人巨細胞病毒感染和圍著床期子宮內膜容受性的相關性分析

四川省巴中市中心醫院(巴中 636000)　李茂華

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人巨細胞病毒感染和圍著床期子宮內膜容受性的相關性分析

四川省巴中市中心醫院(巴中 636000)李茂華

摘要目的：分析人巨細胞病毒感染與圍著床期子宮內膜容受性關系，為著床不利因素提供參考。方法： 選取我院孕齡期婦女為研究對象，在月經20～24d子宮內膜診刮，測定孕激素水平，檢測人巨細胞病毒感染情況，分為活動性感染組、未感染組和既往感染組，定量分析子宮內膜上性激素受體以及整合素β3亞單位變化，并分析臨床妊娠率。結果:三組婦女孕激素水平、子宮內膜厚度無明顯差異(P>0.05)，子宮內膜標本HE染色均未出現細胞形態學改變、淋巴細胞侵潤炎癥反應。三組患者雌激素和雄激素受體無明顯差異(P>0.05)，活動性感染組整合素β3表達(1.6±0.5)顯著低于既往感染組(2.8±0.3)和未感染組(2.9±0.4)(P<0.05)，既往感染組組整合素β3表達與未感染差異不明顯(P>0.05)。未感染組(68.7%)和既往感染組患者臨床妊娠率(61.5%)顯著高于活動性感染組(31.8%)(P<0.05)。結論:人巨細胞病毒感染引起整合素β3亞單位下降，對性激素受體無明顯影響，影響子宮內膜容受性變化。

主題詞巨細胞病毒子宮內膜受體，雌激素整合素β3

胚胎置入成功與否與接受性子宮內膜出現密切相關，在每個排卵周期，子宮內膜僅在極短的時間內孕婦胚胎置入，任何影響容受性建立的因素都可能影響胚胎置入[1-2]。為分析人巨噬細胞病毒感染與圍著床期子宮內膜容受性，采用免疫組化方法測定激素以及整合素變化，報道如下。

資料和方法

1一般資料選取我院收治孕齡期婦女為研究對象，年齡20～35歲，月經規律，周期28～30d，B超檢查無輸卵管積水，排除宮腔操作史、激素服用史等患者。檢測人巨細胞病毒感染，依照血清IgG和IgM檢測結果，分為活動性感染組、未感染組和既往感染組，活動性感染組，IgM檢測陽性，既往感染組IgG檢測陽性，IgM檢測陰性，未感染組IgM檢測陰性，IgG檢測陰性。

2方法配置PBS、抗原修復液、DBA顯色液、10%多聚甲醛溶液。在月經第20～24天子宮內膜診刮，10%多聚甲醛固定，切片厚度5μm。烘干切片脫蠟，侵入酒精、脫二甲苯漂洗，清洗清除酒精，侵入蘇木精染色5min，蒸餾水漂洗，淡氨水化切片，沖洗，0.5%伊紅染色。HE染色常規檢查。子宮內膜組織學分期參照Noyes標準。

常規程度操作，以PBS單一抗體作為陰性對照組，采用免疫組化學、ER、PR，整合素抗體試劑盒。將制備好的組織切片放入烘箱脫蠟，依次進過二甲苯、酒精脫水，采用過氧化氫甲醛抑制酶活性，抗原修復，滴加封閉血清，清去血清，滴加抗體，PBS沖洗，加入工作液，室溫孵育1h，PBS沖洗2次，滴加新鮮配置DAB-H2O2顯色液，自來水漂洗。HE染色出現棕黃色顆粒為陽性，淡黃色為超強陽性，黃色為強陽性，深棕色為陽性，HSCORE =Σpi( I + 1)，I-染色強度。

3統計學方法采用SPSS19.0統計學軟件，孕激素、性激素、整合素β3采用t或者F檢驗，P<0.05表示有統計學差異。

結果

1三組婦女孕激素、子宮內膜厚度比較三組婦女孕激素水平、子宮內膜厚度無明顯差異(P>0.05)，見表1。

表1 三組婦女孕激素、子宮內膜厚度比較

2病檢報告子宮內膜標本HE染色均未出現細胞形態學改變、淋巴細胞侵潤炎癥反應。

3子宮內膜上皮細胞性激素受體、整合素β3表達三組患者雌激素和雄激素受體無明顯差異(P>0.05)，活動性感染組整合素β3表達顯著低于其他兩組(P<0.05)，既往感染組整合素β3表達與未感染組差異不明顯(P>0.05)。

4臨床妊娠率比較未感染組和既往感染組患者臨床妊娠率顯著高于活動性感染組(P<0.05)，詳見表2。

表2　臨床妊娠率比較

討論

胚胎置入是細胞間及與基質見相互作用的結果，黏附分子介導整個過程，在這個過程中，整合素發揮重要作用，整合素為跨膜糖蛋白受體家族，對二價陽離子有依賴性，包括α、β兩種亞單位形式，能夠接到細胞與基質間以及細胞間的信號傳遞過程，整合素β3在子宮內膜腺上皮細胞主要表達以αvβ3二聚體形式為主，出現的時間與子宮內膜著床時間保持一致，因此多數學者認為整合素β3可以作為判斷子宮內膜容受性標志性分子，在本組研究中采用整合素β3進行分析[3-4]。

研究認為在評估子宮內膜容受性中應該采用整合素αvβ3評價，有關巨細胞病毒對整合素β3的表達影響，國內研究較少[5-7]。在本組研究中可以看出三組婦女孕激素水平、子宮內膜厚度無明顯差異，子宮內膜標本HE染色均未出現細胞形態學改變、淋巴細胞侵潤炎癥反應。三組患者雌激素和雄激素受體無明顯差異，活動性感染組整合素β3表達(1.6±0.5)顯著低于既往感染組(2.8±0.3)和未感染組(2.9±0.4)，未感染組(68.7%)和既往感染組患者臨床妊娠率(61.5%)顯著高于活動性感染組(31.8%)，說明巨細胞病毒感染不會引起雌孕激素的變化，可能通過影響整合素β3表達影響胚胎早期置入，導致早孕流產。國外有研究指出認巨細胞病毒感染與整合素β3結合，感染時巨細胞病毒解聚素與整合素β3相結合，隨著整合素β3進入到內部，轉移到脂質體，發揮相互作用，刺激下游信號因子，EGFR歲以來的整合素β3能夠誘發協同信號，促進細胞遷移、炎癥因子等生物學行為，因此感染人巨細胞病毒，一般不會在上皮細胞膜上發揮出下過，而是引起整合素β3表達的變化，進而引起后續反應。在本組研究中活動性感染組護上皮細胞漿存在棕黃色顆粒，提示巨細胞病毒能夠與整合素β3相結合，引起整合素β3水平的異常。在本組試驗中，活動病毒感染組細胞漿并沒有出現整合素β3的表達，而且整合素β3表達也顯著降低，推測人巨細胞病毒感染抑制整合素β3的分泌合成，關于具體機制尚需要進一步分析。

總之，人巨細胞病毒感染引起整合素β3亞單位下降，對性激素受體無明顯影響，影響子宮內膜容受性變化。

參考文獻

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[2]宋家美, 孟昱時. miRNA-31、轉錄因子C/EBP-β與子宮內膜容受性的相關性[J]. 中國生育健康雜志, 2015，(5)：516-517.

[3]魏勉. 整合素αvβ3和骨橋蛋白在人子宮內膜容受性的建立和胚胎著床中作用機制研究進展[J]. 現代婦產科進展, 2013, 22(3):234-236.

[4]王溦. LPAR3、COX-2和VEGF蛋白在反復移植失敗患者著床期子宮內膜表達的研究[D]. 鄭州大學, 2014.

[5]孫虹. 人巨細胞病毒感染對圍著床期子宮內膜容受性影響的初步研究[D]. 華中科技大學, 2006.

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[7]陳文英. 溫經湯直腸滴入對體外受精-胚胎移植失敗患者子宮內膜容受性的影響[J]. 陜西中醫, 2013，34(3)：266-268.

(收稿：2016-04-08)

【中圖分類號】R714

【文獻標識碼】A

doi：10.3969/j.issn.1000-7377.2016.08.065

The study on the effects of Human Cytomegalovirus infection on endometrial receptivity during peri-implantation period

Central Hospital of Bazhong(Bazhong 636000)Li Maohua

ABSTRACTObjective:To analyze the study on the effects of Human Cytomegalovirus infection on endometrial receptivity during periimplantation period,and analyze reference implantation for unfavorable factors.Methods:Gestational age of implantation endometrium specimens in hospital from May 2014 to December 2015 were selected,Endometrial curettage was did in 20～24d,progesterone levels are measured,patients divided intoactive infection group , uninfected group and past infection group according to HCMV infection,hormone receptor and integrin β3 subunit on endometrial changes were quantitative analysis.Results:There were no significant differences in the level of progesterone and endometrial thickness between the three groups (P>0.05). The changes of cell morphology, lymphocyte infiltration and inflammatory reaction were not found in the endometrial specimens HE staining. Three groups of patients with estrogen and androgen receptor (AR) was not significant difference (P>0.05), the activity of infected group of integrin 3 expression (1.6 + 0.5) was significantly lower than that of previous infection group (2.8 + 0.3) and non infection group (2.9 + 0.4) (P<0.05), previous infection group and non infected group of integrin 3 expression were no significant difference (P>0.05). The clinical pregnancy rate (61.5%) was significantly higher in the uninfected group (68.7%) than in the active group (31.8%) (P<0.05).Conclusion:HCMV infection integrin β3 subunit decreased receptor had no effect on sex hormones, affect endometrial receptivity changes.

KEY WORDSCytomegalovirusEndometriumReceptors,EstrogenIntegrin beta 3