當歸片對白血病患者血清葉酸、VB12及EPO的影響

羅偉，冀林華，崔森，馬曉靜，馮婷婷，殷玉娟

(青海大學附屬醫院 血液科，青海 西寧 810001)

當歸片對白血病患者血清葉酸、VB12及EPO的影響

羅偉Δ，冀林華，崔森，馬曉靜，馮婷婷，殷玉娟

(青海大學附屬醫院 血液科，青海 西寧 810001)

目的 探討當歸片對白血病患者血清葉酸、維生素B12(VB12)、促紅細胞生成素(erythropoietin，EPO)及脾臟特異性免疫的影響及其意義。方法 選取青海大學附屬醫院已確診為白血病的患者42例，采用隨機數字表法將患者隨機分為實驗組和對照組，對照組21例，予臨床常規方法治療，實驗組21例，在臨床常規治療基礎上加用當歸片4片/次，每天3次口服。4周為1個療程，共治療2個療程。治療結束后比較2組患者的血清葉酸、VB12及EPO水平、脾臟特異性免疫。結果 與對照組相比，治療后實驗組血清VB12、EPO水平較低，葉酸水平較高(P<0.05)。實驗組VB12和EPO、葉酸和VB12以及葉酸和EPO之間呈正相關(r=0.889，r=0.847，0.844；均P=0.000)。與對照組相比，實驗組淋巴細胞增殖、人白細胞(位點)DR抗原[human leukocyte antigen(locus)，HLA-DR]比例較高，caspase-3細胞陽性指數較低(P<0.05)。結論 當歸片能有效調節白血病患者血清VB12、EPO、葉酸水平，提高脾臟特異性免疫功能。

白血??；當歸片；葉酸；維生素B12；促紅細胞生成素

白血病(ICD-10:C91～C95)系造血系統的一種惡性疾病，是一種預后較差，病死率較高的惡性腫瘤[1]。流行病學統計發現，白血病約占癌癥總發病率的5%，在我國白血病發病率約為2.76/10萬，以急性白血病多見[2]，死亡率為4.1/10萬，其中男性發病率約為女性1.3倍，且兒童期好發，在14歲以下兒童組惡性腫瘤發病的1/3[3]。臨床治療以化療、分子靶向治療等抗白血病治療為主，但化療會給患者帶來胃腸功能受損以及凝血功能抑制等副作用，降低了患者生存質量。當歸多糖是提取自傘形科植物當歸根的有效成分[4]，其制劑為當歸片，研究發現其對機體免疫系統、造血系統具明顯作用以及對抗腫瘤、抗放射性損傷的具有良好療效[5]，臨床已有將當歸片應用于肝癌、乳腺癌等惡性腫瘤治療的報道，但當歸片應用于治療白血病的文獻并不多見。葉酸和VB12是造血的重要原料，而紅細胞生成素(erythropoietin，EPO)濃度水平能夠直接反映造血功能[6]。因此，本研究通過探討當歸片對白血病患者血清葉酸、VB12、EPO水平以脾臟特異性免疫的影響，為白血病患者的治療提供新的思路和方法。

1 資料與方法

1.1 一般資料 病例選擇2012年10月～2014年1月于青海大學附屬醫院以白血病為診斷而收入院的患者42例，采用隨機數字表法隨機分為實驗組和對照組。實驗組21例，男性13例，女性8例，年齡15～50歲，平均(32.2±6.8)歲；病程1～3月，平均(1.67±0.45)個月；其中急性淋巴細胞白血病(acute lymphocytic leukemia，ALL)7例，急性髓系白血病(acute myelogenous leukemia，AML) 4例，慢性淋巴細胞性白血病(chronic lymphocytic leukemia，CLL)6例，慢性髓細胞性白血病(chronic myelocytic leukemia，CML)4例。對照組21例，男性12例，女性9例，年齡14～48歲，平均(31.7±6.5)歲；病程1～3月，平均(1.62±0.43)個月；其中ALL6例，AML4例，CLL7例，CML4例。2組研究對象年齡、性別、病程和病理分型等一般情況比較差異無統計學意義，基線可比。本研究獲得本院倫理委員會批準。

納入及排除標準：根據中國慢性髓性白血病診斷與治療指南(2013年版)[7]中的診斷標準而擬定以下納入標準：①符合白血病的診斷標準；②患者首次入院并診斷為白血?。虎蹮o其他導致凝血功能障礙疾病者；④患者年齡均在10～55歲，病程在1～3個月；⑤X線、超聲等檢查無心、肝、腎等器質性病變者；⑥患者對當歸片無過敏者；⑦患者或其家屬同意并自愿參與本實驗。排除標準：①不愿參與本研究或不符合納入標準者；②既往患有精神神經障礙疾病者；③患有乙肝、艾滋病等具有傳染性較強疾病者；④合并有嚴重肝、腎功能不全疾病患者；⑤患有心肌梗死、心力衰竭、肺心病、呼吸衰竭等重大原發疾病者；⑥年齡低于10歲或超過55歲者；⑦患有精神類疾病不能配合研究者。

1.2 方法

1.2.1 治療方法：所有ALL和CLL患者均采取常規(長春新堿+潑尼松)方案化療：注射用硫酸長春新堿(上海醫藥集團有限公司華聯制藥廠，國藥準字H33020421)隔7天靜注1次，每次2 mg，醋酸潑尼松片(天津力生制藥股份有限公司，國藥準字H12020123)1 mg/kg，每天1次口服。所有AML和CML患者均采取常規(柔紅霉素+阿糖胞苷)方案化療：注射用鹽酸柔紅霉素(深圳萬樂藥業有限公司，國藥準字H44024361)45 mg/m2隔3天靜推1次，注射用鹽酸阿糖胞苷(浙江海正藥業股份有限公司，國藥準字H20054695)150 mg/m2隔7天靜脈滴注1次。所有患者均接受抗感染、成分輸血等對癥治療。實驗組患者在與對照組相同的常規治療基礎上加用當歸片(武漢太福制藥有限公司，國藥準字Z42021841)，4片/次，每天3次口服，以4周為1個療程，共治療2個療程。治療結束后隨訪觀察1年，記錄2組患者生存率以及死亡率。

1.2.2 觀察指標：血清指標采集：所有研究對象均于治療前、治療8周后，采集空腹肘靜脈血4 mL，置于真空采血管中，于室溫下用水平離心機以3000 r/min轉速離心20 min，分離血清，行放射免疫法測定血清中葉酸、VB12及EPO濃度水平(試劑及DXI-800全自動化學發光免疫分析儀由Beckman公司提供)。

脾臟特異性免疫功能檢測方法：2組患者在治療前后抽取空腹肘靜脈血10 mL，2000 r/min離心5 min后，取上清，嚴格按照試劑盒說明書采用Selectra E全自動生化分析儀(上海玉研科學儀器有限公司)檢測淋巴細胞(A值)、人白細胞(位點)DR抗原[human leukocyte antigen(locus)，HLA-DR]及半胱氨酸天冬氨酸特異性蛋白酶(cysteine-containing aspartate-specific proteases，caspase-3)細胞陽性指數，試劑盒由武漢博士德生物技術有限公司提供。

2 結果

2.1 2組患者血清葉酸水平比較 與治療前相比，2組患者葉酸水平升高(P<0.05)，與對照組相比，實驗組治療后葉酸水平較高(P<0.05)。見表1。

表1 2組患者血清葉酸水平比較±s)

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，與對照組治療后比較，compared with control group post-treatment

2.2 2組患者血清VB12水平比較 與治療前相比，2組患者VB12水平降低(P<0.05)，與對照組相比，實驗組治療后VB12水平較低(P<0.05)。見表2。

表2 2組患者血清VB12水平比較

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，與對照組治療后比較，compared with control group post-treatment

2.3 2組患者血清EPO水平比較 結果顯示，與治療前相比，2組患者EPO水平降低(P<0.05)，與對照組相比，實驗組治療后EPO水平較低(P<0.05)。見表3。

表3 2組患者血清EPO水平比較

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，與對照組治療后比較，compared with control group post-treatment

2.4 實驗組血清葉酸、VB12及EPO之間的相關性 實驗組VB12和EPO、葉酸和VB12以及葉酸和EPO之間呈正相關(r=0.889，r=0.847，0.844；均P=0.000)。

2.5 2組患者治療前后脾臟特異性免疫功能情況比較 治療后實驗組患者淋巴細胞增殖高于治療前，2組HLA-DR比例均高于治療前(P<0.05)、caspase-3細胞陽性指數均低于治療后(P<0.05)，與對照組相比，實驗組淋巴細胞增殖、HLA-DR比例較高，caspase-3細胞陽性指數較低(P<0.05)。見表4。

表4 2組患者脾臟特異性免疫功能變化比較±s)

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，與對照組治療后比較，compared with control group post-treatment

3 討論

白血病的發病多與病毒感染和免疫功能異常等生物因素、X線電離輻射等物理因素、多年接觸苯等化學因素、遺傳因素等相關[8]，且隨著當今環境污染加重，尤其是室內外環境污染的加重，白血病的發病率亦呈逐年上升趨勢。當歸多糖是提取自傘形科植物當歸根的有效成分，其制劑為當歸片。祖國醫學認為，當歸具有補血、活血、調經止痛等功效，用于治療月經不調、閉經、腹痛、崩漏、血虛頭痛、眩暈等癥，是臨床較為常用的中藥之一[9]。國內者研究發現當歸多糖具有激活補體活性，可去除自由基、調節免疫力，在抗腫瘤方面也顯示顯著療效[10]，，臨床上可應用于治療心血管疾病、貧血、腎病綜合癥、痛經、更年期綜合征等疾病。

本研究結果顯示，治療前2組患者血清中葉酸、VB12、EPO水平差異無統計學意義。治療后，2組患者血清VB12、EPO水平均較治療前降低，葉酸水平較治療前升高(P<0.05)，提示2種治療方法均可降低患者血清VB12、EPO水平，升高葉酸水平。實驗組患者血清VB12、EPO水平較對照組降低明顯(P<0.05)，提示當歸片能夠明顯降低患者血清VB12、EPO水平。VB12和葉酸是人體主要的造血原料。葉酸是DNA合成過程中的重要輔酶，研究指出，當機體缺乏葉酸和維生素B12時，可以引起DNA合成障礙，出現了核發育遲緩、染色質結構異常，使細胞大而幼稚畸形，出現巨幼紅細胞性貧血[11]。在本研究中，治療前2組患者血清葉酸水平均較低，而治療結束后則有所升高，其原因可能是在白血病發病期間，由于白血病細胞的過度增殖，導致大量DNA合成，大量葉酸被利用從而導致患者血清葉酸水平降低，而經過治療后，白血病細胞被大量清除，機體葉酸水平能夠逐步恢復至接近正常水平。研究發現，葉酸、鐵蛋白可作為白血病的一種病情監測指標，動態監測AL病程中血清葉酸、鐵蛋白水平變化，有助于間接了解白血病的生物學行為特性及病情進展情況，初步預測化療的效果，進行病情評估及預后判斷，早期發現復發，指導化療方案及時調整；具有較好的實用價值[12]。維生素B12是人體組織代謝過程中必需的維生素，是人和其它哺乳動物維持生長和促進紅細胞生長的重要因子，具有廣泛的生理作用，參與體內甲基轉換及葉酸代謝，促進神經髓鞘中脂蛋白的形成，保持中樞神經和外周髓鞘神經纖維的功能完整[13]。VB12不僅具有促進紅細胞發育和成熟的作用，還具有提高葉酸利用率、維護神經髓鞘代謝與功能的作用。在本研究中，2組患者治療前血清VB12水平均較高，其原因可能與白血病患者單核巨噬細胞活力增強釋放或細胞破壞過多而產生。EPO是一種紅細胞生長刺激因子，主要由腎臟產生，能夠直接反映機體造血功能。低氧和貧血是導致血清EPO增高的主要原因，本研究中2組患者治療前血清EPO明顯高于正常值，其原因可能是疾病活動階段，白血病患者骨髓內白血病細胞急劇增殖，正常紅系造血功能受到抑制，導致患者貧血和缺氧，從而引起血清EPO升高，而當實驗組患者應用當歸片治療后，白細胞增殖受到抑制，從而缺氧得到相應緩解，血清EPO水平隨之降低。結果中得到白血病患者血清VB12和EPO之間呈正相關，國內已有學者報道，白血病患者血清VB12和EPO之間具有一定相關性[14-15]，與本研究結果達到一致性。

本研究結果顯示，當歸片具有調節脾臟特異性免疫功能的作用。研究指出[16]，白血病患者體內脾臟淋巴細胞大量凋亡，本研究結果發現，當歸片能有效減少淋巴細胞的凋亡，增加淋巴細胞的增殖，提高免疫水平。結果中顯示當歸片治療后淋巴細胞增殖明顯優于對照組(P<0.05)。HLA-DR是抑制免疫細胞間相互作用從而控制免疫應答強度的作用，因此在一定程度上通過調節HLA-DR的表達水平能夠達到調節免疫平衡的目的。有動物實驗研究指出[17]，當歸片能促進60Co 受照射小鼠 ConA誘導的胸腺T淋巴細胞增殖的恢復，而且還能升高小鼠外周血白細胞和血小板計數，并得出當歸片能顯著促進放射損傷小鼠的紅細胞免疫粘附功能和造血功能，這一結論也可能是白血病患者脾臟特異性免疫功能升高的原因之一。

本研究通過對42例白血病患者的血清中葉酸、VB12、EPO水平、脾臟特異性免疫功能的變化，證實當歸片對白血病患者的治療具有一定的意義。在未來的研究中，本課題組將對當歸片對白血病患者治療的藥理作用進行深入研究，為本實驗所得出的結果做出進一步的論證和分析。

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(編校：王儼儼)

Effect of angelica tablets on serum folate, VB12 and erythropoietin in patients with leukaemia

LUO WeiΔ, JI Lin-hua, CUI Sen, MA Xiao-jing, FENG Ting-ting, YIN Yu-juan

(Department of Hematology, Affiliated Hospital of Qinghai University, Xining 810001,China)

ObjectiveTo investigate the effect of angelica tablets on serum folate, VB12, erythropoietin (EPO) levels and the specific immune function of spleen in patients with leukaemia.Methods42 patients with leukemia in the Affiliated Hospital of Qinghai University were randomly divided into experimental group and control group with random digital table. 21 cases in control group

routine treatment method, 21 cases in experimental group received angelica tablets of 4 tablets per times, three times per day, orally. All patients were treated for two courses with one course of two weeks. The serum folate, VB12, EPO levels and the specific immune function of spleen were compared between two groups pre-and post-treatment.ResultsCompared with control group, the serum VB12 and EPO levels post-treatment were lower and folate level was higher (P<0.05). There were positive correlation between serum levels of VB12 and EPO, between folate and VB12, between folate and EPO (r=0.889，r=0.847，0.844；allP=0.000). Compare with control group, the lymphocyte proliferation and HL A-DR ratio were higher and the positive cells index of caspase-3 was lower in experimental group (P<0.05).ConclusionAngelica tablets could regulate serum levels of VB12, EPO and folic acid levels and improve the specific immune function of spleen effectively in patients with leukemia.

leukemia; angelica tablets; folate; VB12; erythropoietin

羅偉，通信作者，男，碩士，副主任醫師，研究方向：內科學血液病、慢性高原病，E-mail：2042152632@qq.com。

R552

A

1005-1678(2016)01-0056-04