裝載方式對(duì)實(shí)驗(yàn)室高溫濕熱滅菌效果的影響研究

戴虹梅　鄒　坤　賀海波　尉小琴　顏為紅　汪鋆植

(1. 三峽大學(xué) 生物與制藥學(xué)院， 湖北 宜昌　443002; 2. 奧美醫(yī)療用品有限公司, 湖北 宜昌　443000)

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裝載方式對(duì)實(shí)驗(yàn)室高溫濕熱滅菌效果的影響研究

戴虹梅1，2鄒坤1賀海波1尉小琴1顏為紅1汪鋆植1

(1. 三峽大學(xué) 生物與制藥學(xué)院， 湖北 宜昌443002; 2. 奧美醫(yī)療用品有限公司, 湖北 宜昌443000)

摘要：微生物實(shí)驗(yàn)室高溫濕熱滅菌裝載對(duì)滅菌效果有重要影響，由于滅菌物品的多樣性，沒(méi)有固定的執(zhí)行方案，而使用者通常依賴于廠商的設(shè)備說(shuō)明，應(yīng)用時(shí)也容易忽略裝載方式對(duì)滅菌效果的影響．本研究以不同的滅菌器載物籃和器皿擺放方向進(jìn)行滅菌，對(duì)比觀察滅菌效果．通過(guò)采用Ellab溫度、壓力傳感器，MESA生物指示劑，采集滅菌過(guò)程的溫度、壓力，確認(rèn)是否達(dá)到滅菌保證水平，并比較各種裝載方式下的數(shù)據(jù)差異；分析滅菌階段相同時(shí)間不同布點(diǎn)位置的溫度，滅菌階段相同布點(diǎn)、不同時(shí)間的溫度，其波動(dòng)、極差、F0值在可接受范圍內(nèi)進(jìn)行比較；將相同時(shí)間采集的壓力值對(duì)應(yīng)理論飽和蒸汽溫度與各點(diǎn)的實(shí)測(cè)溫度進(jìn)行比較；同時(shí)，檢查生物指示劑是否成功滅活．結(jié)果表明：①空載時(shí)，底部無(wú)孔網(wǎng)籃與全網(wǎng)籃兩種方式?jīng)]有明顯差異，均符合執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)．②器械滅菌程序，量筒口朝上時(shí)，量筒內(nèi)升溫慢，F(xiàn)0值達(dá)不到執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)；量筒口朝下時(shí)符合執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)．③在培養(yǎng)基滅菌程序下對(duì)比底部無(wú)孔網(wǎng)籃和全網(wǎng)裝載籃模式，無(wú)孔網(wǎng)籃置于上層或下層，置于中間的培養(yǎng)基升溫慢且F0值達(dá)不到執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)，相應(yīng)的生物指示劑培養(yǎng)結(jié)果為陽(yáng)性；上下層都采用有孔網(wǎng)籃時(shí)，符合執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)，且相應(yīng)的生物指示劑培養(yǎng)結(jié)果為陰性．無(wú)論裝載籃還是待滅菌物品，其裝載方式對(duì)冷空氣的排空和蒸汽的穿透有重要影響．應(yīng)本著利于空氣流通等原則，基于裝載方式的考慮實(shí)施驗(yàn)證，從而避免裝載不當(dāng)導(dǎo)致失敗，保證高溫濕熱滅菌效果．

關(guān)鍵詞：裝載方式；高溫濕熱滅菌；效果

蒸汽是一種無(wú)色、無(wú)味、無(wú)毒無(wú)害的氣體，生產(chǎn)成本低，獲取方法簡(jiǎn)單，溫度高、穿透力強(qiáng)，是一種滅菌效果好、無(wú)污染的滅菌方法[1]．壓力蒸汽滅菌器以蒸汽作為滅菌因子，在滅菌器內(nèi)不存在冷空氣的條件下，充入純蒸汽并施加壓力可提高蒸汽的溫度，當(dāng)蒸汽與物品充分接觸時(shí)放出潛熱加熱物品達(dá)到殺滅微生物的目的[2]．

實(shí)驗(yàn)室常用滅菌器主要有下排式和預(yù)真空兩種．下排式壓力蒸汽滅菌方法延襲使用了100多年，其在蒸汽置換冷空氣時(shí)具有不徹底性和滅菌內(nèi)室的上下層溫差過(guò)大等缺點(diǎn)[3]．滅菌效果比下排式滅菌穩(wěn)定可靠、工作效率更高的預(yù)真空滅菌器，自20世紀(jì)50年代被英國(guó)率先研究出來(lái)，越來(lái)越被廣泛使用，但預(yù)真空滅菌器也有不足之處，比如：設(shè)備費(fèi)用高、柜體密封性要求高、小裝量滅菌效果差及不適用于瓶裝液體滅菌等．而這些不足，恰是下排式壓力蒸汽滅菌器的長(zhǎng)處．同時(shí)由于控制方便、費(fèi)用經(jīng)濟(jì)，各實(shí)驗(yàn)室、醫(yī)院及衛(wèi)生單位仍普遍采用下排式高壓蒸汽滅菌器．高壓蒸汽滅菌器種類繁多，實(shí)驗(yàn)室購(gòu)置的滅菌器究竟能否滿足滅菌的實(shí)際需求以及如何正確使用，在滅菌器正式投入使用前須對(duì)設(shè)備運(yùn)行狀態(tài)、運(yùn)行最佳參數(shù)等進(jìn)行確認(rèn)，從而確保實(shí)驗(yàn)室滅菌可靠性．實(shí)驗(yàn)室滅菌物品多種多樣，驗(yàn)證前需要加以區(qū)分，不同種類的物品應(yīng)采用不同的滅菌方式乃至設(shè)計(jì)合適的裝載方式．但實(shí)際工作中，許多使用單位主要依賴設(shè)備說(shuō)明書和滅菌設(shè)備廠商的指導(dǎo)，比較常見的是忽略了裝載方式的影響．在實(shí)驗(yàn)室滅菌驗(yàn)證時(shí)發(fā)現(xiàn)，裝載方式對(duì)滅菌效果是一重要影響因素．本次以某知名國(guó)產(chǎn)下排式80L立式高壓蒸汽滅菌器為例，根據(jù)驗(yàn)證實(shí)施空載溫度分布測(cè)試、實(shí)驗(yàn)室器具滅菌的裝載溫度分布測(cè)試、裝載熱穿透測(cè)試和微生物挑戰(zhàn)測(cè)試，觀察、比較裝載方式的影響．按121℃ 30 min空載、器皿滅菌和121℃ 15 min培養(yǎng)基滅菌，驗(yàn)證溫度分布、裝載熱穿透和微生物挑戰(zhàn)，評(píng)估不同裝載方式對(duì)滅菌效果的影響．

1材料

1.1試驗(yàn)器具

滅菌器，山東新華醫(yī)療器械股份有限公司；無(wú)線溫度傳感器，丹麥ELLAB股份有限公司；無(wú)線壓力傳感器，丹麥ELLAB股份有限公司；不銹鋼過(guò)濾支架，蒸汽醫(yī)用紙包裹支架漏斗接口；不銹鋼濾杯；血清瓶；空量筒；移液器槍頭；吸管．

1.2試驗(yàn)試劑

TSB培養(yǎng)基，美國(guó)BD公司；EZS/6自含式生物指示劑(含菌量達(dá)106)，美國(guó)MESA公司；PS-6-50自含式生物指示劑(含菌量達(dá)106)，美國(guó)MESA公司．

2方法[4]

2.1空載程序

出廠標(biāo)配網(wǎng)籃為一個(gè)底部有孔網(wǎng)籃和一個(gè)底部無(wú)孔網(wǎng)籃(如圖1所示)，設(shè)計(jì)初衷是避免滅菌時(shí)腔體內(nèi)沸騰的水濺濕物品，但在預(yù)驗(yàn)證試驗(yàn)時(shí)發(fā)現(xiàn)底部無(wú)孔網(wǎng)籃無(wú)論置于上層還是下層，其底部中心為整個(gè)腔室內(nèi)的冷點(diǎn)，存在滅菌失敗的風(fēng)險(xiǎn)．此次試驗(yàn)方案中將設(shè)計(jì)兩種空裝載，用以評(píng)估可接受的裝載方式：空載1：為上層全網(wǎng)籃+下層底部無(wú)孔網(wǎng)籃，空載2：為上下層全網(wǎng)籃．

A.底部有孔全網(wǎng)籃；B.底部無(wú)孔網(wǎng)籃；C.網(wǎng)籃示意圖圖1　滅菌器網(wǎng)籃

121℃×30 min空載溫度分布測(cè)試，確定滅菌循環(huán)的熱力學(xué)特性，以及滅菌器腔體的“冷點(diǎn)”和“熱點(diǎn)”．(“冷點(diǎn)”和“熱點(diǎn)”的判定依據(jù)為各個(gè)溫度傳感器在滅菌循環(huán)結(jié)束后的總計(jì)F0值)．無(wú)線溫度傳感器設(shè)置為每隔30 s記錄一次數(shù)據(jù)；將滅菌網(wǎng)籃分為上層頂部、上層底部、下層底部3個(gè)布點(diǎn)層，分別設(shè)置溫度測(cè)量點(diǎn)，覆蓋到冷點(diǎn)、熱點(diǎn)及降溫最慢的點(diǎn)；其中一個(gè)溫度測(cè)量點(diǎn)設(shè)置在滅菌器排水口，同時(shí)近溫控器(如圖2所示)．每柜放置一枚壓力傳感器，其換算飽和蒸汽溫度與各溫度傳感器進(jìn)行比較．

A.上層上部；B.上層底部；C.下層底部；T.溫度傳感器；P.壓力傳感器圖2　空載測(cè)試裝載示意圖

2.2溫度分布、熱穿透和微生物挑戰(zhàn)測(cè)試

2.2.1器械滅菌程序

具體操作過(guò)程如下：①采用全網(wǎng)籃，按“2.方法”放置一層器具(不銹鋼過(guò)濾支架較長(zhǎng)，無(wú)法放置二層網(wǎng)籃)，通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)找到各器具的最佳放置方法(器具的中空管路縱向放置，容器的開口方向朝下為最佳)及每種器械中溫度最難穿透部位，無(wú)線溫度傳感器設(shè)置為每隔30 s記錄一次數(shù)據(jù)；每包器具放置二枚傳感器，分布于器具包中部及下1/3處；其中一個(gè)器具包靠近排水口，同時(shí)近溫控器．②放置一枚壓力傳感器，其換算飽和蒸汽溫度與各溫度傳感器進(jìn)行比較．③每個(gè)測(cè)溫點(diǎn)放置自含式生物指示劑，培養(yǎng)基滅菌時(shí)需置于液體中．滅菌程序結(jié)束后，與對(duì)照品同時(shí)培養(yǎng)，應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)．④記錄兩種裝載方式，即器械1為量筒口朝上，器械2為量筒口朝下(如圖3所示)．

T：溫度傳感器；P：壓力傳感器圖3　器械最大裝載示意圖

2.2.2培養(yǎng)基滅菌程序

具體操作過(guò)程如下：①試驗(yàn)三種裝載方式：培養(yǎng)基1為上層全網(wǎng)籃，下層底部無(wú)孔網(wǎng)籃；培養(yǎng)基2為上層底部無(wú)孔網(wǎng)籃，下層全網(wǎng)籃；培養(yǎng)基3為上下層全網(wǎng)籃．無(wú)線溫度傳感器設(shè)置為每隔30 s記錄一次數(shù)據(jù)，放置于每層中心及四周的血清瓶?jī)?nèi)，傳感器探頭浸入培養(yǎng)基；另有2枚溫度傳感器分別置于上、下層網(wǎng)籃中央．②放置一枚壓力傳感器，其換算飽和蒸汽溫度與各溫度傳感器進(jìn)行比較．③每個(gè)測(cè)溫點(diǎn)放置自含式生物指示劑，培養(yǎng)基滅菌時(shí)需置于液體中．滅菌程序結(jié)束后，與對(duì)照品同時(shí)培養(yǎng)，應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)(如圖4所示)．

A：上層底部；B：下層底部；T：溫度傳感器；P：壓力傳感器圖4　培養(yǎng)基最大裝載示意圖

2.2.3執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)

在滅菌過(guò)程中具體按照下列標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行：①在滅菌階段，除浸入培養(yǎng)基的溫度傳感器外，每一個(gè)溫度傳感器的溫度保持在121～124℃范圍；②在滅菌階段，除浸入培養(yǎng)基的溫度傳感器外，同一時(shí)刻不同溫度傳感器的溫度極差≤2℃；③在滅菌階段，除浸入培養(yǎng)基的溫度傳感器外，每一個(gè)溫度傳感器的溫度變化范圍≤2℃；④空載及器皿滅菌程序，每一個(gè)溫度傳感器F0≥30 min；⑤培養(yǎng)基滅菌程序，每一個(gè)探頭浸入液體內(nèi)部的溫度傳感器F0≥12 min；⑥在滅菌階段，壓力傳感器均值查對(duì)應(yīng)的飽和蒸汽溫度與每一個(gè)溫度傳感器的溫度極差≤2℃，其中培養(yǎng)基滅菌的壓力傳感器與探頭不浸入培養(yǎng)基的兩個(gè)傳感器作比較．

3結(jié)果

3.1空載驗(yàn)證結(jié)果分析

空載1：使用原廠設(shè)計(jì)的上層網(wǎng)籃+下層底部無(wú)孔網(wǎng)籃時(shí)，滅菌器內(nèi)溫度分布符合要求．在滅菌階段，每一個(gè)溫度傳感器的溫度保持在121～124℃范圍(最高溫度為123.02℃，最低溫度為121.25℃)；同一時(shí)刻，各監(jiān)測(cè)點(diǎn)溫度相差在0.29℃內(nèi)，單點(diǎn)溫度波動(dòng)在1.77℃；F0值46.23 min；同時(shí)刻壓力傳感器換算飽和蒸汽溫度與各測(cè)點(diǎn)溫度值差值最大為0.72℃，在誤差范圍內(nèi)，表明各測(cè)點(diǎn)蒸汽為飽和蒸汽．

空載2：上下層都改為采用全網(wǎng)籃后，滅菌器內(nèi)溫度分布符合要求，與前一種裝載沒(méi)有明顯差異；在滅菌階段，每一個(gè)溫度傳感器的溫度保持在121～124℃范圍(最高溫度為123.17℃，最低溫度為121.54℃)；同一時(shí)刻，各監(jiān)測(cè)點(diǎn)溫度相差在0.34℃內(nèi)，單點(diǎn)溫度波動(dòng)在1.63℃；F0值47.28 min；同時(shí)刻壓力傳感器換算飽和蒸汽溫度與各測(cè)點(diǎn)溫度值差值最大為0.70℃，在誤差范圍內(nèi)，表明各測(cè)點(diǎn)蒸汽為飽和蒸汽．

3.2溫度分布、熱穿透和微生物挑戰(zhàn)測(cè)試結(jié)果分析

3.2.1器械滅菌

器械1：量筒口朝上時(shí)，滅菌階段量筒內(nèi)多個(gè)時(shí)間溫度未達(dá)到121℃，最高溫度121.81℃，F(xiàn)0值28.14 min未達(dá)到驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)；滅菌開始時(shí)，該點(diǎn)測(cè)溫度數(shù)據(jù)與壓力傳感器換算飽和蒸汽溫度差值達(dá)5.26℃，11 min后兩者差值在2℃的誤差范圍，說(shuō)明量筒口朝上不利于冷空氣排出和熱穿透；雖然生物指示劑培養(yǎng)結(jié)果為陰性，但仍認(rèn)為此種裝載不能保障滅菌效果．

器械2：量筒朝下時(shí)，滅菌階段量筒內(nèi)溫度在標(biāo)準(zhǔn)121～124℃內(nèi)(最大值122.95℃，最小值121.28℃)，F(xiàn)0值45.57 min，且各測(cè)溫點(diǎn)數(shù)據(jù)與壓力傳感器換算飽和蒸汽溫度差值在2℃誤差范圍內(nèi)(最高1.65℃)，生物指示劑培養(yǎng)結(jié)果為陰性，符合標(biāo)準(zhǔn)．

3.2.2培養(yǎng)基滅菌

培養(yǎng)基1：上層網(wǎng)籃，下層底部無(wú)孔網(wǎng)籃：滅菌階段，壓力傳感器換算飽和蒸汽溫度為理論值，位于上層網(wǎng)籃中間未浸入培養(yǎng)基的測(cè)溫點(diǎn)溫度與理論值最大相差0.88℃，說(shuō)明滅菌階段為飽和蒸汽；下層底部無(wú)孔網(wǎng)籃中間未浸入培養(yǎng)基的測(cè)溫點(diǎn)溫度與理論值之差4.60～13.38℃，說(shuō)明此區(qū)域滅菌階段為不飽和蒸汽；下層中間的培養(yǎng)基液體F0值6.56 min，不符合標(biāo)準(zhǔn)要求，且該層生物指示劑培養(yǎng)結(jié)果均為陽(yáng)性．滅菌失敗．

培養(yǎng)基2：下層網(wǎng)籃，上層底部無(wú)孔網(wǎng)籃：滅菌階段，壓力傳感器換算飽和蒸汽溫度為理論值，位于上層底部無(wú)孔網(wǎng)籃中間未浸入培養(yǎng)基的測(cè)溫點(diǎn)溫度與理論值之差5.14～15.53℃，說(shuō)明滅菌階段為不飽和蒸汽；下層底部無(wú)孔網(wǎng)籃中間未浸入培養(yǎng)基的測(cè)溫點(diǎn)溫度與理論值最大相差1.42℃，說(shuō)明滅菌階段為飽和蒸汽；上層中間的培養(yǎng)基液體F0值7.87 min，不符合標(biāo)準(zhǔn)要求，該層生物指示劑培養(yǎng)結(jié)果為陽(yáng)性．滅菌失敗．

培養(yǎng)基3：上下層都改為采用全網(wǎng)籃后，冷點(diǎn)F0值已達(dá)12.61 min，滅菌階段，壓力傳感器換算飽和蒸汽溫度理論值與對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)未浸入培養(yǎng)基傳感器測(cè)溫之差最大為1.45℃，說(shuō)明為飽和蒸汽，所有生物指示劑培養(yǎng)結(jié)果陰性，符合滅菌要求．

表1　不同裝載方式下溫度分布、溫度波動(dòng)、F0值及與理論飽和蒸汽溫度差值的對(duì)比分析

注：滅菌階段各時(shí)間點(diǎn)壓力對(duì)應(yīng)理論飽和蒸汽溫度與實(shí)際溫度最大偏差，其中培養(yǎng)基滅菌時(shí)實(shí)際溫度指與不浸入培養(yǎng)基的傳感器對(duì)比．空載1：上層網(wǎng)籃+下層底部無(wú)孔網(wǎng)籃；空載2：上、下層網(wǎng)籃；器械1：網(wǎng)籃，量筒口朝上；器械2：網(wǎng)籃，量筒口朝下；培養(yǎng)基1：上層網(wǎng)籃+下層底部無(wú)孔網(wǎng)籃；培養(yǎng)基2：上層底部無(wú)孔網(wǎng)籃+下層網(wǎng)籃；培養(yǎng)基3：上、下層網(wǎng)籃．

4討論

本研究以空載、器械滅菌和培養(yǎng)基滅菌的幾種常用裝載和易出現(xiàn)的偏差為例，表明裝載方式對(duì)實(shí)驗(yàn)室高溫濕熱小型滅菌器的滅菌效果有顯著影響．實(shí)際工作中，設(shè)定滅菌裝載前，應(yīng)針對(duì)具體設(shè)備和參數(shù)進(jìn)行試驗(yàn)，獲取充分的數(shù)據(jù)，以規(guī)范實(shí)驗(yàn)室滅菌．應(yīng)考慮裝載物品不可觸及腔壁，盡可能采用網(wǎng)籃架子并使物品間留出足夠的空間(以插入伸直的手為標(biāo)準(zhǔn))以供排空和蒸汽循環(huán)，不應(yīng)疊放物品包，避免混裝，混裝時(shí)將金屬類物品置于下層從而避免金屬上的冷凝水打濕其他物品，容器口朝下或略側(cè)傾向下，裝載量一般不超過(guò)滅菌器容量的80%，大包物品在上，小包物品在下等等，總之滅菌器不可超載，必須有足夠空間使蒸汽能在物品間形成內(nèi)循環(huán)，利于熱穿透[5]．基于裝載方式的考慮實(shí)施驗(yàn)證，從而避免裝載不當(dāng)導(dǎo)致驗(yàn)證淪為無(wú)效率的試驗(yàn)，使以證明滅菌效果穩(wěn)定為目的的驗(yàn)證，直達(dá)目標(biāo)，更為有效．

在實(shí)驗(yàn)中，我們結(jié)合滅菌器工作原理和數(shù)據(jù)，表明裝載方式對(duì)冷空氣的排空和蒸汽的穿透有重要影響，其中包括承裝物品的網(wǎng)籃．空載試驗(yàn)時(shí)，沒(méi)有物品阻擋，冷空氣較容易擴(kuò)散并排出；盛放物品后，網(wǎng)籃密封的弊端即體現(xiàn)出來(lái)．盛放待滅物品的網(wǎng)籃底部密封時(shí)，嚴(yán)重阻礙了冷空氣下排和蒸汽的穿透，影響滅菌質(zhì)量；更換網(wǎng)籃后，冷空氣下排暢通，并利于蒸汽穿透，從而保障滅菌質(zhì)量；在液體滅菌時(shí)，熱穿透的影響表現(xiàn)尤為突出，裝載籃阻礙排冷空氣及蒸汽穿透，直接導(dǎo)致滅菌失敗，更換為網(wǎng)籃時(shí)即滿足滅菌要求．器皿口朝上時(shí)，同樣存在排冷空氣受阻問(wèn)題，同一批滅菌鍋內(nèi)，口朝上的器皿采集溫度明顯偏低，而從其他器皿采集到的溫度比較均勻，滿足滅菌要求；器皿口朝下時(shí)，冷空氣得以排出，溫度分布均勻，符合要求，保證了滅菌質(zhì)量．

參考文獻(xiàn)：

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[責(zé)任編輯周文凱]

收稿日期：2015-09-05

基金項(xiàng)目：湖北省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(2013CFB224)

通信作者：賀海波(1972-)，男，副教授，博士，主要從事天然藥物的活性評(píng)價(jià)研究．E-mail：hjy219@126.com

DOI：10.13393/j.cnki.issn.1672-948X.2016.01.023

中圖分類號(hào)：R-33

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1672-948X(2016)01-0108-05

Effect of Loading Method on Sterilization of High Temperature and Humidity in Laboratory

Dai Hongmei1，2Zou Kun1He Haibo1Yu Xiaoqin1Yan Weihong1Wang Junzhi1

(1. College of Biological & Pharmaceutical Sciences, China Three Gorges Univ., Yichang 443002, China; 2. Allmed Medical Products Co., Ltd., Yichang, 443000, China)

AbstractThe sterilization effect of the high temperature and humidity in the microbiological laboratory is important. Due to the diversity of sterilization items, no fixed execution plan, the user usually depend on the manufacturer's device, which often appears that the effect of loading method on sterilization effect may also be neglected. In this study, different loading baskets and containers placed in the sterilizer direction were sterilized, observed sterilization effect. By Ellab temperature, pressure sensor, MESA biological indicator, the temperature and pressure during the process of sterilization were collected, and confirm whether to reach the level of sterilization, and compared the data of different loading modes, analyzed the same time in different stages of location temperature sterilization, the same time, the different temperature distributions during the process of sterilization. The fluctuation, range, and F0 values were compared in the acceptable range. The pressure value of the same time was compared with the theoretical saturated steam temperature and the measured temperature of the points. At the same time, we check whether the biological indicator was successful. In the study, we found that ① When no-loading, the two ways of bottom hole and the basket have no obvious difference, which are in line with the implementation of standards. ② Instrument sterilization procedures, the cylinder mouth upward, the cylinder is slowly warming up to the standard. The cylinder mouth down was also in line with the implementation of standards. ③ In contrast under the bottom of the culture medium sterilization procedures without holes and the whole network loading basket mode, no hole is arranged on the upper basket, the temperature of the nutrient medium placed in the middle rise slowly; and the F0 value is not up to the standard; and the corresponding biological indicator culture results were positive under the culture medium sterilization program. The use of a hole basket was in line with the implementation of standards, and the result of the corresponding biological indicator is negative. Whether the loading basket or the goods to be sterilized, the loading way of cold air and steam penetration has an important effect. Based on the consideration of the loading method to implement the verification, we should be in favor of air circulation and other principles, avoid the failure caused by improper loading to guarantee the effect of high temperature and humidity sterilization in the microbial laboratory.

Keywordsloading mode;high temperature and humidity sterilization;effect