蒙藥八味沉香散配伍不同動物心臟時丁香酚藥代動力學比較研究

肖云峰，高文軍，籍學偉，王玉華1,Δ

(1.天津中醫藥大學，天津 南開 300193；2.內蒙古醫科大學新藥安全評價研究中心，內蒙古 呼和浩特 010110； 3.內蒙古醫科大學 藥學院，內蒙古 呼和浩特 010110；4.內蒙古自治區食品藥品檢驗所，內蒙古 呼和浩特 010020)

蒙藥八味沉香散配伍不同動物心臟時丁香酚藥代動力學比較研究

肖云峰1,2，高文軍3，籍學偉4，王玉華1,3Δ

(1.天津中醫藥大學，天津 南開 300193；2.內蒙古醫科大學新藥安全評價研究中心，內蒙古 呼和浩特 010110； 3.內蒙古醫科大學 藥學院，內蒙古 呼和浩特 010110；4.內蒙古自治區食品藥品檢驗所，內蒙古 呼和浩特 010020)

目的 對牦牛心臟配伍和家豬心臟配伍八味沉香散的丁香酚藥代動力學進行比較研究。方法 采用HPLC法測定大鼠血漿中丁香酚的含量。以3,4-二甲氧基苯乙烯為內標；使用ALLtima HP C18色譜柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)，柱溫為35 ℃；流動相為乙腈和水，按梯度洗脫，流量為1.0 mL/min；檢測波長為280 nm。使用軟件DAS 2.0對灌胃配伍不同動物心臟八味沉香散的大鼠體內丁香酚平均血藥濃度-時間進行隔室模型擬合。結果 以二室模型(權重為1/cc)計算血藥濃度與實測值契合度優于其他模型。配伍牦牛心臟八味沉香散和配伍家豬心臟八味沉香散中丁香酚在大鼠體內的最大峰質量濃度(質量分數)Cmax分別為16.21 mg/L和12.50 mg/L；達峰時間Tmax分別為21.67 min和19.17 min；分布半衰期T1/2α分別為20.03 min和42.34 min；消除半衰期T1/2β均為69.315 min。結論 在兩種不同動物心臟配伍的八味沉香散中丁香酚代謝情況不相同。配伍牦牛心臟組方的代謝較好，其最大峰質量濃度更高、體內轉運速率更快、吸收進入血液循環總量更多。

八味沉香散；丁香酚；藥代動力學；動物心臟

蒙藥八味沉香散的處方由沉香、肉豆蔻、木香、廣棗、旋覆花、阿魏、丁香、動物心臟八味藥材組成[1]。臨床主要用于祛“巴達干”，鎮“心赫依”，燥“協日烏素”[2]，也就是西醫臨床常見的心悸、氣短、心前區疼痛等癥狀。關于處方中的動物心臟，蒙醫臨床使用比較混亂。臨床入藥的動物心臟有牦牛心臟、野兔心臟、家豬心臟、黃牛心臟。蒙醫臨床醫生認為牦牛心臟入藥最好。八味藥物之間有協同作用，且不同心臟入藥藥效確有差異。為尋找差異機制，本研究選取處方成分含量較高且與治療心血管疾病有關連的化學成分丁香酚[3]作為研究對象，在大鼠體內進行藥物代謝動力學研究，為不同動物心臟入藥的方劑藥效差異提供進一步的理論依據。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 實驗動物：Wistar大鼠，24只，清潔級，雌雄各半，體重300±30 g，購自北京維通利華實驗動物技術有限公司，實驗動物生產許可證編號SCXK(京) 2012-0001。

1.1.2 實驗儀器：高相液相色譜儀(日本島津公司，型號LC-20A)；冷凍離心機(上海菲恰爾分析儀器有限公司，型號DL-5000)；電熱恒溫鼓風干燥箱(上海恒科學儀器有限公司，型號DHG-9240A)；渦旋混合器(IKA，型號MS3)；氮吹儀(北京同泰聯科技發展有限公司，型號TTL-DCⅡ)；PH計(Sartoriμs AG，型號PB-21)；電子天平(上海菁海儀器有限公司，型號JA5003N)；電子天平(梅特勒-托利多儀器有限公司，型號AB135-S)。

1.1.3 試劑與藥品：八味沉香散(內蒙古醫科大學藥學院制備，批號20150109)；丁香酚對照品(中國食品藥品檢定研究院，批號110725-201213，純度≥99.7%)；3，4-二甲氧基苯乙烯(BESTOWN-振翔公司，批號10-UPA-68-2，純度≥97%)；β-GLucuronidase (SIGMA試劑有限公司 HeLix pomatia，Type H-2，批號G0876)；乙腈(Fisher Scientific，批號L-17369 4090，色譜純)、甲醇(Fisher Scientific，批號L-21063 1078，色譜純)、正己烷(Fisher Scientific，批號L-212568 725，色譜純)。

1.2 實驗方法[4-5]

1.2.1 實驗動物環境適應與飼喂：實驗動物飼養于屏障環境中，喂以北京科澳協力飼料有限公司提供的鼠維持飼料(實驗動物生產許可證編號：SCXK(京)2009-0012，批號14083221)，自由攝水。在室溫19～25 ℃，濕度40 %～60 %的環境中適應性飼養一周后，開始實驗。

所有受試藥物均用0.5 % CMC-Na配制成所需濃度，使受試藥物均勻混懸。

1.2.2 樣品血漿制備：選取Wistar大鼠24只，按照數字隨機法將其隨機分為空白對照組、配伍牦牛心臟的八味沉香散組和配伍家豬心臟的八味沉香散組，每組8只。配伍不同心臟的八味沉香散中除心臟種屬不同外，其他七味藥材及含量完全相同。所有動物均在實驗前12 h禁食不禁水。空白對照組灌胃給予0.5 % CMC-Na 15 mL/kg，兩組配伍不同動物心臟的八味沉香散組灌胃給予八味沉香散2.7 g/kg。于給藥后5、10、15、20、30、45、60、90、120、180、240、360、720 min，眼眶取血，每個時間點約采集0.5 mL，置于含有肝素鈉的離心管中。血樣以5500 r/min離心5 min，取血漿于1 mL離心管中，-20 ℃保存備用。

1.2.3 溶液配制[6]

丁香酚對照品溶液的制備：稱取丁香酚對照品適量，精密稱定，置100 mL量瓶中，加入甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成含丁香酚質量濃度為113.7 μg/mL的儲備液，4 ℃保存備用。

內標溶液的制備：稱取3，4-二甲氧基苯乙烯對照品適量，精密稱定，置100 mL量瓶中，加入甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成含3，4-二甲氧基苯乙烯質量濃度為104.8 μg/mL的溶液，作為內標儲備液，4 ℃保存備用，使用時稀釋至10.48 μg/mL。

空白血漿的制備：空白對照組大鼠灌胃給予0.5 % CMC-Na 15 mL/kg，眼眶取血，置于含有肝素鈉的離心管中。5500 r/min離心5 min，取血漿于1 mL離心管中，-20 ℃保存備用。

供試品溶液的制備：精密吸取血漿100 μL于15 mL離心管中。加入100 μL 醋酸鈉緩沖溶液(pH4)，振搖。加入10 μL β-GLucuronidase酶，振搖，加蓋，37 ℃溫育1 h，取出放至室溫。分別加入100 μL內標溶液、100 μL甲醇溶液，振搖。再加入3 mL正己烷，渦旋振蕩1 min，4500 r/min離心3 min，取正己烷層。重復加樣2次，合并正己烷層，45 ℃氮氣吹至近干，精密加入200 μL甲醇復溶，得到供試品溶液。

1.2.4 色譜條件：ALLtima HP C18色譜柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)，C18預柱；流動相A為乙腈、B為水，流動相梯度洗脫程序見表1；檢測波長為280 nm；柱溫為35 ℃；流速為1 mL/min；進樣量為5 μL。

表1 流動相洗脫程序

1.2.5 專屬性實驗 取空白對照組血漿，按“1.2.3.4”方法處理，其中100 μL內標溶液用100 μL甲醇代替，其它操作方法相同，精密吸取5 μL注入高效液相色譜儀中，得到空白對照血漿HPLC圖；取空白對照血漿，按“1.2.3.4”方法處理，其中100 μL內標溶液用100 μL丁香酚對照品溶液替代，其它操作方法相同，精密吸取5 μL注入高效液相色譜儀中，得到空白對照血漿加丁香酚對照品HPLC圖；取空白對照血漿，按“1.2.3.4”方法處理，精密吸取5 μL注入高效液相色譜儀中，得到空白對照血漿加內標HPLC圖；取灌胃兩種不同配伍八味沉香散的大鼠血漿樣品，按“1.2.3.4”方法處理，精密吸取5 μL注入高效液相色譜儀中，得到給藥大鼠血漿樣品加內標HPLC色譜圖。

1.2.6線性范圍考察

精密吸取大鼠空白血漿100 μL，6份，置15 mL離心管中，加入100 μL 醋酸鈉緩沖溶液(pH4)，振搖。加入10 μL β-GLucuronidase酶，振搖，加蓋，37 ℃溫育1 h，取出放至室溫。分別加入系列丁香酚對照品溶液和內標溶液各100 μL，按“1.2.3.4”方法處理，使對照品在生物樣品中的質量濃度分別為1.137、3.411、5.685、11.370、17.055、22.740 μg/mL，每個濃度點平行做2份，精密吸取5 μL，注入液相色譜儀中，記錄峰面積，并繪制標準曲線圖。

1.2.7 精密度試驗和準確度試驗：精密量取空白血漿100 μL，酶解之后，精密加入不同濃度的丁香酚對照品溶液適量，分別配制成低、中、高3 種濃度(3.411、11.370、17.055 μg/mL)的質控(QC)樣品，按“1.2.6”方法處理。每一質量濃度進行6樣本分析，連續測定3 d，根據當天的標準曲線，計算QC樣品的測得質量濃度。計算本法準確度、日內和日間精密度。

1.2.8 提取回收率試驗：精密吸取大鼠空白血漿100 μL于離心管中，加入100 μL 醋酸鈉緩沖溶液(pH4)，振搖。加入10 μL β-GLμcμronidase酶，振搖，加蓋，37 ℃溫育1 h，取出放至室溫。分別加入丁香酚對照品溶液和內標溶液各100 μL，按“1.2.3.4”方法處理，使對照品在生物樣品中的質量濃度分別為3.411、11.370、17.055 μg/mL，內標溶液濃度均為10.48 μg/mL，每個質量濃度進行6樣品分析，精密吸取5 μL，進樣測定，記錄丁香酚峰面積S1、內標峰面積S2，另取質量濃度為3.411、11.370、17.055 μg/mL的丁香酚對照品溶液和10.48 μg/mL的內標溶液，進樣5 μL測定，記錄丁香酚峰面積A1、內標峰面積A2，提取回收率=S/A×100%。

1.2.9 穩定性試驗：給大鼠灌胃牦牛心臟配伍的八味沉香散后，分別取5、20、45 min的血樣作為低、高、中濃度的穩定性樣品。

正常值的測定：得到血樣之后，立即按“1.2.3.4”方法處理，并在高效液相色譜儀進樣分析，作為穩定性高、中、低濃度的正常值。

穩定性測定(25 ℃7 h)：血樣在室溫25 ℃放置 7 h后按“1.2.3.4”方法處理，并在高效液相色譜儀進樣分析，以考察樣品在室溫條件下的穩定性。

穩定性測定(4 ℃24 h)：血樣在4 ℃冰箱中放置24 h，按“1.2.3.4”方法處理，并進樣分析，考察樣品在冷藏條件下的穩定性。

反復凍融3次穩定性測定(-20 ℃24 h)：血樣在-20 ℃冰箱中放置24 h后，將血樣在室溫下自然融解。待血樣完全融化后，再置于-20 ℃冰箱中凍存24 h。如此重復3次后，將血樣按“1.2.3.4”方法處理，并進樣分析，考察樣品在凍融條件下的穩定性。

1.2.10 藥-時曲線測定及藥代動力學參數計算：精密吸取血漿樣品100 μL，按“1.2.3.4”方法處理，并在高效液相色譜儀進樣分析，記錄對照品色譜峰面積與內標峰面積的比值，代入回歸方程求得各時間點大鼠血漿中丁香酚的濃度(回歸方程以當日測定為準)。將大鼠各時間點以及對應的血漿中丁香酚的濃度，帶入到DAS 2.0 藥代動力學智能分析軟件，并計算藥代動力學參數和房室模型。

2 實驗結果

2.1 專屬性實驗 取空白對照組血漿，按“1.2.3.4”方法處理，其中100 μL內標溶液用100 μL甲醇代替，其它操作方法相同，精密吸取5 μL注入高效液相色譜儀中，得到空白對照血漿HPLC圖，見圖1-A；取空白對照血漿，按“1.2.3.4”方法處理，其中100 μL內標溶液用100 μL丁香酚對照品溶液替代，其它操作方法相同，精密吸取5 μL注入高效液相色譜儀中，得到空白對照血漿加丁香酚對照品HPLC圖，見圖1-B；取空白對照血漿，按“1.2.3.4”方法處理，精密吸取5 μL注入高效液相色譜儀中，得到空白對照血漿加內標HPLC圖，見圖1-C；取灌胃兩種不同配伍八味沉香散的大鼠血漿樣品，按“1.2.3.4”方法處理，精密吸取5 μL注入高效液相色譜儀中，得到給藥大鼠血漿樣品加內標HPLC色譜圖，見圖1-D、圖1-E。

圖1 專屬性試驗HPLC圖譜A.空白對照血漿；B.空白對照血漿加丁香酚對照品；C.空白對照血漿加內標；D.灌胃配伍牦牛心臟八味沉香散大鼠血漿樣品加內標；E. 灌胃配伍家豬心臟八味沉香散大鼠血漿樣品加內標；1.丁香酚； 2.內標Fig.1 The HPLC chromatogram for Specificity testA.blank plasma; B.blank plasma add eugenol reference substance;C. blank plasma add internal standard;D. The plasma samples from the rat gavage compatibility Baweichenxiang scattered with yak’s heart add internal standard;E. The plasma samples from the rat gavage compatibility Baweichenxiang scattered with pig’s heart add internal standard;1. eugenol;2. internal standard

圖1得到結果顯示，丁香酚對照品和內標色譜峰峰形良好，血漿中內源性物質對測定無干擾，方法的專屬性好。

2.2 線性范圍考察 以對照品和內標的峰面積比值Y為縱坐標，對照品質量濃度C為橫坐標(內標濃度默認為1)，采用加權最小二乘法進行回歸運算，回歸方程為Y=0.0434C+0.0071(r=0.9996)，血漿中丁香酚的標準曲線見圖2。丁香酚血漿濃度在1.137～22.740 μg/mL范圍內呈良好的線性關系。按上述條件測得丁香酚在大鼠血漿中的最低檢測限為0.162 μg/mL。

圖2 標準曲線圖Fig.2 Standard curve

2.3 精密度試驗和準確度試驗 精密量取空白血漿100 μL，酶解之后，精密加入不同濃度的丁香酚對照品溶液適量，分別配制成低、中、高3 種濃度(3.411、11.370、17.055 μg/mL)的質控(QC)樣品，按“1.2.6”方法處理。每一質量濃度進行6樣本分析，連續測定3 d，根據當天的標準曲線，計算QC樣品的測得質量濃度。計算本法準確度、日內和日間精密度。結果詳見表2、表3。

表2 精密度試驗結果

表3 準確度試驗結果

結果顯示，該方法分析血漿中的丁香酚濃度日內和日間精密度及準確度均符合生物樣品的分析要求。

2.4 提取回收率試驗 精密吸取大鼠空白血漿100 μL于離心管中，加入100 μL 醋酸鈉緩沖溶液(pH 4)，振搖。加入10 μL β-GLμcμronidase酶，振搖，加蓋，37 ℃溫育1 h，取出放至室溫。分別加入丁香酚對照品溶液和內標溶液各100 μL，按“1.2.3.4”方法處理，使對照品在生物樣品中的質量濃度分別為3.411、11.370、17.055 μg/mL，內標溶液濃度均為10.48 μg/mL，每個質量濃度進行6樣品分析，精密吸取5 μL，進樣測定，記錄丁香酚峰面積S1、內標峰面積S2，另取質量濃度為3.411、11.370、17.055 μg/mL的丁香酚對照品溶液和10.48 μg/mL的內標溶液，進樣5 μL測定，記錄丁香酚峰面積A1、內標峰面積A2，提取回收率=S/A×100%。結果見表4。

表4 提取回收率試驗結果

表4的結果顯示，丁香酚的提取回收率分別為93.49%、99.57%、94.68%，其平均回收率大于95.91%；內標的提取回收率分別為87.81%、90.39%、90.26%，其平均回收率大于89.48%。測定結果符合藥物動力學研究要求。

2.5 穩定性試驗 給大鼠灌胃牦牛心臟配伍的八味沉香散后，分別取5、20、45 min的血樣作為低、高、中濃度的穩定性樣品。

2.5.1 正常值的測定：得到血樣之后，立即按“供試品溶液的制備”方法處理，并在高效液相色譜儀進樣分析，作為穩定性高、中、低濃度的正常值。

2.5.2 穩定性測定(25 ℃7 h)：血樣在室溫25 ℃放置7 h后按“供試品溶液的制備”方法處理，并在高效液相色譜儀進樣分析，以考察樣品在室溫條件下的穩定性。

2.5.3 穩定性測定(4 ℃24 h)：血樣在4 ℃冰箱中放置24 h，按“供試品溶液的制備”方法處理，并進樣分析，考察樣品在冷藏條件下的穩定性。

2.5.4 反復凍融3次穩定性測定(-20 ℃24 h)：血樣在-20 ℃冰箱中放置24 h后，將血樣在室溫下自然融解。待血樣完全融化后，再置于-20 ℃冰箱中凍存24 h。如此重復3次后，將血樣按“供試品溶液的制備”方法處理，并進樣分析，考察樣品在凍融條件下的穩定性。結果見表5。

表5 穩定性試驗結果

實驗結果表明，丁香酚血漿給藥樣品的室溫穩定性、凍融穩定性、4 ℃冷藏穩定性的測定結果變化均在允許范圍內(RSD<15%)。

2.6 丁香酚濃度-時間曲線 經DAS 2.0 軟件擬合配伍牦牛心臟和家豬心臟的八味沉香散單次灌胃給藥后的數據，得到大鼠血漿各時間點平均血藥濃度-時間曲線。結果見表6和圖3。

表6 給藥八味沉香散后不同采血時間的血藥濃度±s)

圖3 血藥濃度-時間曲線圖Fig.3 Plasma concentration - time curve

表6和圖3的結果表明，給大鼠等劑量灌胃配伍不同動物心臟的八味沉香散后，丁香酚的血藥濃度變化趨勢基本相同。隨時間變化丁香酚的血藥濃度呈現為先由小增大，再逐漸降低，后趨于代謝完全的規律，且血藥濃度與時間呈現雙指數函數曲線的關系。兩條曲線的達峰時間，均為給藥后20 min，但兩種配伍不同動物心臟的八味沉香散達峰時血藥濃度不同，配伍牦牛心臟的八味沉香散丁香酚血藥濃度更高，相比配伍家豬心臟的八味沉香散高3.67 μg/mL，說明配伍牦牛心臟的八味沉香散生物利用度更高。

2.7 丁香酚藥代動力學參數計算 給大鼠等劑量單次灌胃配伍不同動物心臟的八味沉香散，不同時間點采血后，得到的平均血藥濃度-時間數據。將大鼠各時間點以及對應血漿中丁香酚濃度，帶入到DAS 2.0藥代動力學智能分析軟件，并計算藥代動力學參數和房室模型。丁香酚藥代動力學參數見表7。

表7 丁香酚藥代動力學參數

采用DAS 2.0 軟件對數據進行隔室模型擬合，比較不同模型的AIC值。分別選用一室模型、二室模型、三室模型和不同權重對數據進行曲線擬合，得到結果為非靜脈注射二室模型(權重為1/cc)時血藥濃度與實測值契合度好，擬合模型的AIC值最小。

用軟件分析，得到Cmax(最大峰質量濃度)、T1/2α(分布半衰期)、K12(從中央室向外周室轉運的室間轉運常數)、K21(從外周室向中央室轉運的室間轉運常數)和AUC(0→t)(血藥濃度-時間曲線下面積)等配伍不同動物心臟的八味沉香散中所含丁香酚的藥代動力學參數。表7中的所有參數均表明配伍牦牛心臟的八味沉香散要優于配伍家豬心臟的八味沉香散。

配伍牦牛心臟的八味沉香散和配伍家豬心臟的八味沉香散比較，Cmax值分別為16.21 mg/L和12.50 mg/L，表明配伍牦牛心臟的八味沉香散中的丁香酚在相同時間內進入大鼠體內量更多；T1/2α值分別為20.031 min和42.344 min，T1/2β值均為69.315 min，均大于t1/2α，表明配伍牦牛心臟八味沉香散中的丁香酚在大鼠體內分布更快，而消除速率相同，使丁香酚在大鼠體內存留時間更長；K12值分別為0.024 min-1和0.015 min-1，K21值分別為0.016 min-1和0.011 min-1，表明丁香酚從中央室向外周室的轉運速率大于從外周室向中央室的轉運速率，且配伍牦牛心臟八味沉香散轉運速度更快。AUC(0→t)值分別為2780.282 μg/(L·min)和1939.449 μg/(L·min)，AUC(0→∞)值分別為3301.164 μg/(L·min)和2440.137 μg/(L·min)，表明從零時間到藥物達峰時間和從零時間到丁香酚全部消除這兩個時間段內，配伍牦牛心臟八味沉香散中丁香酚的藥-時曲線下總面積更大，表明在達峰和整個代謝過程中配伍牦牛心臟八味沉香散中的丁香酚進入血液循環的量更大。

3 討論

丁香酚為無色或微黃色液體，廣泛存在于丁香等植物中，主要具有抗菌[7]、健胃[8]、降血壓[9]等作用。蒙醫臨床常利用丁香的這些作用特點與肉豆蔻、廣棗等蒙藥材組成方劑用于心臟疾病的治療[10]。八味沉香散由丁香、肉豆蔻、廣棗、動物心臟等八味藥材組成。關于方中的動物心臟，蒙醫專家一致認為牦牛心臟要比家豬心臟效果好，但沒有理論依據。

本實驗通過比較研究蒙藥八味沉香散配伍不同動物心臟時丁香酚的藥代動力學曲線和參數，以驗證蒙醫臨床用藥經驗。給大鼠等劑量單次灌胃配伍不同動物心臟的八味沉香散得到的血藥濃度-時間曲線圖顯示，配伍不同動物心臟的八味沉香散中丁香酚總體代謝確有不同，且差異較大。圖3和表6的數據顯示：配伍牦牛心臟的八味沉香散中所含的丁香酚在大鼠體內具有更大的Cmax；T1/2β相等的前提下，T1/2α更小，分布更快，代謝更慢。不同動物心臟配伍的八味沉香散所含丁香酚在房室間的運轉和循環也有顯著性差異。相比而言，配伍牦牛心臟八味沉香散的丁香酚轉運和循環的量更大，主要表現為K12要遠遠大于K21，比較從零時間到藥物達峰時間和從零時間到丁香酚全部消除這兩個時間段內藥-時曲線下總面積的結果顯示，配伍牦牛心臟八味沉香散的面積更大，說明藥物進入中央室和血液循環的量更多。

藥代動力學實驗結果表明，在給藥量相同的前提下，比較配伍兩種不同動物心臟的八味沉香散時，配伍牦牛心臟比配伍家豬心臟的藥代動力學參數更利于臨床治療。

[1] 阿克旺·羅布桑·丹必扎拉申.普濟方集 [M].1813.注： 普濟方集(蒙文版)[M].內蒙古：內蒙古科學技術出版社，1986.

[2] 伊希巴拉吉爾.甘露四部[M]. 內蒙古：內蒙古人民出版社，1998.

[3] Rashmi Choudhary,Kaushala Prasad Mishra,Chivukula Subramanyam.Interrelations between oxidative stress and calcineurin in the attenuation of cardiac apoptosis by eugenol[J]. Molecular and Cellular Biochemistry, 2014,283(1):115-122.

[4] 徐叔云，卞如濂，陳修.藥理學實驗方法學(第3版)[M].北京：人民衛生出版社，2001.

[5] 張均田，杜冠華.現代藥理實驗方法(第2版)[M].北京：中國協和醫科大學出版社，2014.

[6] Youming Shen,Xiwang Liu,Yajun Yang,et al.In vivo and in vitro metabolism of aspirin eugenol ester in dog by liquid chromatography tandem mass spectrometry[J].Biomedical Chromatography.2015,29(1):129-137.

[7] B.Latifah-Munirah,W.H.Himratul-Aznita,N.Mohd Zain.Eugenol,an essential oil of clove, causes disruption to the cell wall of Candida albicans(ATCC 14053)[J]. Frontiers in Life Science, 2015,8(3):231-240.

[8] Radia Mahboub, Faiza Memmou.Antioxidant activity and kinetics studies of eugenol and 6-bromoeugenol[J]. Natural Product Research, 2015, 29(10):966-971.

[9] Janardhan Kyathanahalli S.,Rebolloso Yvette,Hurlburt Geoffrey,et al.Histopathological and Immunohistochemical Characterization of Methyl Eugenol-induced Nonneoplastic and Neoplastic Neuroendocrine Cell Lesions in Glandular Stomach of Rats[J]. Toxicologic Pathology, 2015,43(5):681-693.

[10] 肖云峰，李文妍，劉爽，等.朱日很滴丸對實驗動物心臟保護功能的藥效學研究[J].中國生化藥物雜志，2015，35(04)：24-27.

(編校：譚玲)

Comparison research the pharmacokinetic of eugenol in Mongolian medicine Baweichenxiangsan with the different animal heart

XIAO Yun-feng1,2, GAO Wen-jun3, JI Xue-wei4, WANG Yu-hua1,3Δ

(1.Tianjin University of Traditional Chinese Medicine, Tianjin 300193, China; 2.Evaluation Center for New Drug Safety of Inner Mongolia Medical University, Inner Mongolia Hohhot 010110, China; 3.Pharmacy College of Inner Mongolia Medical University, Inner Mongolia Hohhot 010110; 4. Inner Mongolia autonomous region food and drug inspection, Inner Mongolia Hohhot 010000, China)

ObjectiveTo compare the clove phenol pharmacokinetic in Baweichenxiangsan with yak’s and pig’s heart.MethodsBy HPLC determination of eugenol in rat plasma.3,4-dimethoxy styrene as internal standard; ALLtima HP C18 column(250 mm × 4.6 mm, 5 μm), column temperature was 35 ℃; mobile phase was acetonitrile and water, according to the gradient, flow was 1.0 mL/min; detection wavelength was 280 nm. Eugenol average plasma concentration-time for compartment model fit by software DAS 2.0, for gavage Baweichenxiangsan with different animal’s heart to rats.ResultsIn two-compartment model(weight of 1/cc) to calculate the plasma concentration and the measured value to fit better than other models. Compatibility yak’s heart and pig’s heart Baweichenxiang Powder eugenol maximum peak concentration in rats(mass fraction) Cmaxwere 16.21 mg/L and 12.50 mg/L; up peak time Tmaxwas 21.67 min and 19.17 min; distribution half-life T1 / 2αwere 20.03 min and 42.34 min; elimination half-life T1 / 2βwere 69.315 min.ConclusionIn both eugenol cardiac metabolism compatibility of different animals in different Baweichenxiangsan. Metabolic compatibility yak has better heart prescription, the maximum peak concentration of higher quality, faster internal transfer rates, the total amount absorbed into the blood circulation more.

Baweichenxiangsan; eugenol; pharmacokinetics; animal’s heart

國家自然科學基金項目(81360678)；內蒙古自治區科技計劃項目(1405125)；內蒙古自治區科技創新引導獎勵資金項目(20121502)

肖云峰，男，助理研究員，博士在讀，研究方向：中蒙藥藥效物質基礎及藥理毒理學，E-mail：xiaoyunfeng0472@126.com；王玉華，通信作者，女，博士，教授，博士生導師，研究方向：中蒙藥藥效物質基礎及質量控制，E-mail：yuhuawang59@163.com。

R654.2

A

1005-1678(2016)02-0176-06