云南西部地區居民區小型獸類攜帶病原體檢測

杜春紅，尹家祥，左曙青，栗冬梅，王秀芳，程曉藕，劉正祥，楊光璨

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云南西部地區居民區小型獸類攜帶病原體檢測

杜春紅1，尹家祥2，左曙青3，栗冬梅4，王秀芳2，程曉藕2，劉正祥1，楊光璨1

目的了解云南西部地區居民區小型獸類攜帶病原體情況，為自然疫源性疾病的防治提供科學依據。方法在滇西地區8個州(市)中抽取的10個縣(市、區)40個自然村中，隨機抽取800戶家庭(每村20戶)，進行室內捕鼠，采集鼠脾臟標本并提取基因組DNA，鼠肺標本提取RNA，運用聚合酶鏈反應(PCR)或免疫學方法，檢測鼠疫、巴爾通體、伯氏疏螺旋體、巴貝西原蟲、人粒細胞無形體、埃立克體、漢坦病毒等病原體。結果捕獲9種421只小型獸類，采集臟器樣本404份，血清樣本325份。檢出鼠疫F1抗體兩種方法共同陽性血清1份；擴增到巴爾通體枸櫞酸合酶(gltA)基因64份，陽性率為15.84%，基因分析表明屬6種基因型；檢出伯氏疏螺旋體5S～23SrRNA間隔區基因5份，陽性率為1.24%，系統發育樹顯示均為Borreliaafzelii型；檢出1例復合感染。其余病原體檢測均為陰性。結論滇西地區室內小型獸類感染病原體種類多，分布廣，對人類健康有一定的危害，需加強監測并采取預防控制措施。

滇西地區；居民區；小型獸類；病原體

serum specimen was positive for plague F1 antibody. Sixty-fourgltAgene ofBartonellawas amplified by PCR and the positive rate was 15.84% (64/404). Gene analysis showed that 6 gene types forBartonellainfection were found. The 5S-23SrRNAgene ofBorreliaburgdorferiwas amplified by PCR and the positive rate was 1.24% (5/404). Phylogenetic tree showed that they wereBorreliaafzeliigene type. One small mammal tended to complex infection. Others were negative. In households of Western Yunnan Province, different types of pathogen infections exist in small mammals and there are potential hazard for human. Diseases surveillance should be strengthened and measures of control and prevention need to be implemented.

Supported by grants from the National Natural Science Foundation of China (Nos. 81060229, 81360413, 81460485), the Scientific Research Foundation for the Returned Overseas Chinese Scholars, State Education Ministry (No. 〔2011〕1568), the Yunnan Provincial Training Special Funds for High-level Health Technical Personnel (No. D-201249), the Yunnan Provincial Training of Youth Leader in Academic and Technical Reserve Talents (Nos. 2013HB080, 2014HB093), and the Dali University Doctoral Scientific Research Foundation (No. KYBS201302)

小型獸類為小型哺乳動物的統稱，泛指嚙齒目(Rodentia)、食蟲目(Insectivora)、攀鼩目(Scandentia)、兔形目(Lagomorpha)、翼手目(Chiroptera)以及食肉目(Carnivora)中的部分小型動物。由于它們種類繁多、分布廣泛、遷移性小、適應性強，構成了生態系統的重要組成部分。部分種類對人們的日常生活、農田水利、林業、牧業等造成危害，有些小獸(尤其是嚙齒動物)及其體表寄生蟲還與人類疾病相關，在病原體的長期保存、疾病傳播和流行中具有重要意義[1-2]。云南省地處中國西南邊陲，動植物資源異常豐富，尤其是滇西地區地理環境和氣候條件復雜多樣，從而孕育了自然疫源性疾病宿主動物和媒介生物多樣性的特征。既往疫情發生和調查結果顯示，該區域是云南省多種自然疫源性疾病如鼠疫、腎綜合征出血熱、鉤端螺旋體病、巴爾通體等的高發地區[3-5]。而農村居民區多與耕地、林地接壤或交匯，室內常有小型獸類分布，并與人類密切接觸，其攜帶病原體易于傳播給人類。因此有必要了解該區域小型獸類病原體攜帶狀況，為疾病預防控制提供科學依據。

本研究對滇西10縣、市20個自然村居民區室內小型獸類感染鼠疫、巴爾通體、伯氏疏螺旋體、巴貝西原蟲、人粒細胞無形體、埃立克體、漢坦病毒等病原體的情況進行調查研究。

1　材料和方法

1.1標本采集在滇西地區的8個州(市)抽取德欽、玉龍、蘭坪、永仁、祥云、南華、耿馬、云縣、芒市、隆陽區10個縣(市、區)，每個縣(市、區)選擇4個自然村，對每個自然村的全部住戶進行編號，根據編號隨機抽取20戶家庭，共計800個家庭進行調查。詳細抽樣信息見表1，采樣區分布見圖1。以籠夜法進行捕鼠，每戶放置5個鼠籠，連續放3夜，每天檢查。如有捕獲則更換新籠繼續放置。捕獲的動物帶回實驗室進行種類鑒定，股靜脈采集血液分離血清，無菌條件解剖取臟器組織材料。

圖1　調查采樣區分布Fig.1　Distribution of sampling area

1.2試劑與設備

1.2.1鼠疫免疫學檢測分別采用3種方法檢測鼠疫菌F1抗體和F1抗原。雙抗原和雙抗體夾心ELISA診斷試劑盒(ELISA法)由蘭州生物制品研究所有限責任公司提供，試劑盒批號20120101、20111202；間接血球凝集試驗試劑盒(IHA、RIHA法)由吉林博德醫學免疫制品有限公司生產，試劑盒批號20130101、20130101；膠體金免疫層析(GICA法)試紙條由云南省地方病防治所自制，批號：201301、201201。

1.2.2分子生物學檢測血液組織DNA提取試劑盒(Qiagen DNeasy Blood & Tissue Kit)，組織RNA提取試劑(Trizol. Ambion)，2×Taq MasterMix(TakaRa)，100 bp ladder Marker(Biomed)，引物由北京天一輝遠生物技術有限公司、生工生物工程(上海)股份有限公司合成。

1.2.3儀器設備高通量組織研磨儀(德國Retsch，MM400型)、水平電泳槽 JY-SPFT型、PCR儀(德國SENSO，LabCycler Gradient Fuses型)，凝膠成像分析儀(美國Syngene，G:Box)。酶標檢測儀Anthos 2010型，自動洗板機BIO-RAD 1575型。

表1樣本抽取資料

Tab.1Sample selection data

州(市)Prefecture(City)縣(市、區)County(City)鄉(鎮)Township(Town)自然村Village家庭(戶)Family(Household)大理州祥云縣普淜鎮必乍村、董家村80下莊鎮老張五村、小劉營迪慶州德欽縣佛山鄉江坡村、溜筒江村80云嶺鄉斯農布村、西當村麗江市玉龍縣太安鎮吉子村、汝南村80黃山鎮金龍村、鹿子村楚雄州永仁縣維的鄉恩舊村、桃苴大村80永定鎮拉務么村、太平地大村南華縣沙橋鎮新建村、朱家屯村80雨露鄉果樂村、金家村保山市隆陽區辛街鄉北村三組、柳樹壩村80板橋鎮馬家二組、趙家灣村德宏州芒 市芒市鎮芒晃村、偏窩村80遮放鎮街道三社、非海二社臨滄市云 縣漫灣鎮昔宜組、大溫竹村80曉街鄉老普組、新寨村耿馬縣賀派鄉芒嘎弄組、芒廣組80勐撒鎮半坡村、上細卡組怒江州蘭坪縣河西鄉大羊村、共興村80通甸鎮羅古箐村、清甸灣村Total102040800

1.3方法

1.3.1鼠疫免疫學檢測采用3種方法分別對血清作鼠疫F1抗體、臟器懸液上清作F1抗原檢測，試驗方法嚴格按試劑盒說明書操作，標本處理參照《鼠疫防控應急手冊》[6]。ELISA初篩陽性者作驗證試驗，即用含F1抗原或抗體的稀釋液與用樣本稀釋液同時對平行檢測樣本，前者為驗證列，后者為滴度列。當驗證列陽性反應孔數比滴度列低2孔或2孔以上為驗證試驗陽性。被檢測孔A450(S)/陰性對照孔A450比值的平均值(N)≥2.1時(陰性孔A450值<0.1者，以0.1計)的最高稀釋度作為滴度終點。GICA檢測以質控線和檢測線均出現紫紅色帶判定為陽性。IHA和RIHA采用V板法，初篩陽性者作抑制試驗，當血凝抑制列呈陽性“++”凝集的孔比血凝試驗列少2孔及以上時，可判定為特異性凝集；以出現反應強度“++”的最高稀釋度作為滴度終點。同一份樣品均用3種方法作平行檢測。

1.3.2分子生物學檢測取10 mg脾臟組織研磨后，按照試劑盒說明書逐步提取DNA。肺臟組織研磨后，按照試劑盒說明書逐步提取RNA。RNA采用M-MLV酶(美國，Promega)和引物P14逆轉錄為cDNA，分別以DNA和cDNA為模板進行聚合酶聯反應(PCR)。檢測病原名稱、擴增引物及條件等見表2. PCR產物用帶有Goldviev的1.5%的瓊脂糖凝膠電泳后凝膠成像儀觀察結果。每次實驗均設立空白對照，為避免標本污染所造成的假陽性，DNA模板的提取、反應體系的配制、模板的添加、PCR的擴增均在不同的房間進行。

1.3.3序列測定與分析PCR產物送生工生物工程(上海)股份有限公司、北京擎科新業生物技術有限公司測序。登錄美國國家生物技術信息中心(NCBI)站點，利用“Blast Sequence Similarity Searching”工具將測序結果與GenBank中注冊基因序列進行同源性比對。采用Lasergene軟件包的MegAlign程序進行序列比對。應用MEGA6.06軟件，鄰接法Neighbor-Joining，Kimura 2-parameter model，bootstrap 1000構建系統發育樹。

表2病原體核酸檢測所用引物和擴增條件

Tab. 2Sequences of primers and conditions of PCR amplification for pathogen detection

目的病原體Targetpathogens擴增目的基因Targetgenesamplified引物名稱Primer核苷酸序列Nucleotidesequence(5'-3')擴增條件(退火溫度/時間,延伸溫度/時間)Amplificationconditions(Annealingtemperature/time,Extensiontem-perature/time)產物長度ProductLength(bp)伯氏疏螺旋體Borreliaburgdor-feri5S～23SrRNA間隔區基因Spacergene23S3CGACCTTCTTCGCCTTAAAGC55℃/30s,72℃/30s41223SaTAAGCTGACTAATACTAATTACCC23S6TCCTAGGCATTCACCATA59℃/30s,72℃/30s25223S5CTGCGAGTTCGCGGGAGA巴貝西原蟲Babesiosis18srRNAbvif1CAGGGAGGTAGTGACAAGAAATAACA53℃/30s,72℃/30s370bviprCAACCGTTCCTATTAACCATTAPrima-fCTTGTAATTGGAATGATGGTGACCTAA55℃/30s,72℃/30s150Prima-rCGATAACGCAGAAATTCAACTACGAG巴爾通體BartonellagltABhCS781.pGGGGACCAGCTCATGGTGG50℃/30s,72℃/1min379BhCS1137.nAATGCAAAAAGAACAGTAAACA新發立克次體(外引物)NewRickett-sia(Outerprimer)16SrRNAEh-out1TTGAGAGTTTGATCCTGGCTCAGAACG55℃/30s,72℃/1min653Eh-out2CACCTCTACACTAGGAATTCCGCTATC埃立克體(內引物)Ehrlichia(Innerprimer)HME1CAATTGCTTATAACCTTTTGGTTATAAAT55℃/30s,72℃/1min389HME2TATAGGTACCGTCATTATCTTCCCTATHGA1GTCGAACGGATTATTCTTATAGCTTG55℃/30s,72℃/1min389HGA2TATAGGTACCGTCATTATCTTCCCTAC人粒細胞無形體(內引物)HumanGranulocyticAnaplasmosis(In-nerprimer)傳統立克次體(外引物)TraditionalRickettsia(outerprimer)groELGro-1AAGAAGGAGTGATAAC45℃/40s,72℃/40s649Gro-2ACTTCAGTAGCACC斑點熱、斑疹傷寒(內引物)Spottedfever,Typhus(In-nerprimer)SF1GATAGAAGAAAAGCAATGATG56℃/35s,72℃/35S217SR2CAGCTATTTGAGATTTAATTTGTF1ATATATCACAGTACTTTGCAAC56℃/35s,72℃/35S364TR2GTTCCTAACTTAGATGTATCAT恙蟲病東方體(內引物)Orientiatsut-sugamushi(Innerprimer)漢坦病毒hantavirus逆轉錄引物Rt-pcrprimer外引物Outerprimer內引物InterprimerP14HTN-LF1HTN-LR1HTN-LF2HTN-LR2TAGTAGTAGACTCCATGTAYGTBAGTGCWGATGCAACCADTCWGTYCCRTCATCTGCWGATGCHACIAARTGGTCGCRTCRTCWGARTGRTGDGCAA55℃/30s,72℃/30S55℃/30s,72℃/30S450378

2　結　果

2.1小型獸類的組成與分布本次調查共捕獲小型獸類421只，分屬于2目2科6屬9種，采集有效臟器標本404份，其中黃胸鼠269份(66.58%)，小家鼠75份(18.56%)，褐家鼠23份(5.69%)，大足鼠23份(5.69%)，臭鼩鼱7份，齊氏姬鼠2份，短尾鼩2份，灰麝鼩2份，卡氏小鼠1份。見表3.因部分捕獲動物解剖前死亡，采集有效血清標本325份，其中黃胸鼠221份(68.0%)，小家鼠60份(18.46%)，褐家鼠18份(5.54%)，大足鼠19份(5.85%)，臭鼩鼱3份，齊氏姬鼠1份，灰麝鼩2份，卡氏小鼠1份。

表3臟器材料組成與分布情況

Tab. 3The composition and distribution of viscera materials

采樣點SamplingSites黃胸鼠Rattustanezumi褐家鼠Rattusnorvegicus小家鼠Musmusculus大足鼠Rattusnitidus臭鼩鼱Suncusmurinus齊氏姬鼠Apodemuschevrieri短尾鼩Anourosorexsquamipes灰麝鼩Crociduraattenuata卡氏小鼠Muscaroli合計Total德欽———16—————16玉龍162———————20蘭坪174—1—————22永仁42726————185祥云1715———————33南華36————————36隆陽區23—————22—27芒市94————————100云縣37————————39耿馬25————————26合計26923752372221404

2.2鼠疫免疫學檢測結果404份鼠臟器經研磨后，取上清進行鼠疫F1抗原檢測，3種方法檢測結果均為陰性。325份血清樣本采用3種方法檢測鼠疫F1抗體，結果為：IHA均為陰性，GICA陽性6份，陽性樣本來自芒市鎮(1)、永仁縣(3)、隆陽區(1)和南華縣(1)，宿主動物為小家鼠(3)、黃胸鼠(3)。ELISA陽性3份，均來自芒市鎮，宿主動物為黃胸鼠(2)、臭鼩鼱(1)。其中芒市鎮一份黃胸鼠血清樣本GICA和ELISA兩種方法同時陽性，抗體滴度為1∶320。

M:DNA相對分子質量標準；PC:陽性對照；NC：空白對照圖2　gltA基因片段的凝膠電泳圖Fig.2　Gel electrophoresis image of amplified gltA partial sequence

2.3巴爾通體枸櫞酸合酶(gltA)基因檢測結果共檢測出巴爾通體gltA基因陽性65份，見圖2。經測序分析，64份為巴爾通體序列，陽性率為15.84%，僅黃胸鼠和褐家鼠檢出陽性，黃胸鼠陽性率最高(62/269，23.05%)，褐家鼠僅檢出2份(8.70%，2/23)。經卡方檢驗分析，2種鼠的陽性率無顯著性差異(χ2=1.781，P=0.1821)。從地域上看，在緯度稍高的德欽、玉龍、蘭坪、永仁、祥云、南華等6個縣僅檢出3份陽性。檢出陽性最多的芒市，該地也是鼠密度最高、黃胸鼠密度最高的地區。基于gltA基因的262 bp序列進行系統發育分析，結果顯示滇西地區至少存在6種基因型的巴爾通體。絕大多數毒株與B.tribocorum同源關系最近(A)，主要分布在芒市、云縣、耿馬、隆陽區；11個毒株與B.queenslandensis擁有共同的進化祖先，可能屬于B.queenslandensis型(B)，主要分布在耿馬、芒市、云縣、玉龍；2株(260和278)與B.elizabethae同源關系最近(C)，2個毒株(331和304)與B.rochalimae擁有共同的進化祖先，屬于B.rochalimae型，另外還有2個可能的新型D、E。芒市毒株基因型較為復雜，6種均存在，以A群為主，2個可能的新型也分布于該地。詳見圖3。

圖3　基于巴爾通體基因gltA基因部分測序結果構建的進化樹Fig.3　Phylogenetic analysis based on partial gltA gene of Bartonella

2.4伯氏疏螺旋體5S～23SrRNA間隔區基因片段檢測結果404份脾臟提取DNA經巢式PCR擴增，5份樣品擴增到目的片段，陽性率為1.24%。PCR產物電泳結果見圖2。5份陽性樣本分別來自祥云(3)、云縣(1)、蘭坪(1)，檢出小獸有黃胸鼠(3)、褐家鼠(1)、臭鼩鼱(1)。其中2份陽性樣本成功測序，測序結果與GenBank中注冊的核苷酸序列進行比較，檢出的伯氏疏螺旋體構建的系統發育樹顯示均與Borreliaafzelii型同源性最高，但來自祥云的XiangYun29和來自蘭坪的LanPing420之間有一定差距(見圖4)。

M: DNA相對分子質量標準；PC:陽性對照；NC：空白對照圖4　5S～23S rRNA基因間隔區PCR擴增結果Fig.4　PCR amplification of the 5S-23S rRNA gene spacer region

2.5其他檢測結果對404份小獸脾臟提取的DNA樣本，采用巢式PCR方法分別擴增巴貝西原蟲18srRNA，立克次體采用屬特異及種特異分型引物擴增16srRNA和熱休克蛋白基因groEL，結果均未擴增到目的片段。對183份小獸肺臟標本提取的RNA，采用逆轉錄聚合酶鏈反應(ReverseT ranscr iptase Polymerase Chain Reaction, RT-PCR)檢測漢坦病毒核酸，結果均為陰性。

2.6復合感染情況上述多種病原的檢測，檢出1例伯氏疏螺旋體和巴爾通體復合感染，樣本來自祥云縣的一只褐家鼠。

3　討　論

云南省是自然疫源性疾病流行最為嚴重的省份之一，滇西地區由于特殊的地域特征和氣候條件，哺乳動物非常豐富。據調查統計，此區域已知小獸就達到5目11科58屬187種(亞種)[4]。而小獸是多種自然疫源性疾病的重要傳染源，也是病原體和媒介昆蟲的主要宿主。從而構成了該地區自然疫源性疾病種類多、疫情嚴重而復雜的形勢[3,5]：云南鼠疫歷史悠久，疫源地廣泛[7]，自1982年疫情復燃以來，鼠疫監測縣及人間病例數為全國之冠。腎綜合征出血熱近幾年發病縣(市)不斷增多，疫源地范圍不斷擴大[8-9]。巴爾通體呈高度流行態勢，并具有宿主多樣性及基因型別多樣性特征[10]。分子生物學、免疫學檢測證實存在人粒細胞無形體、埃立克體、巴貝西原蟲、伯氏疏螺旋體等病原體[11-16]。

圖5　5S～23S rRNA間隔區進化樹分析Fig.5　Phylogenetic analysis of the 5S-23S rRNA spacer regions

鼠疫是烈性傳染病，云南省存在家、野鼠鼠疫疫源地，宿主動物的監測是防治工作的重要內容。本調查對捕獲的小獸臟器和血清標本進行了鼠疫F1抗原和F1抗體檢測，結果F1抗原均陰性，檢出F1抗體陽性血清。其中1份來自芒市鎮的黃胸鼠血清GICA和ELISA兩種方法均陽性，抗體滴度達1∶320，IHA陰性。可能與前2種方法敏感性高有關[17]。該地是家鼠鼠疫疫源地，曾多次發生鼠間和人間鼠疫疫情，本次調查結果F1抗原檢測均陰性，表明暫無動物間疫情發生。但該地具備了動物間鼠疫流行前期的宿主動物、媒介存在的3項預兆指標[18]，加之主要宿主動物黃胸鼠抗體低滴度陽性血清的檢出，需引起高度重視。雖然近年我省鼠疫疫情處于相對靜息狀態，但近期多地宿主、媒介等調查指標表明[19]有再度暴發的可能性。巴爾通體(Bartonellaspecies)是一種可通過吸血節肢動物在脊椎動物間傳播的病原微生物，人類可能因與攜帶病原體的動物接觸而感染或致病，引起的疾病譜較為廣泛。本次調查從6縣市檢出64份陽性，陽性率為15.84%。黃胸鼠和褐家鼠檢出陽性，陽性率分別為23.05%(62/269)和8.70%(2/23)。陽性樣品經測序后作同源性比對，構建系統發育樹。結果發現他們變異度較大，至少可以分為6種基因型，除了B.tribocorum、B.elizabethae、B.queenslandensis、B.rochalimae外還有2個可能的新型。因此這些地區人群受巴爾通體感染的風險較高。萊姆病(Lyme disease, LD)是一種由伯氏疏螺旋體(Borreliaburgdorferi)感染、經攜帶病原體的蜱叮咬傳播的自然疫源性疾病。宿主動物較多，包括鼠、兔、鳥等野生脊椎動物及犬、馬、牛等家畜，鼠類是重要的宿主動物之一。本調查共從3個縣的3種小獸中檢出5份陽性樣本，其中兩份測序結果分析，均屬于b.afzelii基因型，但其變異度較大。該區域宿主動物感染的伯氏疏螺旋體、巴爾通體均存在基因多樣性的特點，這些基因型多與人類致病性有關，并檢出1例巴爾通體和伯氏疏螺旋體復合感染的褐家鼠。立克次體、巴貝西原蟲、漢坦病毒檢測均為陰性，可能與采樣點均在居民區、小獸種類偏少、幾乎不攜帶媒介昆蟲蜱有關。尤其是腎綜合征出血熱，褐家鼠是家鼠型出血熱的主要傳染源，既往調查祥云縣居民區褐家鼠、黃胸鼠陽性率達6.25%、10.00%，但本次未檢出陽性可能樣本采集后未放液氮，低溫保存時間過長RNA發生降解，今后需多加注意。

小型獸類尤其是嚙齒動物是多種自然疫源性疾病的宿主動物和媒介宿主，其分布廣泛，居民區活動的鼠類及其攜帶的病原體對人類健康帶來的危害更大。本研究檢測結果顯示滇西居民區小獸攜帶病原體種類多，并有兩種病原體復合感染的情況，部分地區鼠密度、蚤指數偏高，需引起重視。同時，滇西地區是重要的鼠疫疫源地，在鼠疫防治工作中，疾病監測和各級部門投入人力財力開展的鼠疫防治聯防工作，不僅能有效預防烈性傳染病鼠疫，對多種自然疫源性疾病的防治、減少鼠害造成的經濟損失同樣具有重要意義，值得進一步推廣應用。

(致謝：中國疾病預防控制中心傳染病預防控制所郝琴團隊給予萊姆病檢測指導，云南省地方病防治所鐘佑宏、石麗媛、蘇麗瓊等同志參與了部分現場資料收集工作，以及參與此項工作的10縣(市、區)疾病預防控制中心和鄉鎮衛生院的同志及配合調查的所有個人和家庭。)

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Pathogen infection of small mammals from households in Western Yunnan Province

DU Chun-hong1, YIN Jia-xiang2, ZUO Shu-qing3, LI Dong-mei4,WANG Xiu-fang2, CHENG Xiao-ou2, LIU Zheng-xiang1, YANG Guang-can1

(1.YunnanInstituteforEndemicDiseasesControlandPrevention,Dali671000,China;2.SchoolofPublicHealth,DaliUniversity,Dali671000,China;3.BeijingInstituteofMicrobiologyandEpidemiology,theStateKeyLaboratoryofPathogenandBiosecurity,Beijing100071,China;4.NationalInstituteforCommunicableDiseaseControlandPrevention,ChineseCenterforDiseaseControlandPrevention,Beijing102206,China)

The situation of pathogen infection for small mammals from households in Western Yunnan Province was investigated to provide scientific basis for natural focal diseases control and prevention. Small mammals were captured in 800 households of 40 natural villages, 10 counties, 8 prefectures, in Western of Yunnan Province. DNA or RNA of specimen from small mammals were extracted and detected plague,Bartonella,Borreliaburgdorferi, BABEI West protozoa,Anaplasmaphagocytophilum,Ehrlichia, and Hantavirus with renal syndrome using PCR or other methods. Results showed that a total of 421 small mammals, belongs to 9 species, was captured. Of 404 viscera specimens and 325 serum specimens were collected, one

Western Yunnan Province; household; small mammal; pathogen infection

Yin Jia-xiang，Email: chinayjx@hotmail.com

尹家祥，Email: chinayjx@hotmail.com

1.云南省地方病防治所/云南省自然疫源性疾病防控技術重點實驗室，大理671000；2.大理大學公共衛生學院，大理671000；3.軍事醫學科學院微生物流行病研究所，北京100071；4.中國疾病預防控制中心傳染病預防控制所，北京102206

R378

A

1002-2694(2016)07-0623-09

2016-04-21；

2016-06-21

DOI：10.3969/j.issn.1002-2694.2016.07.007

國家自然科學基金項目(No.81060229, 81360413, 81460485)；教育部留學回國人員科研啟動基金資助項目(教外司留〔2011〕1568號)；云南省高層次衛生技術人才培養專項(D-201249)；云南省中青年學術和技術帶頭人后備人才、技術創新人才培養項目(No.2013HB080，2014HB093)和大理學院博士科研啟動費項目(KYBS201302)