茶樹己糖磷酸轉運器基因GPT的克隆及表達1)

張婭婷　孫楠　劉瑞瑞　韓雅彭　程琳　王磊　袁紅雨

(信陽師范學院，信陽，464000)

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茶樹己糖磷酸轉運器基因GPT的克隆及表達1)

張婭婷孫楠劉瑞瑞韓雅彭程琳王磊袁紅雨

(信陽師范學院，信陽，464000)

Cs-Ev17(GenBank登錄號：GH618812)為一受假眼小綠葉蟬取食誘導的茶樹葡萄糖-6-磷酸/磷酸轉運體基因的cDNA片段，采用RACE技術克隆該基因的全長cDNA序列，命名為CsGPT(GenBank登錄號：FJ648829)。其全長為1 514 bp，包含一個編碼401個氨基酸的開放性閱讀框，5′-UTR和3′-UTR的長度分別是27 bp和253 bp，其中，3′-UTR具有一個poly(A)加尾信號序列(AATAAA)。生物信息學分析顯示，CsGPT的轉運肽由78個氨基酸組成，具有8個跨膜區。序列分析顯示，CsGPT與擬南芥的GPT2、可可的GPT2和蓖麻的GPT2的一致性分別為80%、80%和73%。熒光定量PCR結果顯示，CsGPT在葉片中的表達受假眼小綠葉蟬取食和茉莉酸的誘導。

茶樹；葡萄糖-6-磷酸/磷酸轉運體基因；基因表達

Cs-Ev17 is a cDNA fragment of a tea glucose-6-phosphate/phosphate translocator gene, which was up-regulated by mild infestation of green leafhopper (EmpoascavitisG?the). Its full-length cDNA was cloned using the strategy of RACE method. This cDNA was designated asCsGPT(GenBank accession number: FJ648829), which was 1 514 bp in length with a 27 bp 5′-UTR and a 253 bp 3′-UTR, containing an open reading frame of 401 amino acids. The 3′-UTR contains polyadenylation signal sequence (AATAAA). By bioinformatics analysis, CsGPT protein processed a transit peptide of 78 amino acid residues, and contained 8 transmembrane domains. Sequence alignment exhibited that the CsGPT protein had homology to other GPTs fromArabidopsisthaliana,TheobromacacaoandRicinuscommunisL. showing 80%, 80% and 73% in amino acid identity, respectively. By qRT-PCR, the expression ofCsGPTin leaves was induced by infestation of green leafhopper and jasmonic acid.

質體是植物細胞生物化學活動中心之一，為一種具有雙層被膜的細胞器。質體與胞質代謝活動的整合是通過一組轉運蛋白實現的，它們控制著代謝物的跨膜運輸。質體的外膜具有β-桶狀跨膜蛋白形成選擇性的膜孔，而內膜對物質的通透有很強的選擇性，是質體與胞質之間的功能屏障。物質通過內膜的運輸由一組α-螺旋膜蛋白轉運體催化，它們有高度的底物專一性。位于質體內膜上的質體磷酸轉運體(plastidic phosphate translocator,pTP)催化無機磷酸與磷酸丙糖、磷酸戊糖和磷酸己糖的反向交換運輸，在溝通質體和胞質碳代謝中發揮關鍵作用。

目前發現的質體磷酸轉運體有磷酸丙糖/磷酸轉運體(triose phosphate/phosphate translocator,TPT)、葡萄糖……