一種用于觀察小鼠后足趾類實驗固定裝置的研制

石　佳，陳　靜，冉小庫，王曉彤，竇德強

(遼寧中醫藥大學藥學院，遼寧 大連　116600)

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一種用于觀察小鼠后足趾類實驗固定裝置的研制

石佳，陳靜，冉小庫，王曉彤，竇德強*

(遼寧中醫藥大學藥學院，遼寧 大連116600)

設計研制應用于觀察小鼠后足趾類實驗固定器，如發汗、止汗等實驗研究，為其提供安全、方便、便于操作的實驗工具。

小鼠；后足趾；固定器；制作；應用

小鼠是一種醫學研究常用的實驗動物，亦是醫學生理學、病理學、病理生理學等學科實驗的常用動物。小鼠體型較小，但生性活潑，因此在抓取小鼠時要謹慎，既不能粗暴，以免其受傷，又要穩和準，否則容易被其咬傷。在實驗研究中，我們常常運用一些輔助工具來固定小鼠，以保證實驗的正常進行同時能保護實驗者自身安全。固定器的制作及應用有一些研究報道，但一般多用于斷尾取血、尾靜脈注射、尾靜脈取血、肌肉注射、輻射實驗等實驗研究[1-6]，而適用于觀察后足趾類實驗的固定器尚未見報道。本文根據以往制作大、小鼠固定裝置的優缺點以及相關實驗要求，選用銅片、鋁塊、革布等材料，制成適用于后足趾類實驗的特制小鼠固定器。

1　材料

1.1實驗動物

SPF級雄性昆明小鼠購自遼寧長生生物技術有限公司 [SCXK(遼)2010-0001],體重(18～22)g。實驗動物飼養于遼寧中醫藥大學實驗動物中心[SYXK(遼)2013-0009]。并按實驗動物使用的3R原則給予人道的關懷。

1.2制作材料和工具

銅片(長10.0 cm、寬9.5 cm和厚0.1 cm)；鋁塊(長3.0 cm、寬2.5 cm和高1.0 cm)；鋁片(長10.0 cm、寬1.0 cm和厚0.1 cm)；鉚釘；細鐵絲；革布；剪刀；夾子(均購于大連開發區新瑪特超市)。

2　方法

2.1制作要求

發汗、止汗實驗是觀察小鼠汗液分泌的后足趾類實驗，常用方法是著色法。因小鼠的小汗腺僅分布于足底，也就是在小鼠足跖部肉墊上有汗腺分布，其汗液分泌的多少，可利用碘與淀粉遇汗液產生紫色反應的原理，觀察汗液分泌的變化。這需要觀察后足趾且需維持一段時間，因此對于固定器有一定要求。具體要求如下：其規格、構形，應依動物大小和形態而定，尺寸可調；防止動物轉身、逃逸，固定要嚴密；后足趾需暴露在外；固定器需四周透氣，避免固定時間過長導致小鼠大量出汗對實驗結果造成影響；堅固耐用，性能可靠。

2.2制作方法

步驟一：在長方形銅片上面，依據銅片大小打數排大小以0.3 cm為直徑的小圓孔。步驟二：取長8.5 cm、寬5.5 cm的革，用剪刀剪成如圖1所示，并剪兩孔。步驟三：用鉚釘將剪好的革布固定在銅片邊沿1.5 cm左右。步驟四：按設計圖2，在打好孔的長方形銅片中心處用鉚釘將其固定在鋁塊上面，再將其彎曲成圓柱狀。在圓柱中間，用鋁片將銅圓柱固定大小，再按上調節裝置(如圖3)，以調節固定裝置的大小。

圖1　革布制作比例圖Fig.1　The scale map of cloth production

圖2　固定器制作模型比例圖Fig.2　The scale map of model of fixture device

圖3　固定器成品圖Fig.3　The map of finished product of fixture device

圖4　固定器使用示意圖Fig.4　Schematic diagram of using fixture device

2.3使用方法

制作好的固定器平放在實驗臺上。抓住小鼠尾部，讓其頭處于固定器末端，利用小鼠喜鉆洞的特性，鉆入固定器內(有個別不愿鉆入者可用鑷子將其引導入內)；待小鼠進去之后，調節固定閥將小鼠固定圓筒內，再用革布封住，然后輕輕將小鼠兩后肢，從兩小孔拽出革外，再依據小鼠的身長在前端放置一帶孔的瓶蓋，用細鐵絲固定，以防止小鼠從前端逃竄；最后用夾子將革布夾住從而固定小鼠，并可調節松緊度(如圖4所示)。對于尾靜脈注射、肌肉注射等使用方法同發汗、止汗實驗使用方法。

3　討論

目前市面也一些固定裝置銷售，與田順亮、劉保新、劉輝、金永柱等[1,2,4,5]人設計制作了適用于大鼠或小鼠斷尾取血、尾靜脈注射、尾靜脈取血、肌肉注射等實驗的固定裝置相比，用途和構造基本相同；自制固定裝置多以塑料瓶設計制作，雖簡易、價廉，但易損壞，使用壽命短；市售固定裝置采用有機玻璃或不銹鋼材質制作，雖不易損壞，但固定裝置四周不能透氣，對動物傷害較大，不能較長時間固定動物。同時筆者發現以往研究報道的固定裝置均不適用于發汗、止汗實驗研究中小鼠的固定，雖然，王艷宏等[7]人通過自制小鼠固定裝置固定小鼠研究了麻黃的發汗作用，但尚未對小鼠固定裝置作相關報道。

筆者研發的用于觀察后足趾類實驗的小鼠固定器克服了現有固定裝置的不足，同時也適用于尾靜脈注射、斷尾取血等實驗操作，具有以下突出的優點：(1)材質為銅片，不易損壞；(2)固定器四周透氣，不會因為固定時間太長易導致其出汗過多影響實驗結果；(3)固定時不易對實驗者或動物造成傷害；(4)使用方便；(5)固定裝置結構簡單，利于生產、易于推廣，且所有材料均可清洗消毒處理，方便重復使用。本實驗室首次設計制作適用于觀察后足趾類發汗、止汗實驗等實驗操作的固定器，為實驗者提供簡單、安全、攜帶實驗工具。

[1]田順亮, 錢學華. 大鼠斷尾取血固定裝置的設計及取血的方法[J]. 中國比較醫學雜志, 2006, 16(7): 419-421.

[2]劉保新, 陳廖斌, 汪暉. 介紹一種簡易的大鼠固定裝置[J]. 中國比較醫學雜志, 2008, 18(3): 75-77.

[3]孟榮. 小白鼠固定器的制作及其應用[J]. 衡陽醫學院學報, 1985, 1(1): 51-54.

[4]劉輝, 康白. 小鼠固定器的制作與應用[J]. 臨床和實驗醫學雜志, 2010, 9(3): 227-228.

[5]金永柱, 蔣作君. 簡易小鼠固定器的制作[J]. 細胞與分子免疫學雜志, 2000, 1(1):87-87.

[6]施文, 孫永強. 小鼠尾靜脈注射和采血簡易固定裝置的制作和使用方法[J]. 免疫學雜志, 2011, 27(9): 807-808

[7]王艷宏, 王秋紅, 夏永剛, 等. 麻黃化學拆分組分的性味藥理學評價[J]. 中國中醫藥科技, 2011, 18(6): 489-491.

Development of fixture device in rear paws experiments for holding mice

SHI Jia, CHEN Jing, RAN Xiao-ku, WANG Xiao-tong, DOU De-qiang*

(College of Pharmacy, Liaoning University of Traditional Chinese Medicine, Dalian 116600, China)

To design and make a simple fixture device for holding mice in rear paws experiments as a safe and convenient experimental tool for sweating and hidroschesis experiments.

Mice; Rear paws; Fixture device; Production; Application.

國家重點基礎研究計劃(973計劃)項目(2013CB531803);2013遼寧省高等學校創新團隊課題(LT2013020);遼寧省教育廳一般項目(L2013364);遼寧中醫藥大學大學生創新創業訓練計劃資助(201510162000057)。

石佳(1994-)，女，本科，專業：中藥學。E-mail：1358227419@qq.com。

竇德強(1967-)，教授，研究方向：中藥活性成分及新藥研發。E-mail：deqiangdou@126.com。

技術方法

R-332

A

1671-7856(2016)07-0064-03

10.3969.j.issn.1671-7856.2016.07.011

2015-12-14