布魯菌PCR快速檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用*

徐明忠，張如勝，蘇　良

(湖南省長(zhǎng)沙市疾病預(yù)防控制中心　410006)

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·論著·

布魯菌PCR快速檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用*

徐明忠，張如勝，蘇良

(湖南省長(zhǎng)沙市疾病預(yù)防控制中心410006)

摘要:目的建立布魯菌聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)方法，對(duì)其進(jìn)行應(yīng)用評(píng)價(jià)。方法針對(duì)布魯菌外膜蛋白編碼基因(omp-2)設(shè)計(jì)PCR引物，建立PCR方法，利用19種常見(jiàn)細(xì)菌和布魯菌株DNA分別對(duì)其進(jìn)行特異性和敏感度評(píng)價(jià)，對(duì)3株疑似布魯菌株進(jìn)行核酸檢測(cè)，并與分離培養(yǎng)法進(jìn)行結(jié)果比對(duì)。結(jié)果本研究建立的布魯菌PCR檢測(cè)方法僅能檢出布魯菌陽(yáng)性菌株，對(duì)照菌DNA未出現(xiàn)目的條帶；敏感度為100拷貝/反應(yīng)；PCR方法對(duì)3株疑似布魯菌株檢出omp-2基因條帶，鑒定結(jié)果為布魯菌，與分離培養(yǎng)法結(jié)果相同。結(jié)論本研究建立了一種布魯菌PCR檢測(cè)方法，與分離培養(yǎng)法相比，布魯菌PCR方法準(zhǔn)確、快速，適合布魯菌病疫情的快速檢測(cè)。

關(guān)鍵詞:布魯菌;聚合酶鏈反應(yīng);基因

布魯菌病(簡(jiǎn)稱布病)是一種人畜共患傳染病，人感染布魯菌后出現(xiàn)反復(fù)發(fā)熱，同時(shí)伴有乏力、關(guān)節(jié)痛等癥狀，容易發(fā)展為慢性病。布魯菌分為6 個(gè)經(jīng)典種和19 個(gè)亞型，不同種、型之間親緣性很近[1]，其中布病主要由羊、牛、豬、犬種布魯菌感染引起。近年來(lái),布病疫情形勢(shì)較為嚴(yán)峻,數(shù)據(jù)顯示，2004年12月至2010年7月，中國(guó)共報(bào)告布病實(shí)驗(yàn)室診斷病例141 604例[2]。2012年，長(zhǎng)沙市寧鄉(xiāng)縣發(fā)生布病疫情，為了對(duì)該疫情病原體進(jìn)行準(zhǔn)確、快速地檢測(cè)，本文在分離培養(yǎng)法檢測(cè)的同時(shí)，建立聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)方法對(duì)可疑布魯菌菌株進(jìn)行了核酸檢測(cè)，現(xiàn)報(bào)道如下?！?br>