聚丙烯酰胺凝膠低毒性替代材料研究

王國瑀，楊美娟，王俊秀，王　磊，楊志偉，喻長遠（北京化工大學生命科學與技術學院，北京 0009）

聚丙烯酰胺凝膠低毒性替代材料研究

王國瑀1，楊美娟2，王俊秀2，王磊2，楊志偉2，喻長遠2
（北京化工大學生命科學與技術學院，北京 100029）

聚丙烯酰胺凝膠電泳廣泛用于分子生物學實驗。但是丙烯酰胺具有潛在神經毒性。我們采用N，N-二甲基丙烯酰胺（DMA）和N-（2-羥乙基）丙烯酰胺（HEA）兩種單體材料代替丙烯酰胺制備蛋白質凝膠。通過測定聚合反應體系的溫度變化，優化了體系中催化劑TEMED的加入量；通過實際的電泳實驗確定了單體與交聯劑與N，N-甲叉雙丙烯酰胺的配比，使其得到孔徑大小適宜的凝膠，并對這兩種凝膠的性能做出初步的評價。最后，將優化好條件的凝膠應用于Western Blot技術分析檢測BSA蛋白，蛋白條帶明亮清晰。

聚丙烯酰胺凝膠；低毒；材料

聚丙烯酰胺凝膠電泳以其低廉的分析成本、簡單的操作、良好的重復性、較短的分析時間等優勢，廣泛應用于生物、醫學、食品、農學等諸多學科領域蛋白質以及多肽類化合物的分離鑒定。其分離機制是在電場的作用下，蛋白質在聚丙烯酰胺凝膠所形成的網狀結構中發生遷移，其遷移的距離與電泳條件以及蛋白質分子的分子量大小、形狀及電荷量有關。而SDS-PAGE是在電泳緩沖溶和蛋白樣品溶中分別加入了離子去污劑（SDS）和強還原劑（β-巰基乙醇），使得蛋白質的遷移距離主要取決于蛋白質分子量的大小而忽略了蛋白質自身所帶電荷帶來的影響。……