酶聯免疫吸附試驗檢測乙肝兩對半的教學體會

秦靜英

（南寧市衛生學校，廣西 南寧 530031）

酶聯免疫吸附試驗檢測乙肝兩對半的教學體會

秦靜英

（南寧市衛生學校，廣西 南寧 530031）

為達成我校以學生的發展為本，提高學生的就業競爭能力、升學競爭能力和可持續發展能力的辦學目標，免疫學檢驗課程制訂專業課教學與臨床崗位零距離對接的教學目標。結合酶聯免疫吸附試驗檢測乙肝兩對半的理論及實驗教學談談教學體會。

酶聯免疫吸附試驗；乙肝兩對半；免疫學檢驗

酶聯免疫吸附試驗（Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay，ELISA）由于具有快速、靈敏、簡便、載體易于標準化等優點，在臨床免疫檢驗診斷中廣泛應用。乙肝兩對半的檢測常用ELISA法，該實驗檢測項目多，步驟繁瑣，操作上涉及靜脈采血技術，血清稀釋，洗板機、酶標儀、離心機、水浴箱的使用［1］，實驗診斷受到抗原抗體濃度、酶結合物濃度以及質量控制等因素的影響。

為達成我校以學生的發展為本，提高學生的就業競爭能力、升學競爭能力和可持續發展能力的辦學目標，免疫檢驗課程通過制訂專業課教學與臨床崗位零距離對接的教學目標，實施學生自主學習—教師點撥輔導的實驗教學模式。按照免疫檢驗臨床實際的工作流程和質量管理，我們對ELISA檢測乙肝兩對半進行相應教學設計，將理論知識和技術應用能力的訓練滲透到實驗教學過程中，便于學生牢固地掌握理論知識，讓學生學有所得、學有所思、學有所用，以下談談筆者的教學體會。

1　采用的教法、學法

以往的理論授課采用傳統的講授法，由于受到課堂規則、心理環境、激勵機制等因素的影響，教師在課堂講授過程中存在許多不盡如人意的地方。如ELISA檢測乙肝兩對半涉及雙抗體夾心法、雙抗原夾心法、競爭法原理，內容上有嚴謹的系統性和組織性，授課中若只是簡單地將知識點堆積，沒有講清知識之間的內在聯系，會在一定程度上影響課堂教學的實際效果。在實驗教學中，實驗材料的準備、儀器的準備及調試、標本及試劑的處理等工作基本上是由指導教師包辦，實驗的許多中間環節學生沒有親自參與，因而在教學任務完成后，部分學生對實驗的原理、操作還是一知半解，更談不上能力的鍛煉和培養。我們根據學生的學習特點和認知規律，通過優化教學內容，注重理論聯系實際，在教法上采用任務驅動法、直觀教學法、討論教學法及實驗教學法等，激發學生進一步探究問題、積極參與教學活動的欲望。

實驗過程中注重培養學生的職業能力，提高學生分析問題、解決問題的能力，因而采用自主學習法、合作探究法、分析討論法等。如在教學準備環節，將學生分組（5人/組），指定各組組長，布置以下學習任務：（1）乙肝兩對半包括哪些項目？（2）常見的乙肝兩對半檢測結果是哪些？有何臨床意義？（3）應用了ELISA的什么原理？（4）接觸血液、分離血清標本需實施哪些安全保護措施？（5）實驗用品的準備和注意事項有哪些？

2　使用多媒體信息技術手段輔助教學

2.1登錄網站搜集資料，建立QQ、微信討論組

乙肝兩對半檢測與實際生活聯系較為密切，學生對于乙肝病毒的傳染性、病毒攜帶者、“大三陽”等知識有所了解，但學生對乙肝病毒采用的檢測方法及原理、臨床意義缺乏認識。教學設計中，我們注重理論聯系實際，讓學生感到所思考的問題是熟悉的、常見的，同時又是新奇的、富有挑戰性的，激發學生探究問題、尋找答案的欲望。教師布置學習任務后，學生通過查閱書籍、登錄網站搜集資料，并結合自己或家人曾經到醫院檢驗科化驗檢查的結果來獲取乙肝兩對半檢測的相關知識。通過QQ、微信的形式建立討論組，針對ELISA檢測乙肝兩對半的相關知識進行討論，分享學習經驗，教師及時跟進、指導，在討論組實現師生、生生討論。

2.2Flash動畫及圖片的應用

ELISA檢測乙肝兩對半涉及雙抗體夾心法、雙抗原夾心法、競爭法原理，抽象難懂，通過Flash動畫、圖片演示，把實驗原理直觀形象地展示出來，可以增強教學內容的可讀性和可接受性，解決內容單調乏味、難以接受的問題。教師針對重要知識點提問，由此突破教學重點、難點，可達到預期的教學效果。

2.3教學錄像、視頻的應用

教學過程中，以學生的學為中心，以符合學生的認知規律為前提，為使學生對操作步驟有感性認識，我們設計、制作適合于教學對象的教學錄像、視頻，使得操作更為直觀［2］，促使學生對原有知識進行回顧和鞏固，培養學生的思維能力、記憶力、主動學習能力。如通過視頻導入教學，視頻內容為某患者出現了肝炎的臨床癥狀，血清乙肝兩對半檢測結果為HBsAg（+）；HBeAg（-）；抗-HBs（-）；抗-HBe（-）；抗-HBc（-），提出問題：（1）乙肝兩對半常用何種方法檢測；（2）患者的檢測結果如何分析？有何意義？從一開始上課就牢牢地吸引學生的注意力，加深學生對乙肝兩對半檢測意義的理解。

此外，我們自制了乙肝兩對半檢測的教學錄像、洗板機及酶標儀的編程錄像。教師針對性地對實驗環節如操作步驟、結果觀察、注意事項進行重點講解，激發學生參與實驗活動的熱情，增強學生做好實驗的自信心。

2.4計算機交互平臺的應用

為了檢驗學生對ELISA檢測乙肝兩對半的理論掌握程度、提高學生的實驗技能、完善學生免疫檢驗課程成績評價體系，我們對學生進行實驗考核，采取以考促學的手段，加大ELISA檢測乙肝兩對半的訓練力度，包括理論考核（30分）和操作考核（70分）。

理論考核采用本教研室的計算機交互平臺進行，根據教學內容的特點，理論考核我們進行這樣的設計：首先收集乙肝兩對半檢測相關試題共25題，內容涉及實驗原理、操作、材料、結果觀察及臨床意義。如：（1）乙肝兩對半檢測涉及ELISA的哪些原理？分別檢測什么項目？（2）通過各反應孔顯色，如何判斷疫苗接種者、病毒攜帶者、“大三陽”、“小三陽”？（3）手工洗滌有何要求？（4）加終止液的目的是什么？（5）ELISA常用的酶是哪種？其底物是什么？考慮到學生對理論考核容易產生畏難情緒，在題型上設有填充題、標示題、連線題及填空題等，內容直觀、清晰，以PPT形式組卷，使學生“寓考于樂”，輕松愉快地完成理論考核。從試題庫集中抽題組卷，考核內容及題型見表1，共組10套試卷。學生抽簽后通過計算機交互平臺進行考試，本教研室的計算機交互平臺可實現全班學生同時測試及無紙化考試。

表lELISA檢測乙肝兩對半理論考核內容及題型

圖1　ELISA雙抗體夾心法測HBsAg

2.5開放式微生物教學系統的應用

ELISA檢測乙肝兩對半在內容上與醫學微生物學、生物化學密切相關。開放式微生物教學系統操作簡單、直觀，同時具有良好的交互界面、動態效果，能夠從視覺上、聽覺上吸引學生的注意力，為學生提供自主學習的平臺，擴充相關學習內容。學生在課后可進入開放式微生物教學系統，通過觀看視頻，針對乙肝病毒的內容進行學習。該教學系統能幫助學生復習、鞏固相關知識，并能重復學習。

3　督導實驗，及時進行總結

乙肝兩對半共有5個檢測項目，目前多采用商品化的ELISA試劑盒，需用到5種試劑盒，各個項目的操作步驟不同，實驗中若不細心就容易出錯。在學生操作過程中，教師巡視指導，督導每位學生的操作。此外，每個小組由小組長協助監督，及時發現錯誤并糾正，以免影響結果。

由于學生用的是自體標本，實驗態度與參與積極性明顯提高，且操作認真。實驗結束后，學生很急切地想要知道自己的檢測方法對不對，結果與預計的是否符合。在教師的組織下，學生對整個實驗進行分析及總結，可加深對乙肝和ELISA檢測法的認知。如本次課學會了什么？有何體會？總結成功的經驗、失敗的經驗、容易出錯的環節等。每組學生對實驗過程和實驗結果進行整理和綜合分析，每名學生完成一份實驗報告。通過總結，進一步加深學生對乙肝兩對半檢測相關知識的理解，加深對免疫學檢驗專業技能的認知。

4　重視人文關懷，拓展知識，做好防治

我國人群中乙肝病毒感染率為10%，醫學生是未來的醫務人員，是高危人群，醫院內污染的器械、血標本及各種不規范操作均可引起感染。ELISA檢測乙肝兩對半所用的標本為學生自體血清標本，實驗結果顯示，絕大多數學生為健康人，乙肝兩對半5項全陰性的學生要求在實習前完成乙肝疫苗的全程接種，通過接種疫苗關愛自己，保護他人［3］。對乙肝病毒感染的可疑標本，由指導教師復查，以確定是否具有傳染性，以便讓學生及時到專科診治，對感染了乙肝病毒的學生，教師要保護學生的隱私，指導學生以正確的態度去面對，不要產生心理負擔，同時要重視乙肝的防治。

通過觀看乙肝宣傳片，完成乙肝手抄報作業，加深學生對乙肝流行情況、臨床表現、臨床類型、檢測方法及防治原則的認知，積累自我保護經驗。在集體生活環境中注意個人衛生，不用他人的生活用品，養成良好的衛生習慣［4］。在實際工作中，樹立防范意識，在微生物檢驗、生物化學檢驗、臨床檢驗等專業課程開設的實驗中正確處理血標本、血污染物品，規范操作，避免意外感染的發生。

5　制訂切實可行的評價標準

結合本課題的教學目標、教學內容和學生的學習環境以及學生個體差異等制訂切實可行的評價標準。設計了教師評價、小組評價及個人評價，從各個角度對本課題的實施情況進行評價。以2014級86位學生為例，評價結果見表2。通過評價，有助于學生反思和調控自己的學習過程，讓每名學生都能體驗到成功的樂趣，非常有利于學生更好地認識自我，樹立自信。

免疫學檢驗課程實踐性強，理論內容抽象不易學習。實驗前，學生對ELISA夾心法、競爭法等概念及原理存在模糊、混淆的情況。教師應在ELISA檢測乙肝兩對半的理論和實驗教學過程中強調理論聯系實際，對教學內容、教學環節進行精心設計，使學生很快掌握該實驗的原理、操作、結果判斷及分析，對乙肝的傳播途徑、致病性、防治方法及免疫有一定的認知，使專業技能得到進一步提高，為實習及將來的工作打好基礎。

表2　ELISA檢測乙肝兩對半的小組評價結果

［1］田兆菊.綜合性實驗在臨床免疫學檢驗實驗教學中的應用及體會［J］.國際檢驗醫學雜志，2014，35（2）：250-251.

［2］石云.多媒體教學在臨床免疫學及檢驗實驗教學中的應用［J］.中國實驗診斷學，2011，15（2）：1379-1380.

［3］鄧青.乙肝疫苗免疫效果評價［J］.中國衛生統計，2010，27（4）：388-389.

［4］程君平.在微生物與免疫實驗教學中開展ELISA檢測乙肝的意義［J］.衛生職業教育，2004，22（18）：108-109.■

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1671-1246（2016）16-0053-03