地方養殖場豬大腸桿菌病的發病情況與耐藥性檢測分析

林振華（山東恒信檢測技術開發中心，山東 濟南 250000）

地方養殖場豬大腸桿菌病的發病情況與耐藥性檢測分析

林振華
（山東恒信檢測技術開發中心，山東 濟南 250000）

目的：分析地方養殖場豬大腸桿菌病的發病情況與耐藥性檢測。方法：采集我縣126多個養殖場患有仔豬直腸拭子、腸內容物、腸系膜淋巴結等疾病的豬樣品，對他們進行菌株分離、血清型鑒定和耐藥性實驗檢測，然后對研究資料進行整理歸納。結果：從樣品中分離出102株致病性大腸桿菌；通過藥敏試驗表明，對大腸桿菌致病菌株敏感度最高的有頭孢三嗪氟苯尼考、頭孢西丁、先鋒霉素V和丁胺卡那等9種抗生素，而對青霉素、利福平、阿莫西林、強力霉素等藥物的耐藥性菌株比例均大于60.7%。結論：為了降低細菌對抗生素產生耐藥性，在豬大腸桿菌病臨床上交替使用高敏抗生素，增強抗生素療效。

豬大腸桿菌病；發病情況；耐藥性檢測分析

在養殖場中，大腸桿菌病是危害嚴重的常見病和多發病，其發病率和死亡率位于仔豬疫病之首。如果大腸桿菌病情況出現，含有細菌的糞便排泄物被其它同窩豬只食入經消化道感染，就會直接讓同圈的豬暴發大腸桿菌病，具有傳染性。而目前的治療方式主要通過抗生素進行治療，但是近年來，但是大腸桿菌極易產生耐藥性，加上抗生素大量的濫用，從而導致細菌產生嚴重的耐藥性，需要加大劑量才能使得抗生素對病菌產生作用，使得治療成本增多，加重養殖負擔。為了能更加有效的進行治療和預防，節約養殖場成本，合理利用抗生素，通過耐藥性檢測實驗分析，探討豬大腸桿菌病治療與預防的幾點措施，現報告如下。

1　資料與方法

1.1 一般資料

采集我縣126多個養殖場患有仔豬直腸拭子、腸內容物、腸系膜淋巴結等疾病的豬樣品作為實驗研究對象，通過對大腸桿菌病死仔豬心、肝、脾、肛門等部位還有可疑病豬的直腸內容物等病料進行大腸桿菌分離實驗，并對實驗做出分析和總結［1］。

1.2 方法

1.2.1 菌株分離和鑒定法

首先，使用滅菌棉從126例有豬大腸桿菌病中取白痢仔豬病例直腸內糞便或者是死亡仔豬腸內容物。其次，接種于麥康凱培養基上，在37攝氏度的溫度下培養18至24個小時后，取粉紅色可疑菌落接種于伊紅美蘭培養基，再次放于37攝氏度的溫度下培養18至24個小時，挑取紫黑色帶金屬光澤可疑菌落進行革蘭氏染色進行鏡檢。最后，將其培養特性、形態和革蘭氏染色反應均符合大腸桿菌特征的菌株，采用普通營養瓊脂純化作，再進一步生化鑒定。

1.2.2 生化試驗法

首先，將已經分離純化的菌株采用微量生化反應管進行生化反應試驗。其次，取待檢菌純培養物分別接種在乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇、鳥氨酸、賴氨酸、尿素酶、枸櫞酸鹽、半固體瓊脂培養基上，37攝氏度恒溫培養18至24個小時，然后觀結果。最后，再將待檢菌純培養物少量接種于葡萄糖蛋白胨水生化管中，37攝氏度恒溫培養24至48小時后進行甲基紅試驗、VP試驗和吲哚試驗［2］。

1.2.3 藥敏試驗法

首先，挑取以鑒定好的豬源致病性大腸桿菌，將其均勻密集劃線于營養瓊脂平板上。然后，用滅菌的鑷子取各種藥敏紙片按每兩個紙片中心距離不少于25 mm分別貼于培養基表面，紙片一旦貼在某一位置上，在37攝氏度恒溫下培養24個小時。

2　結果

2.1 菌株分離和鑒定法結果分析

經過觀察試驗，發現病料接種于營養瓊脂平板經培養后可見有菌落長出，具體的調整為：圓形、凸起、光滑、濕潤、直徑為1～3 mm邊緣和不規則半透明；將菌落再接種于麥康凱瓊脂平板培養后，長出圓形、光滑、濕潤、直徑2至3 mm的磚紅色菌落；最后，挑取紫黑色帶金屬光澤可疑菌落接種于營養瓊脂平板，通過鏡檢可發現鏡檢紫紅色、著色均勻、單個或成對的無莢膜、無芽孢、兩端鈍圓的短桿菌，有101株疑似菌株符合豬大腸桿菌形態特征。

表1 關于86株生化實驗結果表

2.2 生化試驗法結果分析

對101株分離菌進行了16項生化試驗，發現有86株病原菌符合大腸桿菌生化特性，詳見表1。注（+為陽性，-為陰性）

2.3 耐藥性結果分析

經過試驗分析，發現有99株豬源致病性大腸桿菌對20種受試藥物表現不同程度的耐藥性，其中對磺胺類四環素類大環內酯類及青霉素類的藥物耐藥性強，耐藥率高達73.2%以上。

3　討論

能及時快速的對豬大腸桿菌病的判斷非常重要，事關到養殖場安全問題，危急到豬等健康和生命安全都應該給予重視的。通過本研究通過病原菌分離觀察、純化培養和鏡檢以及生化試驗，結果表明了解病原特點對及時有效地制定防治方案對養殖場而言是非常有幫助的。本次研究中，疑似豬大腸桿菌病病料126份中有86份符合大腸桿菌特性，并通過生化實驗檢測大腸桿菌的抗原類型主要由O、K、H抗原組成的，大部分是大腸桿菌的O抗原類群。

綜上所述，為了能做到預防大腸桿菌傳染給仔豬或者是其他的豬圈，要加強消毒措施，重視豬舍外部環境，保持豬舍通風、清潔、干燥，定期對豬圈進行消毒，提升他們的生存環境，控制它們的的發病情況。

［1］高敏，賈瑞志，仇天雷，等.集約化養雞場空氣環境中生物氣溶膠特點研究［J］.農業環境科學學報，2015，（04）.

［2］段俊秀.雞大腸桿菌的分離鑒定及耐藥性試驗［J］.中國畜牧業，2015，（05）.

（編輯：晏兵兵）

S858.28

A

1006-799X（2016）13-0085-02