食品中烷基酚類物質污染現狀、來源及其檢測技術研究進展

江澤軍，金芬，王靜，趙風年，烏日娜，佘永新，金茂俊，邵華，王珊珊，鄭鷺飛

(中國農業科學院 農業質量標準與檢測技術研究所，農業部農產品質量安全重點實驗室，北京，100081)

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食品中烷基酚類物質污染現狀、來源及其檢測技術研究進展

江澤軍，金芬，王靜*，趙風年，烏日娜，佘永新，金茂俊，邵華，王珊珊，鄭鷺飛

(中國農業科學院 農業質量標準與檢測技術研究所，農業部農產品質量安全重點實驗室，北京，100081)

摘要烷基酚聚氧乙烯醚(APEO)是一類由烷基酚(AP)和環氧乙烷反應合成的化合物，因其具有優良的表面活性，廣泛應用于農藥、包裝材料、乳化劑和洗滌劑等產品中。環境中長鏈的APEO會降解為AP、短鏈APnEO (n≤2)等代謝物，這些產物會在生物體內累積，并對生物體產生雌激素效應等毒效應。目前，在許多國家和地區的人體血液、尿液、脂肪和母乳等中都檢出了AP和短鏈APEO，而膳食攝入可能是人體暴露AP、APEO的主要途徑，因此，有必要對食品中AP、APEO展開進一步研究。文中梳理了國內外食品中AP、APEO的污染現狀及其來源，并綜述了食品中AP、APEO的提取及檢測技術。

關鍵詞烷基酚；烷基酚聚氧乙烯醚；食品；污染現狀；來源；檢測方法

烷基酚聚氧乙烯醚(alkylphenol ethoxylates, APEO)是一類人工合成的、具有優良的表面活性的化合物，在農藥、乳化劑、洗滌劑和包裝材料等生產加工中廣泛應用[1]。在APEO產品中，應用最多的是壬基酚聚氧乙烯醚(nonylphenol ethoxylates, NPEO)，約占80%；剩下的主要是辛基酚聚氧乙烯醚(octylphenol ethoxylates, OPEO)[1]。因應用的需要，工業上生產的APEO聚合度一般在1～40之間，但是大部分長鏈APEO在環境中無法長期穩定存在，會降解為脂溶性更強、毒性更高的短鏈APnEO (n≤2) 和烷基酚 (alkylphenol, AP)等，如壬基酚一氧乙烯醚(nonylphenol monoethoxylate, NP1EO)、壬基酚二氧乙烯醚(nonylphenol diethoxylate, NP2EO)、壬基酚(nonylphenol, NP)和辛基酚(octylphenol, OP)[1]?，F有研究表明[2-3]，該類物質具有類雌激素作用，與一些生物的生育力下降與喪失、種群退化及滅絕等有關，此外，還具有潛在致癌性、肝臟毒性和神經毒性等毒效應。

目前，在一些國家的人體脂肪組織[4]、尿液[5]以及母乳[6]中檢出了AP、APEO，說明其已對人體健康構成了潛在的風險。目前還沒有確切的證據表明人體內AP、APEO的來源，但是學者推測，膳食攝入可能是人體暴露該類物質的主要途徑[7-8]，因此，有必要對食品中該類物質展開進一步研究。本文對國內外食品中AP、APEO的污染現狀、來源及其檢測技術進行了概述，以期為進一步開展食品中該類物質的風險評估及其相關研究提供參考。

1污染現狀

目前，在包括水產品、畜禽產品、水果、蔬菜和谷物等多種食品中均檢出AP、APEO殘留。不同類別的食品中存在著不同水平的暴露情況。將2006年～2015年食品中AP、APEO污染的報道進行了整理。

1.1水產品

最早關于AP、APEO污染的報道出現在水產品中。2006年，MAO等[9]調查了臺灣的多種淡水魚和海水魚中的NP(EO)1-2、NP、OP污染情況，結果顯示，所有樣品中NP1EO均未檢出，僅大馬哈魚中檢出NP2EO，濃度范圍為91.2～916.95 μg/kg，僅2種海水魚中檢出OP，濃度水平為25.1～132.8 μg/kg，但NP污染很嚴重(檢出率100%)，且海水魚中NP污染水平高于淡水魚；同年，CHENG報道了臺灣2個地區牡蠣中的NP、OP濃度分別為130～5 190 μg/kg和20～1 460 μg/kg[10]。2007年，學者再次調查了臺灣市售水產品中NP(EO)1-2、NP、OP污染情況，結果顯示，NP污染情況依然很嚴重，并且牡蠣中的NP污染最為嚴重，但比CHENG等的報道[10]低；依然僅在大馬哈魚中檢出了NP2EO，但污染水平較2006年的報道[9]低；而這次在大馬哈魚和牡蠣中測到了NP1EO，平均濃度分別為(9.8±29.4) μg/kg和(5.2±4.7) μg/kg[11]。2012年，在臺灣淡水河魚體內檢測到OP的平均含量為30.7 μg/kg，NP的平均含量為235 μg/kg，NP1EO的平均含量為56.0 μg/kg，NP2EO的平均含量為29.6 μg/kg[12]，較之前MAO等[9]報道的淡水魚污染程度有所加重。

2011年的研究發現，云南滇池湖魚體內的4-t-OP和4-NP 的污染濃度達到4.6 μg/kg和18.9 μg/kg(dw: dry weight, 干重)，并且銀魚中濃度最高，鯉魚次之，鯽魚最低[13]。2013年，香港鶴咀海岸保護區水產品中NP的平均暴露水平為13.7～788.0 μg/kg (dw)，其中海膽最嚴重[14]。2014年，俞雪鈞等[15]對浙江象山海域、寧波海域及舟山海域捕撈的水產品中的4種AP進行測定，結果發現，3個海域的水產品中4-NP的含量較高，其中寧波海域魚蝦貝樣品中4-NP的含量最高，為20.1～657.5 μg/kg，象山及舟山海域所捕的水產品中4-NP含量在1.5～98.5 μg/kg之間，其他化合物含量較低，普遍低于5 μg/kg，甚至沒有檢出。最近臺灣LEE等[16]分別對野生、養殖的淡水魚和海水魚的NP污染程度進行了比較發現，野生的淡水魚NP污染最嚴重。

國外學者，在2011年對西班牙巴倫西亞沿海地區的貽貝、蛤進行AP污染檢測發現[17]，貽貝、蛤中的NP分別高達120、147 μg/kg，與美國加州地區貽貝中含量[18]相似，但低于意大利亞得里亞海[19]，高于韓國Massan灣貽貝的污染濃度[20]，而2007年ISOBE等[21]檢測到南亞和東南亞貽貝的NP 含量為18～1 347 μg/kg (dw)；貽貝中的OP暴露水平低于意大利亞得里亞海[19]和ISOBE 報道的亞洲地區[21]，蛤中OP水平高于意大利亞得里亞海[19, 22]。

此外，有研究表明，污水處理廠附近河流、湖泊中的AP、APEO暴露水平較高，使得其中的水產品受污染較為嚴重。如遼寧渾河中鯽魚的NP和OP的平均污染水平分別為1 290～3 111、6～46 μg/kg[23]；北美五大湖和密西西比河上游鯉魚體內NP(EO)0-5和OP(EO)0-3含量分別為10～13 000 μg/kg和13～160 μg/kg，發現污染程度與湖泊、河流附近的污水處理廠污水有一定的相關性[24]?？偨Y發現，AP、APEO已經對水產品造成普遍的污染，尤其是NP污染最為嚴重。因此，沿海等水產品攝入較多的地區的居民，其膳食暴露風險應引起重視。

1.2畜禽產品

畜禽產品，主要包括肉蛋奶，其作為人類膳食不可缺少的組成部分，AP、APEO暴露水平也值得重點關注。2006年，MAO等[9]對臺灣5種市售鮮肉進行了調查，NP1EO和NP2EO未檢出，OP僅在雞肉中檢出，平均濃度為(66.6±53.0) μg/kg，NP檢出率為100%，污染水平在11.7～262.91 μg/kg之間，這比北京市售的肉制品污染嚴重[25-26]。2007年，LU等[11]報道了臺灣多種畜禽產品中的NP和OP污染情況，發現肉中NP、OP的污染程度比雞蛋和牛奶嚴重，而牛奶和雞蛋中的AP污染水平近似。

2007年，SHAO等[27]測定了北京市場上10 個雞蛋樣品和10 個牛乳樣品中烷基酚，結果顯示，7件牛乳樣品中檢出了NP，濃度范圍為4.24～17.60 μg/kg，3 件樣品中檢出OP，檢出濃度范圍為0.10～0.12 μg/kg；雞蛋樣品中8 件樣品檢出了NP，濃度范圍為1.24～2.94 μg/kg，僅一件樣品檢出了OP，濃度為0.41 μg/kg，結果表明，牛乳受NP的污染較雞蛋嚴重。2012年，牛宇敏等[25]又對北京市售的多種動物性食品中的AP污染情況進行了調查，發現NP廣泛存在于肉、蛋和乳等基質中，其中乳的污染較為嚴重，乳樣品中NP檢出率為100%，而且其濃度水平差異明顯；肉樣品NP檢出率為80%，濃度為0.5～80.3 μg/kg，與SHAO之前報道[26]的殘留水平稍有差異；19份雞蛋樣品中有3份檢出了NP，殘留水平在0.27～1.09 μg/kg之間，這與SHAO之前報道[27]相似；但所有樣品中均未檢出OP殘留。2014年，張品等[28]對20份原料乳和21份液態乳產品中NP進行了檢測，結果顯示，3份原料乳中檢出了NP，含量在0.5～2.66 μg/kg之間，而在15份液態乳樣品檢出了NP，含量在0.6～62.4 μg/kg之間，顯然，液乳產品中NP 的檢出濃度和檢出率均明顯高于原料乳，可能是加工工藝和輔料引入了NP。同年，WANG等[29]調查了中國4個城市142件動物源性食品中AP含量，結果發現，83.1%樣品檢出了NP，濃度在0.4～35.76 μg/kg，而OP含量低于檢出限。最近，NIU等[30]調查了中國12個省份的畜禽產品中的NP含量，肉中的NP濃度范圍為4～26 μg/kg，雞蛋中的NP濃度范圍為0.8～10 μg/kg，牛乳中的NP濃度范圍為196～2 101 μg/kg (dw)?？梢?，總體上畜禽產品的AP、APEO污染水平較水產品低，但NP的污染程度同樣最嚴重。

1.3植物源性農產品

植物源性農產品包括水果、蔬菜和糧食谷物等，在中國居民的膳食結構中占很大比重。2007年，對臺灣地區蔬菜、水果和糧食樣品中的NP、OP、NP1EO、NP2EO污染情況的調查[11]發現，NP1EO和NP2EO無檢出，OP的污染水平低于NP，生菜中NP濃度最低，大米中NP含量最高，水果中NP濃度無明顯差異。2010年，任杰等[31]報道了?？谑惺?種蔬菜中的NP污染情況，其中白菜和油菜檢出率為100%，濃度水平為1.26～8.58 μg/kg，污染程度與2012年珠三角地區[32]相似。此外，CAI等[32]還測得珠三角地區蔬菜中NP1EO在1.32～5.33 μg/kg之間。2012年，本課題組SHE等[33]報道了北京地區的蔬菜、谷物中的NP、NP1EO、NP2EO殘留水平，其中玉米中NP、NP2EO殘留最為嚴重，蔬菜中NP、NP1EO污染水平與2007年臺灣地區[11]近似；同年，NIU等[34]測得北京市售谷物中NP濃度在9.4～1 683.6 μg/kg，污染程度非常嚴重，遠比SHE等報道[33]的水平高。2013年，LU等[35]檢測了美國佛羅里達州多種水果、蔬菜中的AP，發現所有樣品都未檢出OP，部分樣品檢出NP殘留，但污染水平普遍低于我國北京地區[33]。最近，NIU等[30]對我國12個省份多種植物源性食品中的NP進行了研究，其中蔬菜、水果和谷物中的NP水平與之前北京[33]和臺灣地區[11]報道的污染水平無明顯差異，而豆類和堅果中的NP殘留水平很高，特別是遼寧和上海地區，應該引起關注。對比可見，植物源性食品中AP、APEO污染程度要低于水產品、畜禽產品，這可能與短鏈APEO以及AP的脂溶性有關。

1.4其他

CHEN 等[36]對美國7個州的花粉、蜂蠟和蜂蜜樣品中NP(EO)3-13和OP(EO)3-13殘留水平調查發現，所有樣品中均檢出了NP(EO)3-13，蜂蜜中NPEO總量低于 90 μg/kg，花粉和蜂蠟中NPEO總含量分別為172～722 μg/kg 和 51～10 239 μg/kg，蜂蠟中殘留較高可能和烷基酚類表面活性劑的親脂性有關；而僅在花粉和蜂蠟中檢出OP(EO)3-13殘留，并且NPEO總的含量普遍高于OPEO，這與2種產品的產量具有一定相關性。

近年來，國外報道食品中APEO、AP污染的文獻數量逐漸減少，而我國的報道數量逐漸上升，尤其是我國臺灣地區，這可能和國外禁止或限制APEO的使用，而我國仍在大量使用有關。從現有的文獻來看，食品中污染報道較多的是OP、NP和NP(EO)1-2，而且食品中NP的檢出率和檢出濃度最高。此外，植物源性食品中的AP、APEO總體污染程度要低于水產品、畜禽產品，但是其中的AP可通過食物鏈的富集和放大，最終也能夠給人類帶來較大的風險。因此，針對植物源性食品中的AP、APEO暴露水平的研究也是十分必要的，這可為人體的暴露風險評價提供可靠的數據。

2潛在來源

為了控制、減輕、消除食品中的AP、APEO污染，有必要了解它們的來源。主要有4個來源。

2.1環境污染

AP、APEO沒有天然來源，它們在環境中的存在是由人類活動造成的，它們通過工業垃圾處理、城市污水排放以及農藥使用等途徑進入環境中，最終存在于水體、污泥、沉積物和土壤等中[37]。而食品的原料生產和加工都離開環境，因此環境中AP、APEO對食品的質量安全構成了潛在的威脅。一方面，AP、APEO可通過諸如污泥回用農田、污水灌溉等途徑轉移到農田和農作物中，進而可能進入到食用農產品中，造成農產品中AP、APEO殘留，本課題組已針對此展開了相關研究。另一方面，AP、短鏈APEO具有生物富集性，可以通過食物鏈在生物體內蓄積，導致水產品、畜禽產品中AP、APEO污染，這可能是動物源性產品，特別是水產品中AP、短鏈APEO的主要來源之一[38]。CHEN等[39]測定了臺北2條淡水河河水、底泥和羅非魚中OP、NP、NP1EO和NP2EO含量，分析發現魚體內NP、NPEO與所處環境(河水、底泥)中NP、NPEO含量呈現正相關性，從而說明野生羅非魚會從水體、底泥中攝入NP、NPEO，并在魚體內累積。此外，CHEN還計算了NP、NP1EO和NP2EO在魚體內各組織器官中的平均生物累積因子，發現魚卵中的最高，其次是性腺和肝臟，而肌肉組織中最低[39]。我國在將來一段時間內，APEO仍將大量使用，勢必將對農產品的產地環境造成污染，應該引起相關部門的重視。

2.2接觸材料溶出

2.3洗滌劑殘留

隨著人們生活水平的不斷提升，安全衛生意識也不斷增強，在日常生活中人們經常會使用一些果蔬清洗劑來清洗水果、蔬菜表面的農藥殘留和致病菌。而作為一種常用的非離子表面活性劑，APEO存在于多種家用洗滌劑和清洗劑中。因此，在使用清洗劑洗滌水果、蔬菜時，若沖洗得不夠充分，易導致AP、APEO在水果、蔬菜表面產生殘留。PAN 等測得臺灣市場上75種食品用清洗劑中AP濃度為17.1～2 130 μg/kg，且食品用清潔劑中4-t-OP、4-NP和t-NPs的含量及檢出率，皆以t-NPs為最高；此外，PAN 等利用田口設計進一步探究了食品用清潔劑使用后烷基酚類化合物在盤子、果蔬上的殘留問題，結果發現，影響盤子上4-t-OP殘留的主要因素是洗滌時的溫度，而沖洗時水的溫度是影響盤子上t-NPs殘留的重要因素；而包括蔬果種類、清洗劑濃度以及清洗劑中AP濃度等都會影響果蔬清洗后AP的殘留量[46]。從文獻報道數量來看，當前對因使用洗滌劑帶來的AP、APEO殘留還沒有引起足夠的關注。

2.4農藥施用

APEO是一類常用的農藥用非離子型表面活性類助劑，占農藥制劑的1%～10%，在乳油、水基型農藥制劑中均有應用，主要產品有NP-10、OP-10和農乳100#等[47]。在蔬菜、谷物等植物源性食用農產品的種植、生產加工過程中，農藥施用后，APEO會發生遷移、轉化、代謝，產生AP、APEO殘留，這可能是植物源性農產品中AP、APEO的重要來源之一。本課題組通過盆栽試驗模擬農藥施用后作物整個生長周期內NP殘留以及降解的動態規律，并對4種常見農藥在蔬菜上的降解規律進行了分析，表明部分農藥產品的安全間隔期過短，NP殘留較高，可能存在一定的膳食風險，因此農藥的安全間隔期劃定不能僅依據其中的原藥有效成分，而應充分考慮到APEO助劑的安全威脅[48]。CHEN等將蜂蠟、花粉和蜂蜜中NP(EO)3-13總殘留量和176種農藥及其代謝物的殘留量統計分析后發現，NP(EO)3-13總殘留量與農藥殘留量存在正相關性[36]。呂岱竹研究了NPEO、NP在香蕉、土壤中的消解動態和最終殘留，結果顯示，NPEO在香蕉及土壤中的消解規律符合一級動力學模型，其半衰期分別為8.8～12 d和6.9～8.5 d，而NP在香蕉和土壤中的半衰期分別為16～18 d和24～26 d；NPEO、NP殘留量隨施藥次數、施藥劑量增加而增加，隨采收期延長而逐漸減少[49]。對海口市售5種蔬菜中的NP污染情況調查發現，收獲期較短的白菜和油菜中NP檢出率為100%[31]。因此，對于采收安全間隔期較短的蔬菜、水果和谷物，AP、APEO產生殘留的風險較高，應加以重視。

3檢測技術

AP、APEO在環境中的廣泛存在使其成為學術界的研究熱點，已有諸多學者采用各種方法檢測環境介質(水、污泥等)中的AP、APEO，而因食品基質的復雜性和污染水平相對較低等原因，食品中AP、APEO的分離富集、凈化和分析測定較為困難。目前，研究主要集中在食品中的AP和短鏈APEO，而長鏈APEO才開始進入研究人員的視野。

3.1前處理方法

在食品中AP、APEO分析中，應用較多的是一些比較傳統的前處理方法，如液固萃取、超聲提取、固相萃取等，而近些年來涌現出的新型前處理技術也相繼在食品中AP、APEO的分析得到應用，如在線固相萃取、濁點萃取等。現將最為常用或新興的分離富集、凈化方法進行整理。

若不失一般性,令t=k,由于n-k≥3,n≥5,故?An-1,k-1.所以在內存在一個哈密頓圈C,C={u,P,v,Q,u},則

3.1.1固相萃取(solid phase extraction, SPE)

SPE具有操作簡單快速、回收率高、適用范圍廣等優點，是目前樣品前處理中的主流凈化技術。由表1可看出，SPE也是目前分離、富集食品中AP、APEO最常用的方法。SHAO等[26]考察了氰基(CN)柱、NH2柱和硅膠柱對肉樣品的凈化效果，發現CN柱對4-NP、OP和4-n-NP的保留都較差，硅膠柱對脂肪的去除效果較差，樣品處理后仍含有大量的脂肪，而NH2柱除了去除脂肪效果好外，對目標物的回收率也十分理想(90.7%～96.1%)。楊錨等[43]采用GCB/PSA復合萃取柱凈化提取蔬菜、谷物和食品包裝材料中OP、NP、NP1EO和NP2EO，回收率均大于70%， 效果較理想；本課題組SHE等[33]同樣選用了GCB/PSA復合萃取柱凈化提取蔬菜和谷物中NP、NP1EO和NP2EO，也取得滿意的效果；而羅金輝[50]、呂岱竹[51]均采用GCB/NH2復合小柱凈化果蔬中NP和NPEOs，也都得到較好的結果。

表1　食品中烷基酚及其聚氧乙烯醚分析方法

注：1. MAE: microwave-assisted extraction, 微波輔助萃??；GPC: Gel Permeation Chromatography, 凝膠滲透色譜法；SPE: Solid phase extraction, 固相萃取；UAE: Ultrasonic-assisted extraction, 超聲提取；MSPD: Matrix Solid Phase Dispersion, 基質分散固相萃??；ASE: Accelerated solvent extraction, 加速溶劑萃取；CPE: cloud point extraction,濁點萃取法；NS-SFODM: nitrogen-blowing salt-induced solidified floating organic droplet microextraction, 氮吹鹽誘導凝固浮動有機液滴微萃取；SBSE: stir bar sorptive extraction, 攪拌棒吸附萃??；dSPE: dispersive solid-phase extraction, 分散固相萃取；FUSLE: focused ultra-sonic solid-liquid extraction, 聚焦式超聲液固萃取；2. FLD: Fluorescence Detector, 熒光檢測器；DAD: Diode array detector, 二極管陣列檢測器；UV: ultraviolet absorption detector, 紫外檢測器；3.“-”表示未報道。

3.1.2基質分散固相萃取 (matrix solid phase dispersion, MSPD)

它是類似于SPE的一種提取、凈化、富集技術，可直接處理固體、半固體和粘性液體樣品，濃縮了傳統的樣品前處理中的樣品勻化、提取、凈化等過程，不需要進行組織勻漿、沉淀、離心和樣品轉移等操作步驟，避免了樣品的損失。SHAO等[27]考察了MSPD研磨填料C18和GCB的添加回收率效果，發現C18的回收率更好。應用C18作為MSPD的填料，并結合了正相固相萃取凈化，建立了牛乳和雞蛋中NP、OP分析方法，該方法NP和OP的回收率為79%～102%，NP和OP的檢出限分別為0.05～0.1、0.1～0.25 μg/kg。CHEN等[12]利用C8作為MSPD吸附劑，選用甲醇和丙酮作為洗脫劑，對魚和蛤中的NP、OP、NP1EO、NP2EO進行分離富集。該方法NP和OP的回收率較滿意(75.2%～107%)，NP1EO和 NP2EO的回收率差強人意(30.0%～46.2%)。

3.1.3分散固相萃取法 (dispersive solid-phase extraction, DSPE)

它是在2003年由美國農業部提出使用的一種新的樣品前處理方法，已廣泛應用于果蔬中農藥殘留的分析。CHEN等[36]將DSPE進行了改進，然后將其應用到蜂蜜、花粉和蜂蠟中的NP(EO)3-13和OP(EO)3-13分離凈化，該方法的回收率為75%～111%，NPEO和OPEO的檢出限分別為0.56～1.07和0.44～0.54 μg/kg。MIJANGOS報道了[61]采用聚焦式超聲液固萃取和分散固相萃取結合的方法分離富集蔬菜中的AP。研究人員對分散固相萃取凈化劑(GCB、PSA、Florisil、C18)的組合方式進行了選擇優化，最后確定GCB、C18為胡蘿卜的凈化吸附劑，該方法的回收率為104%～110%。

3.1.4攪拌棒吸附萃取 (stir bar sorptive extraction, SBSE)

1999年由比利時學者SANDRA等人提出以來，已成功地應用于環境檢測、食品分析等領域。其原理與SPME類似，在磁力攪拌器上放置一個特殊的磁力攪拌棒，攪拌棒表面帶有一個聚二甲基硅烷涂層，可以直接進行全自動熱解吸附和分析。與SPME相比，SBSE的固定相體積大，精密度高，重現性好，具有更高的富集倍數，更適合于痕量物質的分析。CACHO等[58]成功將SBSE應用到蔬菜中的AP的分離富集，該方法首先采用甲醇超聲提取蔬菜樣品，再用攪拌棒在900 r/min富集4 h，最后熱解吸，GC-MS檢測，目標物的回收率為83%～118.5%。

3.1.5在線固相萃取 (on-line SPE)

它是近年來發展起來的全自動樣品處理技術，其可以自動完成固相萃取的上樣、淋洗和洗脫3個過程，達到樣品的在線凈化濃縮的目的。張品等[28]報道了在線固相萃取測定乳制品中NP的方法，該方法選用20%甲醇水作為淋洗溶液，淋洗時間為4 min，轉載時間為3 min，對乳制品中NP的回收率為83.1%～90.5%，并將該方法與凝膠滲透色譜凈化方法進行比對，發現2種檢測方法所得數據無顯著性差異；NIU等[34]報道了利用超聲提取、在線固相萃取的方法萃取谷物中的NP和OP，該方法對NP和OP的檢測限分別為0.2～0.4和0.1～0.2 μg/kg，方法回收率在81.6%～115.7%之間。

3.1.6液液微萃取 (liquid-liquid microextraction)

有學者將簡單、快速、有機溶劑消耗少的新型液-液微萃取技術，如濁點萃取，應用于食品中AP的分離富集。濁點萃取法(cloud point extraction, CPE)是以表面活性劑膠束水溶液的增溶性和濁點現象為基礎，通過改變溫度、壓力、電解質等實驗參數引發相分離，將水溶性物質與親油性物質分離，實現一定的富集倍數，是一種環境友好型樣品前處理方法。丁一等[55]應用CPE對牛乳中的4-n-NP進行萃取富集，采用表面活性劑Tween 20萃取，無水硫酸和冰醋酸破乳，正丁醇分相，高效液相色譜檢測，該方法4-n-NP的回收率在71.3%～73.3%之間，檢出限和定量限分別為7.36和24.53 μg/kg。

3.2儀器檢測方法

目前，食品中AP、APEO的定量方法主要以儀器分析方法為主，包括高效液相色譜、氣質聯用和液質聯用等。

3.2.1高效液相色譜(HPLC)

HPLC適用于分析難揮發的大分子有機化合物。對于AP(EO)n(n>3)，因其揮發性較低，比較適合用HPLC分析。APEO結構既有疏水的烷基也有親水的聚乙氧基，因而使用液相分析時既可以采用極性正相色譜柱，也可以采用非極性反相色譜柱。呂岱竹等[51]報道以C18柱色譜分離、HPLC-FLD 測定果蔬中的NPEOs和NP含量，NP和NPEOs的檢出限分別為2、1.6 μg/kg，回收率為75%～104%。但是受檢測器的限制，該法選擇性和定性能力較差。

3.2.2氣質聯用(GC-MS)

GC-MS結合了氣相色譜和質譜的兩者之長，具有定性能力強、靈敏度高、選擇性好的優點，廣泛用于易揮發有機污染物的分析。AP及短鏈APEO具有極性，不易揮發，不適合GC-MS分析，但將其衍生化后，其衍生物可適用于GC-MS分析。LU等[57]采用同位素稀釋GC-MS分析水果、蔬菜中4-NP、4-n-NP、4-OP，該方法檢出限為0.02～0.1 μg/kg，定量限為0.06～0.4 μg/kg，加標回收率為95.2%～106.6%，RSD小于9.0%。GC-MS對于AP及短鏈APEO具有較好的靈敏度和線性范圍，但大多需要衍生化處理后才能進樣，操作繁瑣，而且GC-MS對于不易揮發的長鏈APEO無能為力。

3.2.3液質聯用(LC-MS/MS)

LC-MS/MS是2000年后發展起來的一項技術，廣泛應用于環境分析、食品分析等領域。從表1可看出，LC-MS/MS技術也是目前檢測食品中AP、APEO最為常用的方法。該法結合了液相色譜高效分離的特點和質譜選擇性好、靈敏度高、可同時測定多種物質的特點，彌補了GC-MS法不能測定難揮發的APEO以及高效液相色譜選擇性差的缺點，同時前處理簡單，樣品量少，這給食品中AP、APEO的分析帶來了極大的方便。

檢測AP、APEO常使用ESI源。AP具有酚結構，適用于負電離方式，在離子源內易形成母離子[M-H]-；APEO為醚結構，適用于正電離模式，在離子源中易形成[M+Na]+和[M+NH4]+。羅金輝等[50]報道了應用UPLC-MS/MS測定香蕉中NP(EO)5-12和NP殘留的方法。該方法采用多反應監測，其中，檢測NP用ESI-模式，而NP(EO)5-12用ESI+模式，且監測的母離子均為[M+Na]+。該方法在5～40 μg/kg添加水平范圍內，NP(EO)5-12及NP的添加回收率在75.9%～117.0%，NP(EO)5-12的檢出限在0.005～0.04 μg/kg，NP的檢出限為0.5 μg/kg。本課題組SHE等[33]建立了HPLC-MS/MS同時測定蔬菜和谷物中NP、NP1EO和NP2EO殘留量的方法。在質譜方法中，NP1EO、NP2EO在ESI+模式下監測其母離子[M+NH4]+，NP在ESI-模式下監測其母離子[M-H]-。該方法的回收率為65%～118%，NP、NP1EO和NP2EO的檢出限分別為3、5和0.1 μg/kg。楊錨等[43]在LC-MS/MS多反應監測模式下正負離子同時掃描對蔬菜、谷物和食品包裝材料中OP、NP、NP1EO和NP2EO進行定性、定量分析，目標物的回收率在62%～113%之間。

4展望

當前，食品中AP、APEO的分析研究已成為學者研究的熱點之一。雖然已開發出了許多不同的檢測方法，但是受于APEO的聚合度范圍寬、不同聚合度之間極性相差較大、食品基質復雜等原因，研究多集中在測定食品中AP及短鏈APEO(n≤2)，關于食品中長鏈APEO檢測方法還鮮有報道。而實際環境中，AP和短鏈APEO主要來自于長鏈APEO的降解，所以在食品中，為了準確評價該類物質的暴露水平，研究長鏈APEO的分析方法同樣重要。此外，目前AP分析多限于總量研究，而AP存在多種同分異構體，并且不同異構體的性質、毒性效應不同，因此，有必要對AP每種異構體進行單獨定量研究，進而準確評估其風險。

其次，不同地區的膳食結構存在略微的差異，城鎮與農村居民的飲食習慣也存在些許差異，不同年齡段的人群也存在著較大的差異，因此，很有必要針對此開展較為全面的污染調查和膳食風險評估工作。此外，對于食品中AP、APEO污染的具體來源、途徑還不明確，尤其是APEO作為農藥助劑隨農藥施用后，在農產品生產鏈中的遷移轉化、代謝殘留規律還不清楚，因此，APEO在農產品生產過程中的遷移、代謝行為機制還很值得探尋。

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Current situation of alkylphenol and alkylphenol ethoxylates pollution in foods and its sources and analysis

JIANG Ze-jun, JIN Fen, WANG Jing*, ZHAO Feng-nian, WU Ri-na,SHE Yong-xin, JIN Mao-jun,SHAO Hua,WANG Shan-shan, ZHENG Lu-fei

(Chinese Academy of Agricultural Science, Institute of Quality Standard and Testing Technology for Agro-Products; Key Laboratory of Agro-product Quality and Safety of Chinese Agricultural Ministry，Beijing 100081, China)

ABSTRACTThe compounds alkyphenol ethoxylates (APEO) are a group of man-made chemicals produced by alkylphenol (AP) with ethylene oxide. Due to their special surfactant properties, these compounds were widely used as antioxidants or nonionic surfactants in pesticides, herbicides, emulsifiers, detergents and packing materials. Their biodegradation products such as: AP, alkylphenol monoethoxylate (AP1EO), alkylphenol diethoxylate (AP2EO) have been shown to accumulate in living organisms including human being. These substances have been also shown to have estrogenic and other adverse effects on animal and human health. Recently AP and short chain APEO have been detected in a variety of matrices including human blood, urine, adipose tissue and human breast milk worldwide. Food is the major source for people exposed to AP and APEO. Therefore, it is necessary to further research of AP and APEO in foods. In this paper, the current situation and potential sources of AP and APEO in foods were summarized. The extraction and analysis methods for these compounds in different foods were also reviewed and analyzed. These comments would provide some references to the risk assessment and relevant studies on AP and APEO in foods.

Key wordsalkylphenol (AP); alkyphenol ethoxylate (APEO); foodstuffs; occurrence; source; analysis technique

DOI:10.13995/j.cnki.11-1802/ts.201606039

基金項目：科技部科技基礎性工作專項項目(No.2013FY-110100); 中國農業科學院科技創新工程“農業化學污染物殘留檢測及行為研究”創新團隊資助項目

收稿日期：2015-06-09，改回日期：2015-07-20

第一作者：碩士研究生 (王靜教授為通訊作者，E-mail: w_jing2001@126.com)。