劉曉菲(華北制藥河北華民藥業有限責任公司,河北藁城 052165)
生孢梭菌半固體培養基菌落計數方法的研究
劉曉菲
(華北制藥河北華民藥業有限責任公司,河北藁城 052165)
目的:建立使用半固體培養基進行生孢梭菌菌落計數的方法,使菌落計數結果能夠接近最大活菌數。方法:接種生孢梭菌的新鮮培養物至硫乙醇酸鹽培養基中,30~35℃培養18~24小時,用0.9%無菌氯化鈉溶液稀釋生孢梭菌菌液至與標準比濁管相同的濃度,用10倍稀釋法分別稀釋至1×10-6、1×10-7、1×10-8三個稀釋級備用。分別配制瓊脂濃度為0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%、0.7%的6種硫乙醇酸鹽培養基,分別取三個稀釋級的菌液1mL接種至配制好的上述6種硫乙醇酸鹽培養基中,同時在胰酪大豆胨瓊脂培養基上接種等量菌液,并放入厭氧袋中,將接種好的上述培養基至35℃培養18~24小時,進行菌落計數并比較結果。結果:半固體培養基計數法比厭氧袋計數法效果好,使用瓊脂濃度為0.5%的硫乙醇酸鹽培養基,30~35℃培養18小時,菌落計數最多,最接近最大活菌數。結論:生孢梭菌半固體培養基計數法適用于生孢梭菌計數。
生孢梭菌;半固體培養基;菌落計數
藥品無菌檢查所用的培養基質量是影響其試驗結果的一個重要因素,因此應嚴格控制無菌試驗所用培養基質量[1]。我國現行《中華人民共和國藥典》(2015年版)[2]規定無菌檢查所用培養基需進行靈敏度試驗,采用接種小于100CFU(菌落形成單位)靈敏度檢查用菌的方法。生孢梭菌是無菌試驗培養基靈敏度檢查的質控菌之一,但是其計數方法缺乏可操作性。……