基于SPR技術高通量呼吸道病毒檢測方法研究*

孫秋香，王小華，顧大勇

(1.廣東省東莞市鳳崗鎮社區衛生服務中心　523000；2.重慶市公安局渝中區分局物證鑒定所，重慶 400013；3.廣東省深圳市檢驗檢疫科學研究院　518045)

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·論著·

基于SPR技術高通量呼吸道病毒檢測方法研究*

孫秋香1，王小華2，顧大勇3△

(1.廣東省東莞市鳳崗鎮社區衛生服務中心523000；2.重慶市公安局渝中區分局物證鑒定所，重慶 400013；3.廣東省深圳市檢驗檢疫科學研究院518045)

目的結合表面等離子共振(SPR)和基因芯片技術優勢，針對9種常見呼吸道病毒[包括A型、B型流感病毒(Influ A,B)，甲型H1N1，呼吸道融合病毒(RSV)，副流感病毒1～3型(PIV1、2、3)，腺病毒(ADV)以及引發嚴重急性呼吸綜合征的冠狀病毒(SARS)]，構建特異性強、通量高的生物傳感器方法。方法首先利用軟件premier 5等在保守序列上設計相關病毒的特異性引物及探針；將所設計的9種相應呼吸道病毒的探針固定于化學修飾后的SPR芯片的特定區域，利用SPR技術實時監測探針與PCR產物的雜交過程，最后通過生物素與鏈霉親和素系統實現信號的放大。結果設計的基因芯片可以高通量地檢測9種呼吸道病毒，具有很好的檢測特異性；芯片表面通過一定的再生條件后可以重復利用，避免芯片批間差對結果的影響；檢測靈敏度都達到納摩爾級。結論初步研究結果表明，利用SPR傳感技術建立高通量檢測呼吸道病毒的檢測方法具有一定的實用性和可行性，有望成為快速、大規模、高通量篩查呼吸道病毒感染的手段，具有較好的應用前景。

表面等離子共振；呼吸道病毒；高通量；……