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不同商品規格等級羌活的鎮痛抗炎作用對比研究

2016-07-02 08:14:22陳虹宇尹顯梅陳玲王瀟霖鄭瀟瀟余梅馬逾英蔣桂華
中藥與臨床 2016年2期

陳虹宇,尹顯梅,陳玲,王瀟霖,鄭瀟瀟,余梅,馬逾英,蔣桂華

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不同商品規格等級羌活的鎮痛抗炎作用對比研究

陳虹宇,尹顯梅,陳玲,王瀟霖,鄭瀟瀟,余梅,馬逾英,蔣桂華

[摘要]目的:擬對不同商品等級的羌活進行鎮痛、抗炎等藥效作用的對比研究,找到不同商品等級羌活在鎮痛、抗炎作用方面的差異。方法:通過醋酸致小鼠扭體法、二甲苯致小鼠耳廓腫脹法進行家種羌活、蠶羌、竹節羌、條羌、尾羌和疙瘩頭鎮痛、抗炎方面的藥效學實驗。鎮痛作用比較潛伏期和扭體次數;抗炎作用比較腫脹度和腫脹抑制率。結果:與空白組相比,蠶羌水提液組和疙瘩頭水提液組在潛伏期和扭體次數上有極顯著性差異(P<0.01),竹節羌水提液組和家種羌活水提液組在扭體次數上有顯著差異(P<0.05),條羌水提液組和尾羌水提液組無顯著差異;與空白對照組相比,蠶羌水提液組和疙瘩頭水提液組在耳腫脹度和腫脹抑制率上有極顯著性差異(P<0.01),竹節羌水提液組及家種羌活水提液組有顯著差異(P<0.05),條羌水提液組和尾羌水提液組無顯著差異。結論:不同商品等級的羌活在鎮痛、抗炎作用上有差異,以蠶羌和疙瘩頭作用最強,竹節羌和家種羌活作用其次,條羌和尾羌作用不明顯。本實驗為羌活的商品規格等級的劃分提供科學依據。

[關鍵詞]羌活;等級;鎮痛;抗炎;藥效學

[作者單位]成 都中醫藥大學藥學院 中藥材標準化教育部重點實驗室 中藥資源系統研究與開發利用省部共建國家重點實驗室培育基地,四川 成都 611137

Tel:15281088119 Email:1073022358@qq.com

Email:11469413@qq.com

羌活為傘形科植物羌活Notopterygium incisum Ting ex H.T Chang或寬葉羌活Notopterygium forbesii Boiss.的干燥根及根莖[1]。其藥性溫,祛寒濕,無毒,具有祛除風濕疼痛,解表散寒等功效,主要分布于中國的青海、四川、西藏、陜西、甘肅[2]。現代研究表明,羌活根莖中含有多類活性成分,如香豆素類、揮發油類、氨基酸、糖類等[3-9]。羌活具有抗炎、鎮痛、增強免疫等的作用[10-13]。

1984年制定的部頒標準《七十六種藥材商品規格標準》[14]中將羌活劃分為川羌活和西羌活,川羌又分為一等蠶羌和二等條羌,西羌分為一等蠶羌、二等大頭羌和三等條羌。隨著野生羌活資源的減少,目前市場上羌活商品大部分以統貨銷售,部分分為蠶羌、頭羌和尾羌,且隨著野生撫育技術的成熟,藥市上已有家種羌活銷售。為了探討野生與家種羌活、傳統經驗劃分的羌活商品等級與藥效作用的相關性,在進行不同規格等級羌活的化學成分含量對比研究的同時(另文報道),本實驗考察不同商品等級羌活的藥效作用差異,從而為修訂羌活藥材商品規格等級標準提供參考依據。

1 儀器和試藥

1.1 儀器

BP211D十萬分之一電子天平(瑞士Sartorius);R-210旋轉蒸發器(瑞士BUCHI);SHB-Ⅲ循環水式多用真空泵(鄭州長城科工貿);KQ320e型超聲波清洗器(江蘇昆山);0.9mm的打孔器。

1.2 試藥

1.3 材料

實驗所用羌活于2013年自采于四川小金縣兩河鄉,經成都中醫藥大學蔣桂華教授鑒定為傘形科植物羌活Notopterygium incisum Ting ex H. T. Chang.的干燥根及根莖。按照性狀不同,參考《中國藥典》及《七十六種藥材商品規格標準》,將羌活分為野生和家種兩類,野生羌活又分為蠶羌、竹節羌、條羌、尾羌、疙瘩頭五種等級。將藥材分別粉碎,稱其重量,按1∶10(m:V)將羌活粉末與蒸餾水混合,100 ℃水浴1 h,冷卻后兩層紗布過濾,收集濾液,殘渣用于再次提取,重復提取兩次,第二次水浴加水量及時間同第一次,合并所得濾液。用旋轉蒸發儀減壓濃縮,濃縮所得體積,備用。

1.4 實驗動物

ICR級昆明種小鼠(體重22±2g),由四川省醫學科學院實驗動物研究所提供,動物合格證號:SCXK(川)2014-15。雌雄各半,稱重標記。

2 方法

經預實驗[12],得出不同等級羌活均有鎮痛、抗炎作用,因同等實驗條件對比考察,故進行最大給藥量測定,即給藥實驗組只進行高劑量組研究。

2.1 鎮痛作用對比研究

取ICR級昆明種小鼠80只小鼠,雌雄各半,稱重標記,隨機分為8組,每組10只,分別為陽性對照組、空白對照組、羌活水提液組(蠶羌水提液組、條羌水提液組、竹節羌水提液組、尾羌水提液組、疙瘩頭水提液組、家種羌活水提液組)。環境適應性喂養七天后,以小鼠耐受的濃度(0.2 mL/10 g),灌胃給藥,并且空白對照組給予等量的蒸餾水,陽性對照組給予等量的0.50%的阿司匹林混懸液。給藥后即可常規飲食與飲水,連續灌胃5天。第4天灌胃后,禁食禁水8小時,第5天灌胃后給藥30 min后,各鼠分別腹腔注射0.6%的冰乙酸溶液0.1 mL/10 g,計時,觀察15 min內各鼠出現扭體反應的潛伏期和扭體反應次數,用SPSS19.0處理實驗數據。小鼠出現扭體反應的標準統一為腹部收縮、軀體扭曲、后肢伸展及蠕行。

(1)人力投資。蘇州工業園特別注重人才的培養和引進,不僅引進了諸中科大、中國人民大學等26所國內高等教育院校,還引進了如美國加州伯克利大學、加拿大滑鐵盧大學等世界名校資源。此外,園區出臺各種優惠政策引進高層次人才,如2017年人才薪酬補貼每人3萬元、4萬元、5萬元不等,共有787名碩士及以上學位的領軍、高層次和緊缺骨干人才獲得了此項補貼,此舉為園區發展提供源源不斷的動力。

鎮痛率(%) = (對照組平均扭體次數-給藥組平均扭體次數) /對照組平均扭體次數×100%

2.2 抗炎作用對比研究實驗

ICR級昆明種小鼠80只,全為雄性,稱重標記,隨機分為8組,每組10只,分別為空白對照組、陽性對照組、蠶羌水提液組(條羌水提液組、竹節羌水提液組、尾羌水提液組、疙瘩頭水提液組、家種羌活水提液組)。環境適應性喂養七天后,連續給藥灌胃5天,除陽性對照組,每日灌胃0.2 mL/10 g,空白對照組給予同體積的蒸餾水,陽性對照組于第三天連續腹腔注射地塞米松磷酸鈉注射液0.1 mL/10 g,于第5天將小鼠灌胃或腹腔注射給藥半個小時后,將小鼠右耳涂抹上50 μL二甲苯,左耳不涂予以對照,過半小時后將小鼠拖脊椎猝死,用打孔器分別在左、右耳同一部位打下等大的圓形耳片,用分析天平稱重,記錄數據,用SPSS19.0處理實驗數據。

腫脹抑制率(%)=(對照組平均腫脹度-給藥組平均腫脹度)/對照組平均腫脹度×100%

3 實驗結果

3.1鎮痛作用

采用冰醋酸致小鼠扭體法,統計結果見表1。

表1 羌活水提液對醋酸致小鼠扭體的影響(x±SD)

注:與空白組比較,*P<0.05,**P<0.01

從表1可以看出,與空白組相比,蠶羌水提液組和疙瘩頭水提液組在潛伏期和扭體次數上有極顯著性差異(P<0.01);竹節羌水提液組和家種羌活水提液組在扭體次數上有顯著差異(P<0.05);條羌水提液組、尾羌水提液組無明顯差異。

3.2 抗炎作用

采用二甲苯致小鼠耳廓腫脹法,統計結果見表2。

表2 羌活水提液對二甲苯致小鼠耳廓腫脹實驗的影響(x±SD)

從表2可以看出,與空白對照組相比,蠶羌水提液組和疙瘩頭水提液組在耳腫脹度和腫脹抑制率上有極顯著性差異(P<0.01),而竹節羌水提液組及家種羌活水提液組有顯著差異(P<0.05),條羌水提液組和尾羌水提液組無顯著差異。

4 結論與討論

4.1 鎮痛作用

蠶羌水提液組和疙瘩頭水提液組鎮痛作用最明顯;竹節羌水提液組和家種羌活水提液組有鎮痛作用,但作用較蠶羌、疙瘩頭弱;條羌水提液組和尾羌水提液組鎮痛作用不明顯。

4.2 抗炎作用

蠶羌水提液組和疙瘩頭水提液組抗炎作用最明顯;竹節羌水提液組和家種羌活水提液組抗炎作用明顯;條羌水提液組及尾羌水提液組抗炎作用不明顯。

實驗結果表明不同商品等級羌活在抗炎鎮痛方面有一定的差異,蠶羌在抗炎鎮痛方面效果均最優,這與傳統經驗劃分的羌活規格等級標準基本符合。在抗炎鎮痛作用上蠶羌(疙瘩頭)>竹節羌(家種羌)>條羌(尾羌)。本實驗結果對羌活規格等級的修訂提供參考。

[參考文獻]

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[2]單人驊,佘孟蘭.中國植物志[M].北京:科學出版社,1979,55 (1):188.

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[5]易增興.羌活與獨活水煎液的抗炎鎮痛作用[J].宜春學院學報,2013,35(3):68.

[6]王冬梅,王珍.栽培與野生羌活中4種化合物含量及抗炎作用比較[J].中國藥房,2014,25(3):199.

[7]馬濤.羌活的研究進展[J].吉林農業,2011,(12):239.

[8]王一濤.羌活的藥理學研究[J].中藥藥理與臨床,1996(4):12.

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[12]易增興.羌活與獨活水煎液的抗炎鎮痛作用[J].宜春學院學報,2013,35(3):68.

[13]陳智煌,廖華軍,劉晨,等.羌活揮發油的GC-MS分析及其抗炎鎮痛的藥理作用初探[J].海峽藥學,2015,27(8):20.

[14]國家醫藥管理局,中華人民共和國衛生部.七十六種藥材商品規格標準[M].國家醫藥管理局中華人民共和國衛生部,1984:32.

[15]徐叔云.藥理實驗方法學[M]. 北京:人民衛生出版社,1991.

(責任編輯:陳思敏)

Comparison of analgesic and anti-inflammatory effects of Qianghuo of different commercial specification

CHEN Hong-yu, YINXian-mei, CHEN Ling, WANG Xiao-lin, ZHENG Xiao-xiao, YU Mei, MA Yu-ying, JIANG Gui-hua//( School of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine; Key Laboratory of Standardization for Chinese Herbal Medicine, Ministry of Education; National Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources, Chengdu 611137, Sichuan)

[Abstract]Objective: This study aimed to compare analgesic and anti-inflammatory effects of Qianghuo of different commercial specification to find whether differences exist. Method: Acetic acid-induced writhing test in mice and xylene-induced mouse ear swelling were used to investigate analgesic and anti-inflammatory effects of cultivated Qianghuo, Chanqiang, Zhujieqiang, Tiaoqiang, Weiqiang and Gedatou. Latency and writhing times were used as indexes of analgesic effect. Swelling degree and swelling suppression rate were used as indexes of anti-inflammatory effects. Result: Compared with the control group, significant difference (p<0.01) of latency and writhing times can be found in Chanqiang water extract and Gedatou water extract group. Significant difference (p<0.05) of writhing times was found in Zhujieqiang and cultivated Qianghuo water extract group compared with control group, but no significant difference was found in Tiaoqiang and Weiqiang water extract. Compared with the control group, significant difference (p<0.01) of ear swelling degree and the inhibition rate was found in Chanqiang water extract and Gedatou water extract group. Significant difference (p<0.05) was found in Zhujieqiang and cultivated Qianghuo water extract group compared with control group, but no significant difference was found in Tiaoqiang and Weiqiang water extract. Conclusion: Different analgesic, anti-inflammatory effects can be found in different commodity grades of Qianghuo. Chanqiang and Gedatou show the strongest effect. Zhujieqiang and cultivated Qianghuo show medium effect. But no effect can be found in Tiaoqiang and Weiqiang. The results provide experimental evidence for the division of Qianghuo commercial specification.

[Key words]Qianghuo; commercial specification; analgesic; anti-inflammatory; pharmacology

[中圖分類號]R 285.5

[文獻標識碼]A

[文章編號]1674-926X(2016)02-005-03

[基金項目]中 國中醫科學院-中央本級重大增減支項目:中藥資源區域質量和商品規格(項目編號:20603020108)

[作者簡介]陳 虹宇(1989- ),女,在讀碩士研究生,主要從事中藥品種與質量研究

[通訊作者]蔣 桂華(1970- ),女,四川成都人,教授,主要從事中藥品種與質量研究

[收稿日期]2015-11-11

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