分化情況分析，見表1。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中CD 56與Syn陽性表達與神經(jīng)內(nèi)分泌分化情況均高于無轉(zhuǎn)移組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），但CgA陽性表達兩組之間對比，差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義（P ＞0.05）。

表1　淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況與CD 56、Syn與CgA陽性表達及神經(jīng)內(nèi)分泌分化（例）

2.3肺腺癌分化程度與NED分化及其標(biāo)志物的表達比較

肺腺癌分化程度與CD 56、Syn及CgA陽性表達及神經(jīng)內(nèi)分泌分化情況分析，見表2。采用非參數(shù)檢驗可知道，肺腺癌分化程度低、中、高三組中，CD 56、Syn、CgA陽性表達及神經(jīng)內(nèi)分泌分化情況差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），其中低分化組上述指標(biāo)高于其余兩組。

表2　肺腺癌分化程度與CD 56、Syn及CgA陽性表達及神經(jīng)內(nèi)分泌分化（例）

3　討論

惡性腫瘤有許多特征性表現(xiàn)，但細胞的異常分化是其基本特征表現(xiàn)之一。腫瘤組織中常有部分腫瘤細胞出現(xiàn)NED現(xiàn)象，它不同于一般內(nèi)分泌腺腫瘤和神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤，其是腫瘤組織的一種伴隨成分［4］。多種非神經(jīng)內(nèi)分泌器官中存在NED現(xiàn)象，惡性腫瘤細胞向NED不但顯示了腫瘤主體細胞的結(jié)構(gòu)特點，又顯示了胞漿內(nèi)分泌顆粒。

神經(jīng)內(nèi)分泌細胞突起在腺癌病灶中缺乏特征性，在低分化腺癌中神經(jīng)內(nèi)分泌化細胞呈圓形、卵圓形或不規(guī)則形，極性消失，這些神經(jīng)內(nèi)分泌化的細胞與其周圍的腫瘤細胞一樣具有異型性；神經(jīng)內(nèi)分泌化細胞在高分化腺瘤中常呈錐形或長條形，頂端朝向腺腔側(cè)。在腫瘤組織中的神經(jīng)內(nèi)分泌細胞，與其所在器官原發(fā)癌的類型、分期、分級和預(yù)后關(guān)系均存在相關(guān)性。一部分非小細胞肺癌也具有NED特征，其發(fā)生率在10%～30%，在腺癌中最為常見。

目前認(rèn)為CD 56、CgA、Syn是一組特異性和敏感性較好的共同NED的標(biāo)記物。CD 56是神經(jīng)細胞粘附分子中的一種，是唾液酸糖蛋白，屬免疫球蛋白超家族成員，在神經(jīng)系統(tǒng)的生長發(fā)育中發(fā)揮著重要的作用，與多種腫瘤的進展和轉(zhuǎn)移相關(guān)。CgA是一種酸性分泌顆粒基質(zhì)糖蛋白，是某些生物活性肽的前提，可以參與分泌顆粒基質(zhì)的構(gòu)成，組織和加工分泌顆粒，具有調(diào)節(jié)機體神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫網(wǎng)絡(luò)的功能，是目前國際公認(rèn)的特異性較強的神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)記物。Syn是與突觸結(jié)構(gòu)和功能密切相關(guān)的膜蛋白，分子量為38 kD。在神經(jīng)內(nèi)分泌細胞中Syn可能參與突觸囊泡的導(dǎo)入、轉(zhuǎn)運以及神經(jīng)遞質(zhì)的釋放全過程，在突觸囊泡再循環(huán)和突觸的發(fā)生中具有重要作用，可將突觸素作為一種非特異的神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)記物。

本次研究結(jié)果顯示，NED現(xiàn)象與腫瘤淋巴轉(zhuǎn)移及腫瘤分化程度相關(guān)，并且癌細胞分化程度越低，CD 56、Syn與CgA陽性表達及NED的陽性率越高。腫瘤細胞的生長、增殖與凋亡，可能受到周圍NED的腫瘤細胞分泌各種活性物質(zhì)的刺激，導(dǎo)致不良的預(yù)后。腺癌伴有NED的發(fā)生率高于其他類型的肺癌，其中低分化癌的NED現(xiàn)象高于高分化，CD 56、CgA和Syn一般在腺癌中表達較多，并且CD 56、CgA和Syn在低分化癌中表達明顯，說明腫瘤分化程度越低，越容易形成NED現(xiàn)象，產(chǎn)生異質(zhì)性肺癌細胞。

綜上所述，肺腺癌伴有NED可以作為腫瘤轉(zhuǎn)移及分化程度的判斷指標(biāo)之一，但肺腺癌病理學(xué)中NED的異質(zhì)性，其生物學(xué)行為及其臨床上有無特殊性，NED與患者術(shù)后生存預(yù)后的相關(guān)性還需進一步研究。

參考文獻

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［4］靳博華，劉建強，胡建立，等.老年惡性腫瘤70例臨床分析［J］.癌癥進展，2014（1）：98-102.

Clinical Significance of Neuroendocrine Differentiation in Lung Adenocarcinoma

LI Binru JIANG Youhong，Department of Tumor Biological therapy，The First Affiliated Hospital of China Medical University，Shenyang 110001，China

［Abstract］Objective To explore the neuroendocrine differentiation of neuroendocrine in patients with lung adenocarcinoma and tumor lymphatic metastasis and its correlation to cell differentiation degree and metastases.Methods Collected 96 patients who underwent surgical resection and confirmed by pathological biopsy of lung adenocarcinoma in our hospital from March 2012 to February 2015，using the immunohistochemical detection to detect the expression of biotin ldpe-g-nvp，such as CgA，CD56 and Syn in lung adenocarcinoma tissue.Results Among the 96 patients，21 cases（21.88%） appearred neuroendocrine differentiation，positive expression of CD 56，Syn and CgA were 23.96%，20.83% and 19.79% respectively.The positive expression of CD56 and Syn were related to neuroendocrine differentiation，tumor differentiation degree and tumor lymphatic metastasis（P＜0.05），while positive expression of CgA was only related to neuroendocrine differentiation（P＜0.05）.Conclusion Lung adenocarcinoma with neuroendocrine differentiation can be used as a tumor metastasis and differentiation degree of judgment indicator.

［Key words］Lung adenocarcinoma，Neuroendocrine differentiation，CD56，Chromogranin A，Synaptophysin

【中圖分類號】R36

【文獻標(biāo)識碼】A

【文章編號】1674-9308（2016）08-0041-03

doi：10.3969/j.issn.1674-9308.2016.08.028

通訊作者：姜又紅，E-mail：hong_jyh@163.com