張曉圓, 李榮江, 孫繼賢, 孫硯輝, 張苗苗, 伍志學, 張韌, 鄺棗園
(1.廣州中醫藥大學基礎醫學院生物技術系,廣東廣州 510006;2.深圳市寶安區中心醫院普外科,廣東深圳 518102)
人參皂苷Rh2對LoVo細胞遷移和轉移能力的影響及機制研究
張曉圓1,李榮江2,孫繼賢1,孫硯輝1,張苗苗1,伍志學1,張韌1,鄺棗園1
(1.廣州中醫藥大學基礎醫學院生物技術系,廣東廣州510006;2.深圳市寶安區中心醫院普外科,廣東深圳518102)
【目的】 探討人參皂苷Rh2對人結腸癌LoVo細胞遷移和轉移能力的影響。【方法】通過四甲基偶氮唑鹽(MTT)比色法測定不同濃度Rh2對LoVo細胞增殖的影響,并確定用于研究抑制LoVo細胞遷移和轉移功能作用的Rh2濃度和作用時間。設置空白對照組及Rh2實驗組(5、10、20、40、60 μmol/L),通過劃痕試驗,對LoVo細胞劃痕加藥處理24 h后,觀察不同濃度Rh2對細胞遷移的影響。采用Transwell法觀察不同濃度Rh2對細胞轉移的影響。采用Western blot檢測不同濃度Rh2對CD44、基質金屬蛋白酶2(MMP2)、基質金屬蛋白酶抑制劑2(TIMP2)、E-Cadherin和β-catenin表達水平的影響。【結果】MTT結果顯示:0~40 μmol/L Rh2處理LoVo細胞24 h對其生長無明顯影響。隨Rh2作用時間的延長和濃度的增加,Rh2對LoVo細胞抑制作用逐步增強。劃痕試驗和Transwell結果表明:隨著Rh2濃度增加,其對LoVo細胞遷移和轉移能力的抑制作用增強,20 μmol/L以上濃度的Rh2處理LoVo細胞24 h與空白對照組比較具顯著抑制作用。Western blot結果表明:隨著Rh2濃度的升高,CD44、MMP2蛋白表達水平下降,TIMP2、E-Cadherin和β-catenin蛋白表達水平上升。【結論】人參皂苷Rh2對人結腸癌LoVo細胞遷移和轉移能力有抑制作用,其抑制作用具有時間和濃度依賴性。
人參皂苷Rh2;LoVo細胞;細胞遷移;細胞轉移;……