人三陰性乳腺癌細胞耐藥株的建立及特性研究*

吳月琴，鐘山亮，張曉慧，唐金海，趙建華△

(1．南京醫科大學研究生學院，南京 211166；2.南京醫科大學附屬江蘇省腫瘤醫院臨床檢驗中心，南京 210009；3.江蘇省腫瘤醫院普外科，南京 210009)

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·論著·

人三陰性乳腺癌細胞耐藥株的建立及特性研究*

吳月琴1，鐘山亮2，張曉慧2，唐金海3，趙建華2△

(1．南京醫科大學研究生學院，南京 211166；2.南京醫科大學附屬江蘇省腫瘤醫院臨床檢驗中心，南京 210009；3.江蘇省腫瘤醫院普外科，南京 210009)

目的建立人三陰性乳腺癌細胞株MDA-MB-231的多西紫杉醇(Doc)耐藥模型(MDA-MB-231/Doc)和表阿霉素(Epi)耐藥模型(MDA-MB-231/Epi)，探討其生物學特性。方法采用Doc和EPi低濃度逐步加量誘導法歷時12個月分別建立MDA-MB-231/Doc和MDA-MB-231/Epi耐藥細胞株。通過細胞形態學觀察、MTT法和流式細胞術分析、比較其生物學特性，實時熒光定量PCR檢測多藥耐藥基因(MDR1)mRNA表達，Western Blot法檢測P糖蛋白(P-gp)、雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)和人表皮生長因子受體2(Her-2)的表達狀況。結果所構建的MDA-MB-231/Doc和MDA-MB-231/Epi耐藥株可分別在12 nmol/L Doc和800 nmol/L Epi中穩定生長，在相同的藥物濃度下，耐藥細胞株的生長增殖率明顯高于親代細胞，其耐藥指數分別為親代敏感細胞的8.32倍和64.93倍，且相互呈交叉耐藥狀態。與親代細胞相比，兩株耐藥細胞處于G1期和G2期的細胞增加、處于S期的細胞減少，隨撤藥時間的延長，細胞的增殖速度加快。兩株耐藥株的MDR1基因表達水平增高，分別為親代細胞的4.05倍和5.96倍，P-gp表達為陽性。與MCF-7細胞株相比，MDA-MB-231細胞株ER、PR、HER2表達陰性，是典型的三陰性乳腺癌細胞株。結論成功建立MDA-MB-231/Doc和MDA-MB-231/Epi的耐藥細胞株，其生長及耐藥性穩定。

乳腺癌細胞；多西紫杉醇；……