不同樣品中大腸菌快速紙片法與傳統發酵法檢測結果分析

蒙嘉鵬

（華測檢測認證集團股份有限公司 廣東深圳 518101）

不同樣品中大腸菌快速紙片法與傳統發酵法檢測結果分析

蒙嘉鵬

（華測檢測認證集團股份有限公司 廣東深圳 518101）

目的：探討不同樣品中大腸菌快速紙片法與傳統發酵法檢測結果。方法：通過快速紙片法與傳統發酵法對240份包括餐具、水質、鹵菜、冷凍飲品和糕點等在內的樣品進行檢測，回顧分析不同方法檢測結果的符合率。結果：不同類型樣品發酵法檢測真陽性率對比具有明顯的統計學差異（P＜0.05）。不同污染程度樣品兩種方法檢測結果對比具有明顯的統計學差異（P＜0.05）。不同類型樣品兩種檢查方法大腸菌群陽性符合率對比有明顯的統計學差異（P＜0.05）。結論：快速紙片法用于樣品大腸菌群檢測，具有較高的準確性。

大腸菌；快速紙片法；傳統發酵法

大腸菌群是一種食物糞便污染評定的關鍵性指標，其衛生學意義較為廣泛，傳統發酵法是食品衛生國家標準檢驗方法中較為常用的大腸菌群檢測和評定技術，但這一檢測方法時間消耗較長，需要消耗較多的培養基，且操作程序較為復雜，無法滿足實際檢測工作的需要。隨著近年來科學技術的快速發展，市場上也逐漸發展處了多種大腸菌群快速檢測技術，實現了食品安全檢測效率的提高。但是，我國對于不同大腸菌快速檢測方法仍然缺乏統一的規定和評價標準。本文就對不同樣品中大腸菌快速紙片法與傳統發酵法檢測結果進行了分析，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

①快速試紙。本研究所用快速檢測紙片由深圳市博卡生物技術有限公司生產，且在有效期內。②發酵培養基。根據《食品衛生微生物學檢驗大腸菌群測定》（GBT4789.3-2003）要求自行配置發酵培養基。③樣品來源。本研究所用標本均由市疾病防御控制中心提供，共計480份，其中，餐具、水質、鹵菜、冷凍飲品和糕點各120份，將全部樣品隨機制成不同的污染程度，包括103cfu/ml、102cfu/ml、101cfu/ml空白，所選餐具均從當地小吃市場隨機抽取。

1.2 方法

本研究分別通過快速紙片法與傳統發酵法對餐具、水質、鹵菜、冷凍飲品和糕點等不同類型樣品的大腸菌群結果進行檢測，檢測過程中嚴格執行試劑盒說明書操作要求，其中，餐具類樣品檢測參照標準為《食（飲）具消毒衛生標準》（GB14934-94），水質類樣品檢測參照標準為《生活飲用水衛生規范（2001年）》，食品類樣品檢測參照標準為《食品衛生微生物學檢驗大腸菌群測定》（GBT4789.3-2003）。

1.3 統計學處理

本次醫學研究通過SPSS17.0軟件分析和處理所得數據。計數資料通過X2檢驗方法進行統計學處理，計量資料通過（x±s）方法進行統計學處理和表示，其他數據資料通過單因素方差分析法進行統計學處理，如果所得分析結果P＜0.05，可以證實兩組數據資料對比具有明顯的統計學差異。

2 結果

2.1 紙片法弱陽性標本的發酵法檢測結果

不同類型樣品中，糕點的真陽性率相對較高，而水質的真陽性率則相對較低，不同類型樣品發酵法檢測真陽性率對比具有明顯的統計學差異（P＜0.05），如表1所示。

表1 紙片法弱陽性標本的發酵法檢測結果分析（單位：n/%）

2.2 不同污染程度樣品檢測結果

檢測結果證實，102cfu/ml以上污染程度的冷凍飲品使用紙片法和發酵法檢測結果完全相符，而不同污染程度鹵菜使用紙片法和發酵法檢測結果相符度均較低，不同污染程度樣品兩種方法檢測結果對比具有明顯的統計學差異（P＜0.05），如表2所示。

表2 不同污染程度樣品檢測結果分析（單位：n/%）

2.3 不同樣品兩種檢測方法大腸菌群陽性符合率

發酵法和紙片法用于水質樣品檢測，其大腸菌群陽性符合率為100%，而兩種檢測方法用于鹵菜樣品檢測，其大腸菌群陽性符合率僅為66.7%，不同類型樣品兩種檢查方法大腸菌群陽性符合率對比有明顯的統計學差異（P＜0.05），如表 3所示。

表3 不同樣品兩種檢測方法大腸菌群陽性符合率分析（單位：n/%）

3 討論

大腸菌群檢測主要用于評價食品是否發生糞便污染，以及人體食用后有無健康危害，因而也是國家對于食品安全衛生評定的一項關鍵性指標。現階段，我國常用的檢測方法和標準為三步九管發酵法，但是，這一檢測技術具有無法滿足衛生監督工作需要、操作時間長、程序繁瑣復雜、工作量大等問題。本文通過快速紙片法對食品中的大腸菌群含量進行檢測，能夠最大限度降低檢測的成本，縮短檢測時間，且操作方法較為簡單易行，檢測后15～18h左右即能夠獲得最終結果，且快速紙片法用于大腸菌群檢測的敏感性相對較高，對于糕點、餐具、水質等的檢測合格率能夠達到95%左右，因而這一檢測技術逐漸成為了食品安全檢查人員應用的首選，但是，快速紙片法僅可用于初步的實驗和篩選，無法統一用于衛生執法監測[1～3]。

快速測試片指的是以膠片、紙膜、紙片等作為培養基載體，在其上附著特定的顯色物質和培養基，并對上面的微生物顯色和生長情況加以測定，因而是一種較為科學的檢測技術[4]。受到不同類型樣品pH值和成分等因素的影響，這一方法的最終檢測結果也存在一定的差異，本研究結果證實：樣品的干擾因素越復雜，成分越多，則其檢測結果的變動性越大[5]。傳統發酵法與快速紙片法對于水質和餐具等的檢測結果基本相同，且所受的影響和干擾也較小，與以往的研究結果相同，而對于鹵菜和冷凍飲品等的檢測結果則存在一定的差異，其主要原因在于，兩種樣品的色素和pH值存在一定差異，所以，我們需要按照樣本的不同類型，對快速試紙進行選擇[6]。

由本次研究實驗結果可知，傳統發酵法和快速紙片法用于不同樣品中大腸菌群的檢測，快速紙片法在檢測成本、敏感程度、獲取報告時間和操作簡便性等方面優勢更加明顯[7]，但是，需要從使用者的實際需要和生產廠家的不同出發，對相應類型的標本進行配置，供使用者進行配對選擇，同時，需要通過傳統方式對不典型結果進行判斷[8]。另一方面，ISO標準要為快速檢驗方法提供一個比對標尺，從而判斷檢測結果的偏差是否可以接受[9]。

[1]朱培玉，魏珂.固定底物酶底物法與多管發酵法和快速紙片法測定水中糞大腸菌群（耐熱大腸菌群）的比較[J].四川環境，2014，33（2）：30～31.

[2]趙春霞，張哲海，厲以強，等．酶底物法與多管發酵法和紙片法監測環境水樣大腸菌群的比較[J].環境監測管理與技術，2009，21（2）：63～64.

[3]石海根，任萬平.紙片法與發酵法檢測餐具大腸菌群結果比較[J].衛生防疫消毒，2010，1（2）：240～241.

[4]張吉龍，何繼明，何敏.水中糞大腸菌群檢測方法及其研究進展[J].青海環境，2012，4（2）：89～90.

[5]潘力軍，高新崗，王友斌．醫療機構污水糞大腸菌群快速檢測方法研究初探[J]．中國衛生檢驗雜志，2010，20（8）：2091～2092．

[6]馬 原，劉虹．幾種糞大腸菌群檢測方法的比較[J].黑龍江環境通報，2011，34（3）：43～45．

[7]趙春霞，張哲海，厲以強，等．酶底物法與多管發酵法和紙片法監測環境水樣大腸菌群的比較[J].環境監測管理與技術，2009，2（1）：63～64．

[8]張吉龍，何繼明，袁泉，等.多管發酵法與其改進法檢測水中糞大腸菌群的比較[J].四川環境，2012，31（5）：8～10.

[9]史 健.糞大腸菌群檢測方法研究進展[J].河北化工，2012，35（7）：32～33.

R155.5

A

1004-7344（2016）10-0335-02

2016-3-24

蒙嘉鵬（1987-），男，生物技術助理工程師，本科，主要從事食品微生物檢測工作。