5例急性巨核細胞白血病患者免疫表型結果分析*

曹　越,蔡元菊,楊江勇,劉春永,李佰靈,楊文娜

(韶關學院醫學院醫學技術系,廣東韶關 512026)

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·論著·

5例急性巨核細胞白血病患者免疫表型結果分析*

曹越,蔡元菊,楊江勇,劉春永,李佰靈,楊文娜

(韶關學院醫學院醫學技術系,廣東韶關 512026)

目的通過對急性巨核細胞白血病患者白血病細胞免疫表型進行檢測來分析各種血細胞表面分化抗原(CD)在急性巨核細胞白血病診斷及鑒別診斷當中的作用。方法應用BD公司流式細胞儀及其配套檢測試劑盒檢測5例急性巨核細胞白血病患者血細胞CD。結果所有患者均表達CD41和CD42，陽性率100%；淋系抗原均為陰性；CD13陽性者有4例，陽性率80%；CD33陽性者3例，陽性率60%；表達CD14和CD15者各1例，陽性率各占20%。結論檢測結果顯示CD41和CD42在急性巨核細胞白血病診斷及鑒別診斷中具有重要的價值，同時也再次驗證了急性巨核細胞白血病患者血細胞存在有“系列非專一性”的特點。

急性巨核細胞白血?。患毎砻娣只乖?；免疫表型

急性巨核細胞白血病(AMKL) 首先由Von Boros 于1931年提出，該病具有發病率低、病程短等特點，各年齡組男、女均可患病，尤以兒童多見且病情兇險[1-4]。臨床常以貧血、發熱起病，和其他急性白血病類型相似，但也有所不同，如肝、脾淋巴結多不腫大。AMKL屬于FAB分型中的M7，按增生巨核系細胞分化、成熟程度不同又可將AMKL分為未分化型和部分分化型，后者因除有較多的原始巨核細胞外，還有幼稚巨核細胞或成熟巨核細胞的異常增生，所以此型在光學顯微鏡下較易辨認，而未分化型主要以原始巨核細胞為主在光學顯微鏡下不易辨認[5-9]。通過利用單克隆抗體對其免疫表型進行分析成為診斷巨核細胞白血病的重要手段之一。另外，由于該病在臨床上比較少見，實驗室對其研究也比較少，但有些研究發現AMKL從表型上看屬于“系列非專一性”，既然可以表達髓系相關抗原也可以表達淋系相關抗原，但又有些研究否認了以上結論。本課題主要通過AMKL患者白血病細胞免疫表型的分析來探討各種表面分化抗原(CD)在診斷該病中的地位和作用，從而為臨床診斷提供可靠的依據，同時也對現有的研究結論進行驗證，以此來推動醫學界對該病的研究進程。

1　資料與方法

1.1病例資料病例1：男，19歲，因近期稍有運動便會覺過度疲乏、流汗而就診，無其他特殊癥狀。病例2：男，35歲，乏力、面色蒼白，發熱、咽部紅腫，雙頜下淋巴結輕度腫大，前期服用過抗生素，治療無效而就診。病例3：女，47歲，面色蒼白，乏力，體表有散在出血點，有胸骨壓痛。病例4：男，70歲，乏力，牙齦出血，偶有黑便，下肢有散在出血點。病例5：女，50歲，面色蒼白，乏力，腰痛，曾疑腎臟疾病就診，曾經從事了近12年的家具噴漆工作。

1.2儀器與試劑應用BD公司流式細胞儀及配套檢測試劑盒檢測血細胞CD。

1.3方法在25 μL骨髓液中加入5 μL抗體，室溫孵育30 min，加入溶血素1 mL，避光10 min，1 500 r/min離心5 min，棄去上清液，加入鞘液1 mL，混勻，1 500 r/min洗滌3次，棄上清液，加入0.5 mL鞘液，上機檢測，結果以雙參數散點圖表示，髓系陽性率大于20%定為陽性，淋系陽性率大于30%定為陽性。所用的抗體種類有單抗巨核系CD41、CD42；髓系CD13、CD14、CD15、CD33；T細胞CD4、CD7；B細胞系CD10、CD19、CD20。

1.4診斷依據所有病例均根據張之南[10]編寫的《血液病診斷及療效標準》的標準進行診斷。

2　結　果

所有患者均為CD41陽性和CD42陽性；CD4、CD7、CD10、CD19及CD20淋系抗原均為陰性；CD13陽性者有4例(80%)；CD14和CD15陽性者各有1例(25%)；CD33陽性者3例(60%)。結果見表1。

表1　AMKL患者免疫表型檢測結果(%)

3　討　論

AMKL細胞缺乏較特異的形態學改變，未分化型AMKL這方面的特點更為突出，所以目前臨床上對于AMKL的診斷和鑒別診斷主要實驗室檢測方法有細胞化學染色、流式細胞儀血細胞CD檢測及血小板過氧化物酶反應，但細胞化學反應特異性差，血小板過氧化物酶反應檢測技術復雜且所用設備昂貴，以上原因使得流式細胞儀血細胞CD檢測成為AMKL診斷的重要依據。本文主要是通過對5例AMKL患者免疫表型檢測結果的分析來探討各種CD在診斷及鑒別診斷AMKL過程當中的價值。

本課題研究結果顯示所有病例均為CD41陽性和CD42陽性，進一步驗證了CD41和CD42在AMKL的診斷及鑒別診斷當中具有重要的地位和作用，并且這一結論與許多實驗室的研究結論相符[11-12]。CD13和CD33在所測病例中陽性率分別為80%和60%，說明以上兩種CD在AMKL時有較高的表達，但由于本研究所測病例較少，對兩者在AMKL診斷及鑒別診斷當中的價值無法作出更為準確的評估。

多數研究證明，AMKL具有“系列非專一性”的特點[13-15]，且國外有研究報道急性髓細胞白血病細胞有時既可以表達髓系相關免疫標志也可以同時表達淋系相關免疫標志，如果某白血病患者兩系免疫標志均表達其預后較差[16]。本研究所測5 例AMKL患者免疫表型中無一例表達淋系相關免疫標志，但幾乎均有髓系相關免疫標志的表達，且從檢測結果看這種表達不應該屬于雜合型AMKL[1]，而應該是同一細胞表達了多種分化抗原，這一研究結果也再次驗證了以往研究結論，AMKL患者血細胞具有“系列非專一性”的表型特點[17]。

AMKL臨床表現及形態學改變均復雜多變，且預后差，誤診率高，所以為了降低誤診率，讓醫生能夠抓住最佳治療時機，對于AMKL的研究目前仍在不斷的探索當中，例如已有研究就該病的預后、罕見并發癥、治療方案及免疫表型等進行了更加深入的調查研究分析[18-23]，但均由于標本量很少使得相關研究的進展速度很慢，我們只能夠通過少量標本對該病的某一方面進行評估，但這種評估的可靠性很低，只能說明某種現象的存在性卻不能說明其存在的普遍性。

綜上所述，實驗室免疫表型的檢測在AMKL的診斷當中充當著重要的角色，不但是該病診斷及鑒別診斷的重要依據，同時也在該病的起源及分型研究中起到重要的作用。

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Analysis of immunophenotype results in 5 patients with acute megakaryoblastic leukemia*

CAO Yue，CAI Yuanju,YANG Jiangyong，LIU Chunyong，LI Bailing，YANG Wenna

(DepartmentofMedicalTechnology,MedicalCollegeofShaoguanUniversity,Shaoguan,Guangdong512026,China)

ObjectiveTo analyze the role of various blood cell surface differentiation antigens(CD) in the diagnosis and differential diagnosis of acute megakaryoblastic leukemia by detecting the immunophenotype in 5 patients with acute megakaryoblastic leukemia.MethodsThe flow cytometry produced by the BD company and its matching reagents kits were used to detect CD in 5 patients with acute megakaryoblastic leukemia.ResultsAll patients expressed CD41 and CD42 with the positive rate of 100%;the lymphoid antigens ware negative in all cases;CD13 was positive in 4 cases with the positive rate of 80%;CD33 was positive in 3 cases with the positive rate of 60%;CD14 and CD15 were expressed in each 1 case,the positive rate was 20%.ConclusionThe test results show that the CD41 and CD42 have an important value in the diagnosis and differential diagnosis of acute megakaryoblastic leukemia.At the same time,the characteristic of "series non-specificity" in the blood cells of the patients with acute megakaryoblastic leukemia is verified again.

acute megakaryoblastic leukemia;cell surface differentiation antigens;immunophenotype

2016-01-05修回日期：2016-04-26)

廣東省韶關市科技計劃項目(2014CX/K331)；2014年度廣東省韶關市醫學科研基金立項課題(Y14083)；韶關學院醫學院2013年度科技計劃項目(E201308)。

曹越，女，講師，主要從事臨床檢驗及血液學檢驗教學。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.15.009

A

1673-4130(2016)15-2074-02