血小板假性減少的原因分析及處理

李文利,皮　蕾,張白杜,鮑麗娟

(廣州市婦女兒童醫療中心　510623)

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血小板假性減少的原因分析及處理

李文利,皮蕾,張白杜,鮑麗娟

(廣州市婦女兒童醫療中心510623)

目的探討血小板假性減少的原因及糾正措施。方法對血細胞分析儀檢測的30例血小板假性減少標本進行血凃片復檢、手工計數血小板。結果12例EDTA依賴患者、8例存在大血小板的患者、10例采血不順患者儀器阻抗法血小板計數結果與手工計數血小板結果比較差異有統計學意義(P<0.05)。結論EDTA依賴引起血小板聚集導致血小板假性減少，電阻抗法計數大血小板有一定的誤差也會導致血小板假性減少，采用手工計數血小板復檢假性血小板減少標本可保證結果的準確性。

血小板減少；血球分析儀；影響因素

隨著全自動血球分析儀的普及，提高了血細胞分析的速度，血細胞計數結果的準確性和精密度也得到了提高。最為廣泛的抗凝劑是被國際血液學標準化委員會(ICSH)認定的乙二胺四乙酸(EDTA)鹽。然而，由于血小板易聚集、黏附、破壞等特點及血球儀自身原理的限制，測定血小板常會出現假性減少現象，即EDTA依賴性假性血小板減少癥(EDTA-PTCP),近幾年的報道也日趨增多[1-3]。血小板檢測是臨床最為常用的檢測項目之一，EDTA依賴引起的假性血小板減少若不及時發現和糾正對醫生的診斷和患者治療都帶來重要影響?，F對30例血小板假性減少結果及影響因素報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料選擇本院2014年10月至2015年10月發現的假性血小板減少患者30例。

1.2儀器與試劑日本Sysmex XE-5000全自動血細胞分析儀，Olympus顯微鏡。Sysmex XE-5000全自動血細胞分析儀原裝配套試劑和質控，草酸銨血小板稀釋液，配方參照《全國臨床檢驗操作規程(第3版)》[4]，吉姆薩-瑞氏染液(Baso公司)，陽普公司EDTA-K2真空采血管。

1.3方法對假性血小板減少患者采靜脈血標本2 mL，用EDTA-K2真空抗凝管采集。上機前，首先觀察標本性狀，檢查標本有無凝固、抗凝劑比例是否合適，以排除不合格標本造成的影響，然后上機檢測，對血小板低于100×109/L且直方圖異常或儀器報警提示有血小板聚集的標本，推片染色鏡檢，顯微鏡下觀察血小板分布情況、有無大量血小板聚集、有無大血小板等，并采患者末梢血進行人工血小板計數，操作規程按草酸銨稀釋液法進行。將儀器法和人工計數法兩種方法測定的血小板計數結果進行統計學數據處理。

2　結　果

儀器檢測結果、人工計數結果比較見表1 。從表1可以看出，儀器阻抗法假性血小板減少血小板計數結果與人工計數血小板結果比較差異有統計學意義(P<0.05)。

表1　儀器法和人工法檢測結果比較

3　討　論

血細胞分析儀檢測血小板減少大致分兩種情況：(1)是血小板真性減少，即患者由于自身疾病導致的血小板減少，如特發性血小板減少性紫癜(ITP)、白血病、肝腎疾病、藥物反應等。(2)是患者血小板正常而結果顯示減少的假性減少，如血小板聚集(EDTA抗凝劑依賴)、大血小板的存在、采血不順等，這種情況儀器會發出報警，如：血小板聚集，或直方圖、散點圖顯示異常，這時就需要人工辨別減少的真偽。

3.1EDTA抗凝劑的影響早在1969年Gowland等首次報道了EDTA依賴性血小板減少癥(EDTA-PTCP)，引起了國內外的廣泛關注，但造成血小板聚集的具體機制仍不是很清楚。目前一般認為是血小板抗體與血小板表面抗原反應所致[5-7]，可能是EDTA的存在修飾了血小板膜表面某種隱蔽的抗原結構，與血漿中的自身抗體結構結合，激活卵磷脂酶A、磷脂酶C等活性物質，這些活性物質又能活化血小板纖維蛋白受體，促使血小板與纖維蛋白原聚集而出現凝聚。另外，EDTA能夠增加血小板表面電荷防止血小板凝聚，而血小板抗體可能減少了血小板表面電荷而削弱了EDTA的功效，血小板抗體是因何所致尚不清楚。EDTA依賴性血小板減少在患者和健康體檢者中都有發生，其中2例是一對母子，母親產檢期間發現是EDTA依賴性血小板減少，產后新生兒同樣是EDTA依賴性血小板減少，這與文獻報道的可能有遺傳性相符。

3.2大血小板的影響全血細胞分析儀電阻抗法計數血小板的閾值通常在2～24 fL，是根據顆粒體積大小通過檢測小孔產生的脈沖來區別和計數，通常血小板體積在2～20 fL，而許多病理情況下血小板的體積大小有很大差異，甚至達到30 fL以上，如腫瘤、急性心肌梗死、妊娠等大血小板會增多，儀器會錯計為小紅細胞[5]而導致血小板假性減少。Sysmex XE-5000全自動血細胞分析儀用阻抗法測定血小板異常時，可轉至網織紅細胞/血細胞計數通道用核酸熒光染色法進行測定[8]。由于血小板含有RNA，能被熒光染色，成熟的紅細胞沒有RNA不被染色，因此，根據熒光強度可以把血小板和小紅細胞及其他雜質分開，這樣既可以消除小紅細胞及碎片的影響，又可以避免遺漏大血小板而造成的假性結果。但核酸熒光染色法目前還沒有完全普及，對于沒有核酸熒光染色法的儀器，簡單的方法還是人工計數和推片鏡檢。

3.3其他影響靜脈穿刺不順或未及時混勻會使血液產生凝塊，若凝塊細小肉眼不易發現就會造成血小板假性減少[9]。常見于新生兒、兒童、肥胖者、長期輸液的重癥患者等。對于此類標本，可與臨床溝通重新抽血或采末梢血均可。另外，標本放置時間過長、血小板冷凝集、低溫均可導致血小板假性減少[10]。

綜上所述，在日常工作中遇到血小板減少的標本，一定要提高警惕，結合臨床診斷、標本狀況、儀器警號提示等綜合分析。對于血小板假性減少的患者及時進行人工復檢保證結果的準確性，以免誤診、誤治造成醫療糾紛甚至醫療事故的發生。

[1]張茹，張濤．如何減少乙二胺四乙酸抗凝劑依賴性假性血小板減低[J]．臨床誤診誤治，2010，23(2)：134-135．

[2]張文艷．包廣杰．EDTA-K2抗凝致血小板減少6例原因分析[J]．鄭州大學學報：醫學版．2011，46(2)：296-297．

[3]常玉芝．EDTA依賴血小板減少結果分析和糾措施[J]．國際檢驗醫學雜志，2011．32(14)：1631-1632．

[4]葉應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規程[M].3版.南京：東南大學出版社，2006:136-137.

[5]周小棉，鄒曉．假性血小板減少癥研究進展[J]．中華檢驗醫學雜志，2007，30(9)：1065-1067．

[6]Bragagni G,Bianconcini G,Brogna R,et al.Pseudothrombocytopenia:clinical comment on 37 cases[J].Minerva Med,2001,92(1):13-17.

[7]Norberg B,Nilsson TK.Platelet clumping in Ph-negative myeloproliferative syndromes[J].Acta Med Scand,1987,222(5):459-464.

[8]柳光芬．兩種血液分析儀血小板測定結果比較[J]．重慶醫學，2009，38(16)：2059-2060．

[9]李永紅，鐘步云．血細胞分析儀測血小板結果偏低的原因及糾正方法[J]．臨床檢驗雜志，2001，19(2)：112．

[10]呂國全，顧耀松，羅燕玲，等．影響血細胞分析儀檢測血小板的特點分析[J]．中國醫療設備，2009，24(8)：118-119．

2016-01-22修回日期：2016-05-18)

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.15.062

B

1673-4130(2016)15-2194-02