蝴蝶蘭F3′5′H基因轉(zhuǎn)化OT雜種百合Robina的研究

劉愛玲,劉雅莉,婁　倩,張海芹

(西北農(nóng)林科技大學(xué) 旱區(qū)作物逆境生物學(xué)國家重點實驗室,農(nóng)業(yè)部西北地區(qū)園藝作物生物學(xué)與種質(zhì)創(chuàng)制重點實驗室,陜西楊陵,712100)

蝴蝶蘭F3′5′H基因轉(zhuǎn)化OT雜種百合Robina的研究

劉愛玲,劉雅莉*,婁倩,張海芹

(西北農(nóng)林科技大學(xué) 旱區(qū)作物逆境生物學(xué)國家重點實驗室,農(nóng)業(yè)部西北地區(qū)園藝作物生物學(xué)與種質(zhì)創(chuàng)制重點實驗室,陜西楊陵,712100)

摘要:為了定向育種獲得藍色百合，該研究以百合Robina為藍色基因最佳受體，以其花絲誘導(dǎo)產(chǎn)生的胚性愈傷組織和再生小植株小鱗片作為轉(zhuǎn)化材料，利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法，將蝴蝶蘭F3′5′H基因?qū)氚俸蟁obina中。結(jié)果表明：以小鱗片為轉(zhuǎn)化材料，預(yù)培養(yǎng) 3 d，OD600為0.8，侵染10 min，共培養(yǎng)3 d，加入100 μmol/L AS穩(wěn)定轉(zhuǎn)化率最高為12.78%；而以胚性愈傷為轉(zhuǎn)化材料，預(yù)培養(yǎng)2 d，OD600為0.8，侵染10 min，共培養(yǎng)3 d，加入100 μmol/L AS穩(wěn)定轉(zhuǎn)化率最高為12.22%。2種轉(zhuǎn)化材料的最適潮霉素篩選濃度均為20 mg/L。對抗性植株分別進行PCR和反轉(zhuǎn)錄PCR檢測,獲得9個陽性株系，Southern印記分析進一步確定了6株轉(zhuǎn)基因百合中攜帶藍色基因F3′5′H，為后續(xù)進一步獲得藍色百合奠定了基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞:F3′5′H；Robina百合；胚性愈傷組織；小鱗片；遺傳轉(zhuǎn)化

OT雜種百合 Robina (Liliumtenuifoliumoriental×trumpet)是東方百合雜交系(oriental hybrids)與喇叭型百合雜交系(trumpet hybrids)的雜交種[1]。其莖稈粗壯，花大艷麗，香氣濃郁，是百合中比較名貴的切花品種[2]。 百合Robina的花苞多為3～5個，花朵顏色為深粉紅色，高度120～135 cm，生長周期100 d左右，喜歡排水性好的微酸性土壤，適宜溫度15～28 ℃，需要經(jīng)過低溫春化過程后才能開花，無葉燒現(xiàn)象[3]。如果生長環(huán)境適宜， Robina百合的花朵直徑可達18～20 cm，為百合中花比較大的品種之一。……