胃癌患者血漿microRNA-155的表達及其臨床意義

王　競　楊川杰

(河北醫科大學第一醫院消化內科，河北　石家莊　050000)

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胃癌患者血漿microRNA-155的表達及其臨床意義

王競楊川杰1

(河北醫科大學第一醫院消化內科，河北石家莊050000)

胃癌；微小RNA；miR-155；血漿；腫瘤標記物

早期發現、早期診斷、早期治療是提高胃癌生存率的重要措施。探索經濟有效、安全簡便的篩查方法和特異性及敏感性均較好的腫瘤標記物對提高胃癌的檢出率具有重要意義。microRNA-155(miR-155)為癌基因B細胞整合集簇(BIC)的表達產物，有研究發現其在結直腸癌、胰腺癌、肝癌等腫瘤中表達增加，其可能參與了腫瘤的發生與發展。本文擬通過檢測胃癌及胃炎患者血漿miR-155水平，研究胃癌患者血漿miR-155表達與患者臨床病理學特征間的關系，初步探討miR-155在胃癌發生、發展中的作用。

1　材料與方法

1.1研究對象2011年1～12月在我院住院治療的胃癌及胃炎患者及期間的健康體檢者，分為胃癌組71例，男43例，女28例，平均年齡(63.30±5.62)歲；胃炎組69例，男44例，女25例，平均年齡(62.35±4.64)歲；健康對照組68例，男42例，女26例，平均年齡(62.12±3.53)歲。見表 1。所有病例納入者均符合世界衛生組織(WHO)在2008年出版的腫瘤病理學與遺傳學分類中的診斷標準，并由病理醫師再次應用HE切片確診。

1.2試劑與方法Trizol試劑購自深圳晶美生物工程有限公司，逆轉錄(RT)試劑盒、qRT-PCR試劑盒、RT引物、內參U6均購自廣州銳博公司，SYBY Green 試劑，購自康為世紀公司。確定研究對象后，用依地酸二鈉(EDTA)抗凝管收取受試者外周靜脈血約2 ml，讓血液與管壁的抗凝劑充分接觸，4℃條件下，1 600 r/min離心10 min，離心2次獲得血漿，將上層血漿分裝至無酶EP管中，置入-80℃冰箱儲存待用。實驗過程嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

1.3血漿miR-155表達量的計算在目的基因與內參照基因擴增效率相同的情況下，以U6為內參照，測定循環閾值(Ct值)，計算△Ct值，△Ct=miR-155的平均Ct值-U6平均Ct值，以2-△△Ct表示miR-155的表達量水平。

1.4統計學處理采用SPSS13.0軟件行方差分析。

2　結　果

2.1各組血漿miR-155表達量比較胃癌組、胃炎組及健康對照組血漿miR-155表達量分別為2.06±1.03、1.36±0.08、1.32±1.03，胃癌患者血漿miR-155表達量明顯高于其他兩組(P<0.05)。胃炎患者與健康成年人無明顯差異(P>0.05)。

2.2胃癌患者血漿miR-155表達量與臨床特征的關系胃癌患者血漿miR-155的表達量與患者性別、年齡、不同臨床分期關系、是否存在淋巴結轉移、是否有遠處臟器的轉移、病理分型間的表達量無明顯相關性(P>0.05)，見表1。

表1　血漿miR-155表達量在不同臨床病理特征間的比較±s)

3　討　論

胃癌多無特異性的臨床表現，發現時往往已進展到中晚期。因此提高胃癌的早期檢出率，是減少病死率、改善患者預后的關鍵。微小RNA(miRNA)廣泛存在于真核生物細胞中，是非編碼的單鏈小分子RNA，長19～24 nt，是一類基因表達轉錄后調控因子〔1〕，其通過與靶mRNA的3′UTR的堿基互補結合，促進靶mRNA的降解或抑制翻譯，參與了細胞的增殖、分化、凋亡以及干細胞自我更新等多種生理過程〔1，2〕。目前研究認為，一些microRNA與腫瘤關系密切，在多種腫瘤的發生、發展及轉移過程中發揮著一定作用〔1～4〕，研究表明miRNA在腫瘤中與在正常組織中有不同的表達譜，因此其不但可以作為腫瘤的診斷指標，還可以幫助判斷預后〔5〕，發揮著原癌基因或抑癌基因的作用〔6〕。

miR-155是新近發現的與腫瘤密切相關的miRNA，是癌基因BIC的表達產物在多種人類實體惡性腫瘤組織中表達升高。本研究中發現，血漿miR-155在胃癌患者中表達量較高，而在慢性非萎縮性胃炎、健康成人中表達量較低，說明血漿miR-155可能參與胃癌的發生。正如Lee等〔7〕應用miRNA基因芯片技術研究胰腺導管癌、配對的胰腺良性組織、正常胰腺組織及胰腺癌細胞株，結果發現miR-155在胰腺癌、增生組織中表達明顯異常，Ryu等〔8〕應用RT-PCR檢測了31例胰腺上皮內瘤變組織，miR-155的表達水平較正常組織明顯增加的結論一樣，miR-155從轉錄后水平上廣泛參與基因表達的調控，其表達的改變可以導致遺傳信息表達的改變，從而導致一定的病理狀態，導致腫瘤的發生。本研究結果說明miR-155可能與胃癌的進展情況無關。

1Dirks PB.microRNA and parallel stem cell lives〔J〕.Cell，2009；138(2)：424-5.

2Yohei S，Maider Z，Robert WC，etal.Down regulation of miRNA-200c links breast cancer stem cells with normal stem cell〔J〕.Cell，2009；138(2)：592-603.

3Zhang X，Ladd A，Dragoescu E，etal.MicriRNA-17-3p is a prostate tumor suppressor in vitro and in vivo，and is decreased in high grade prostate tumors analyzed by laser capture micro-dissection〔J〕.Clin Exp Metastasis，2009；26(8)：965-79.

4Bhatti I，Lee A，Lund J，etal.Small RNA：a large contributor to carcinogenesis〔J〕?2009；13(7)：1379-88.

5黃偉，孫巖，韓瑞發.MicroRNA與癌癥的研究進展〔J〕.天津醫藥，2009；37(3)：238-40.

6Esquela-Kerscher A，Slack FJ.Nokomis-microRNAs with a role in cancer〔J〕.Nat Rev Cancer，2006；6(4)：259-69.

7Lee EJ,Gusev Y,Jiang J,etal.Expression profiling identifies microRNA signature in pancreatic cancer〔J〕.Int J Cancer,2007;120:1046-54.

8Ryu JK，Hong SM，Karikarri CA，etal.Aberrant miR-155 expression is an early event in the multistep progression of pancreatic adenocarcinoma〔J〕.Pancreatology，2010；10(1)：66-73.

〔2014-12-03修回〕

(編輯趙慧玲/曹夢園)

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.14.113

楊川杰(1972-)，女，博士，副主任醫師，碩士生導師，主要從事消化道肺瘤研究。

王競(1978-)，女，主治醫師，主要從事消化道肺瘤研究。

R73

A

1005-9202(2016)14-3590-02；

1河北醫科大學第二醫院消化內科