湘云鯽2號胚胎和仔魚溫度適應能力的研究

王國清呂傳生毛覺生羅凱坤

（1 蘇州市陽澄湖現代農業發展有限公司 2 常熟市昆承湖水產有限責任公司 3 蘇州市蘇云生物科技有限公司 4 湖南師范大學）

湘云鯽2號胚胎和仔魚溫度適應能力的研究

王國清1呂傳生2毛覺生3羅凱坤4

（1 蘇州市陽澄湖現代農業發展有限公司 2 常熟市昆承湖水產有限責任公司 3 蘇州市蘇云生物科技有限公司 4 湖南師范大學）

1 材料和方法

1.1 試驗材料

試驗材料用湘云鯽2號授精卵和仔魚分別采用人工授精和人工孵化獲得，湘云鯽2號仔魚體長為0.9～1.2mm。試驗于2012年4月20日在實驗室內進行。試驗用水是井水。控溫設備包括可調節恒溫培養箱（調節范圍-10℃～50℃，誤差±0.2℃）、加熱棒、控溫儀和解剖鏡。

1.2 試驗方法

試驗用受精卵放置于水族箱中孵化，密度控制在8,000粒/m3以內,連續充氣，光照微弱，溫度保持在產卵時的水溫（21℃），溫度誤差控制在±2.0℃。定期加換等溫度水，并及時剔除霉卵、死卵。

試驗用仔魚放置于水族箱中，密度控制在3,000尾/m3以內, 連續微充氣，光照保持均勻，溫度保持在產卵時的水溫（21℃），溫度誤差控制在±2.0℃。每天定時投飼和加換等溫度水，并及時剔除死苗、畸形苗。

1.2.1 胚胎的12h短期暴露致死溫度試驗

試驗采用將胚胎從基礎水溫直接移入預處理水溫中。試驗材料采用隨機抽取肌肉效應期后的胚胎10粒為一組，每個溫度梯度試驗組平行3組，基礎水溫（21℃）對照組1組。試驗經過12h后觀察并記錄試驗胚胎的存活情況，判定死亡以心跳停止為標準。

1.2.2 仔魚的12h短期暴露致死溫度試驗

試驗采用將仔魚從基礎水溫直接移入預處理水溫中。試驗材料采用隨機抽取仔魚10尾為一組，每個溫度梯度試驗組平行3組，基礎水溫（21℃）對照組1組。試驗經過12h后觀察并記錄試驗魚的存活情況，判定死亡以心跳停止以及體色發白不透明為標準。

1.2.3 仔魚的溫度馴化適應試驗

試驗采用將仔魚放置于基礎水溫（21℃）中，然后以12小時1℃的速率進行升/降溫（接近致死溫度時，速率減為每24h升/降溫1℃）。試驗材料采用隨機抽取仔魚10尾為1組，試驗組平行3組，基礎水溫（21℃）對照組1組。每個溫度梯度檢查和記錄一次試驗魚的存活情況，判定死亡的標準與短期暴露致死溫度試驗相同。試驗期間，每天定時投飼和加換等溫度水。

2 試驗結果與分析

2.1 湘云鯽2號胚胎短期暴露12h半致死高溫和低溫

試驗結果（見表1）表明：在實驗溫度范圍內，胚胎死亡率隨水溫突變幅度的增大而升高。依據胚胎短期暴露12h高溫試驗結果數據，采用直線內插法求得：基礎水溫21℃時，胚胎短期暴露12h的半致死高溫為32.7℃，半致死低溫為5.7℃。

表1 不同溫度短期暴露12h胚胎的死亡率

2.2 仔魚短期暴露12h半致死高溫和低溫

2.2.1 仔魚短期暴露12h半致死高溫

表2 不同高溫短期暴露12h仔魚的死亡率

表3 不同低溫短期暴露12h仔魚的死亡率

試驗結果（見表2）表明：在實驗溫度范圍內，仔魚死亡率隨水溫突變幅度的增大而升高?；A水溫21℃時，12h短期暴露高溫試驗29℃～30.5℃組仔魚死亡率為1.8%～18.3%，34℃以上組全部死亡（LT100）。在27℃～31.7℃溫度范圍內，短期暴露高溫與對應的仔魚死亡率的關系經計算機擬合得到指數方程：Y=1.083×10-6e0.5272x（R2=0.9756），式中X為短期暴露高溫（℃），Y為死亡率（%），基礎水溫為21℃時，仔魚短期暴露12h半致死高溫為31.6℃。

2.2.2 仔魚短期暴露12h半致死低溫

試驗結果（見表3）表明：在實驗溫度范圍內，仔魚死亡率隨水溫突降幅度的增大而升高。基礎水溫21℃時，12h短期暴露低溫試驗11.5℃組仔魚全部存活（LT0），2.5℃組全部死亡（LT100）。在10.0℃～2.0℃溫度范圍內，短期暴露低溫和對應的死亡率的關系經計算機擬合得到指數方程：Y=395.85×e-0.4556x（R2=0.9701），式中X為短期暴露高溫（℃），Y為死亡率（%），如圖2所示。由該方程求得：基礎水溫為21℃時，仔魚短期暴露12h半致死低溫為5.2℃。

2.3 仔魚高（低）溫馴化適應

試驗結果（見表4、表5）表明：仔魚在高溫馴化至26℃時開始出現死亡（死亡率為3.4%），但存活者活力與攝食仍正常；至29℃時累計死亡率為13.4%，存活者部分表現為活動力差或平衡性較差，且總體攝食強度也明顯下降；至31.5℃時累計死亡率為84.5%，增幅明顯變大；至34.0℃全部死亡。仔魚在低溫馴化至10℃時開始出現死亡（死亡率為3.1%），但存活者活力與攝食仍正常；至10℃時死亡率累計達18.5%，存活者活動力和攝食強度明顯下降；在7.5℃時累計死亡率達48.2%，存活者平衡性差，沉底不動；至5.0℃時全部死亡。

表4 仔魚在不同馴化高溫下的累計死亡

表5 仔魚在不同馴化低溫下的累計死亡

2.3.1 仔魚的極限半致死高溫

依據表4數據，仔魚高溫馴化至25℃仍全部存活，至34.0℃全部死亡。在25℃～33.5℃馴化高溫范圍內，馴化高溫與仔魚死亡率的關系經計算機擬合得到指數方程：Y=1.421×10-5e0.4818x（R2=0.9322），式中X為馴化高溫（℃），Y為死亡率（%），如圖2所示。由該方程求得：基礎水溫為21℃時，仔魚短期暴露12h半致死高溫為31.9℃。

2.3.2 仔魚的極限半致死低溫

依據表5數據，仔魚低溫馴化至13℃仍全部存活，至5.0℃全部死亡。在14℃～5.0℃馴化低溫范圍內，馴化低溫與仔魚死亡率的關系經計算機擬合得到指數方程：Y= Y=132.1321×e-0.2338x（R2=0.9643），式中X為馴化低溫（℃），Y為死亡率（%），如圖4所示。由該方程求得：基礎水溫為21℃時，仔魚短期暴露12h半致死低溫為7.7℃。

3 討論

3.1 胚胎和仔魚對溫度的適應能力

湘云鯽2號是四倍體鯉鯽魚和二倍體紅鯽魚通過倍間雜交繁育的三倍體水產新品種，具有雜交優勢。其胚胎和仔魚對水溫的適應能力強，經過馴化，其仔魚能適應的極限高溫和低溫分別是34.0℃和0.5℃。湘云鯽2號抗逆性強，在耐低溫方面尤其突出，而其它魚類的仔魚在水溫14.0℃時停止攝食，水溫在10.0℃時死亡。

3.2 仔魚高（低）溫馴化適應試驗中存在的問題

由于試驗條件和時間的限制，該試驗重復循環試驗的次數少，試驗結果需要進一步驗證與確認。

據報道國外常用馴化水生動物的適宜升溫速率為每24小時升溫1℃。在此速率下，魚類通過調節，可以逐步適應溫度的升高，不存在變溫帶來的“熱沖擊”影響。因此，試驗魚達到其適熱極限而死亡的現象，基本上能反應該魚類本身的生物學特性。相比較，本次仔魚高溫馴化試驗前期階段采用每12h1℃的升溫速率，可能存在馴化溫度變化過快，魚體內代謝調整跟不上，導致仔魚還暫不能適應外界環境溫度變化而出現死亡，也可能存在變溫帶來熱沖擊的影響，從而影響到試驗結果的準確性。由此也說明，仔魚對外界水溫的變化需要一個足夠長的適應過程和時間。另外，由于該試驗持續的時間較長（7d），且被試驗魚體質總體上偏弱，仔魚高溫馴化適應的試驗結果數據存在偏低的可能。試驗中還發現，當馴化至28℃～30℃高溫時部分被試驗魚的生存活力仍較強。由以上三點推測，基礎水溫21℃時，仔魚的極限致死高溫可能比34.0℃更高。

3.3 進一步研究的方向

由于魚群原來所處的適應水溫有高低，魚類對溫度的適應又有一定的幅度，因此，在不同的馴化溫度下，個體的半致死溫度值也不相同。為了獲得溫度基準值，還需進一步試驗研究在不同馴化溫度（即基準溫度）下的“短期暴露半致死溫度”和“起始致死溫度”，進而求得湘云鯽2號仔魚“短期暴露的安全受熱方程”、“溫度的安全區域”以及“最大起始致死溫度”。