生孢梭菌半固體培養(yǎng)基菌落計數(shù)方法的研究

劉曉菲（華北制藥河北華民藥業(yè)有限責任公司，河北藁城 052165）

生孢梭菌半固體培養(yǎng)基菌落計數(shù)方法的研究

劉曉菲
（華北制藥河北華民藥業(yè)有限責任公司，河北藁城 052165）

目的：建立使用半固體培養(yǎng)基進行生孢梭菌菌落計數(shù)的方法，使菌落計數(shù)結(jié)果能夠接近最大活菌數(shù)。方法：接種生孢梭菌的新鮮培養(yǎng)物至硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基中，30～35℃培養(yǎng)18～24小時，用0.9%無菌氯化鈉溶液稀釋生孢梭菌菌液至與標準比濁管相同的濃度，用10倍稀釋法分別稀釋至1×10-6、1×10-7、1×10-8三個稀釋級備用。分別配制瓊脂濃度為0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%、0.7%的6種硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基，分別取三個稀釋級的菌液1mL接種至配制好的上述6種硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基中，同時在胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基上接種等量菌液，并放入?yún)捬醮校瑢⒔臃N好的上述培養(yǎng)基至35℃培養(yǎng)18～24小時，進行菌落計數(shù)并比較結(jié)果。結(jié)果：半固體培養(yǎng)基計數(shù)法比厭氧袋計數(shù)法效果好，使用瓊脂濃度為0.5%的硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基，30～35℃培養(yǎng)18小時，菌落計數(shù)最多，最接近最大活菌數(shù)。結(jié)論：生孢梭菌半固體培養(yǎng)基計數(shù)法適用于生孢梭菌計數(shù)。

生孢梭菌；半固體培養(yǎng)基；菌落計數(shù)

藥品無菌檢查所用的培養(yǎng)基質(zhì)量是影響其試驗結(jié)果的一個重要因素，因此應(yīng)嚴格控制無菌試驗所用培養(yǎng)基質(zhì)量[1]。我國現(xiàn)行《中華人民共和國藥典》（2015年版）[2]規(guī)定無菌檢查所用培養(yǎng)基需進行靈敏度試驗，采用接種小于100CFU（菌落形成單位）靈敏度檢查用菌的方法。生孢梭菌是無菌試驗培養(yǎng)基靈敏度檢查的質(zhì)控菌之一，但是其計數(shù)方法缺乏可操作性。……