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廣藿香香葉醇合酶基因克隆及表達分析

2016-07-04 07:55:32歐陽蒲月曾少華莫小路
西北植物學報 2016年5期

歐陽蒲月,曾少華,莫小路*

(1 廣東食品藥品職業學院,廣州 510520;2 中國科學院華南植物園,廣州 510650)

廣藿香香葉醇合酶基因克隆及表達分析

歐陽蒲月1,曾少華2,莫小路1*

(1 廣東食品藥品職業學院,廣州 510520;2 中國科學院華南植物園,廣州 510650)

摘要:香葉醇合酶(geraniol synthase,GES)是香葉醇形成過程中非常重要的酶,是萜類代謝途徑的限速酶。根據課題組廣藿香轉錄組數據中的GES 轉錄本序列設計基因全長擴增引物,采用RT-PCR方法克隆了廣藿香GES基因的全長cDNA序列。對該基因進行了相關的生物信息學分析,并利用熒光實時定量PCR法檢測了PcGES1基因在4個廣藿香栽培種中不同時期莖、葉中的表達情況。結果顯示:廣藿香GES基因包含一個完整的ORF框,長1 734 bp,編碼577個氨基酸,命名為PcGES1,GenBank登錄號為KF926075 ;PcGES1基因編碼的氨基酸序列與羅勒GES基因編碼的氨基酸序列最為相近。廣藿香GES蛋白定位在葉綠體中,無跨膜區域。PcGES1主要在葉中表達,老葉中表達量最高;從不同栽培種來看,PcGES1在石牌廣藿香和高要廣藿香中表達模式相似,在海南廣藿香與印尼廣藿香中表達相似,在海南廣藿香老葉中表達最高。該研究結果為進一步闡明廣藿香萜類代謝途徑奠定了基礎。

關鍵詞:廣藿香;香葉醇合酶;萜類合成

香葉醇合酶(geraniol synthase,GES)是香葉醇形成過程中非常重要的酶,是環烯醚萜類成分合成途徑的限速酶。2007年,以色列科學家向西紅柿中成功地導入了一種檸檬羅勒基因,該基因能夠制造一種香葉醇合酶,從而使西紅柿產生類似檸檬的芳香氣味,花果香味的新型轉基因西紅柿誕生了。……

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